基础医学实验技术,基本操作技术 溶液的配制 缓冲溶液,天津医学高等专科学校 基础医学部 生物化学教研室 吕学儒,2018年10月26日星期五1时58分11秒,基 本 操 作 技 术,溶液的配制,缓冲溶液,P39,P40,P8,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验一 基本操作技术,实验目的掌握玻璃仪器的清洗； 学会正确使用吸量管、微量移液器、酒精计、粗天平的使用。玻璃仪器烧杯、试管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验一 基本操作技术,一、玻璃仪器的洗涤与清洁 （一）新购玻璃仪器的清洗,清水冲,沾洗衣粉刷,清水冲,蒸馏水洗,（二）使用过的玻璃仪器清洗,1.一般玻璃仪器,清水冲,沾洗衣粉刷,清水冲,蒸馏水洗,2.容量仪器,清水冲,铬酸洗液浸泡,清水冲,蒸馏水洗,3.比色杯,清水冲,盐酸洗液浸泡,清水冲,蒸馏水洗,2018年10月26日星期五1时58分11秒,二、刻度吸量管的使用量取10ml以下的任意体积时用。 刻度标记有两种：上为零刻度，下为总量刻度；上为总量刻度，下为零刻度的。放液后，将吸量管尖在容器内壁上垂直停留15秒即可。,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,近年来为了便于准确快速地选取吸量管，国际标准化组织统一规定：在刻度吸量管的上方印上各种彩色环，以利辨别，其容积标志如下表：,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验一 基本操作技术,吸量管的使用,选择,执管,取液,调准刻度,放液,洗涤,2018年10月26日星期五1时58分11秒,三、微量移液器的使用 1.调体积选取钮至所需数值。2.套上吸嘴，旋紧。3.垂直持握微量移液器外壳，按下大拇指至取液按钮。4.将微量移液器吸嘴插入溶液，徐徐松开大拇指，使其复原。5.排放时，重新将大拇指按下，比取液时高一档以排空。 注：移液过程中应控制速度，力度。如需移取另一样品，按吸嘴排放钮，更换吸嘴。,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,四、酒精表的使用选择酒精表的测试范围在70%80% v/v。在没有其他量器的条件下，将酒精以适量蒸馏水稀释，用酒精表检测浓度，当刻度指向75时即为消毒酒精。,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,五、托盘天平的使用 1调零点2. 称量 称量时，左放物，右放码。,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,3.称量完毕 砝码放回砝码盒中，游码移至刻度“0”处，天平的两个托盘重叠后，放在天平的一侧，使天平休止，以保护天平的刀口。,实验一 基本操作技术,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验目的熟悉三种浓度溶液配制；学习配制常用医用溶液 一、仪器与试剂 （一）仪器托盘天平、量筒（100ml、）、100ml烧杯、刻度吸管（10ml、5ml）、容量瓶（50ml）酒精计、玻璃棒、药匙、毛刷。 （二）试剂95%乙醇、NaCl固体、新洁尔灭、TD。,实验二 溶液的配制,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验二 溶液的配制,1.75%酒精的配制： 用95%（ml/ml)酒精配制75%的酒精50mL。 用酒精表测75%的酒精度2.配制0.1%新洁尔灭溶液50ml3.配制生理盐水50ml。4.制备1%TD消毒液10ml。,溶液的配制与稀释,2018年10月26日星期五1时58分11秒,1.缓冲原理： NaH2PO4Na2HPO4H2PO42- 是抗碱成分HPO42- 是抗酸成分 在溶液加少量的碱时， OH-与H2PO42- 电离产生的H+生成H2O，使溶液的PH值不发生明显变化。 在溶液加少量的酸时， H+与HPO42- 结合生成H2PO42- ，溶液的PH值也不发生明显变化。 所以，缓冲溶液具有抗酸、抗碱的作用。,实验三 缓冲溶液,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验三 缓冲溶液,2.配制缓冲溶液 用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 5.0毫升，浓度为0.2M NaH2PO4 10.0毫升，混匀后用pH试纸测定其pH值。 用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 10.0毫升，浓度为0.2M NaH2PO4 5.0毫升，混匀后用pH试纸测定其pH值。 问题：两种比例不同的缓冲溶液pH值为何不同？,2018年10月26日星期五1时58分11秒,3.缓冲溶液的抗酸、抗碱作用 将制好的两种缓冲溶液各分成两份，分别加入少量盐酸及少量氢氧化钠溶液，用pH试纸测定其pH值。 多加一些盐酸及氢氧化钠溶液后又有何变化，用pH试纸测定其pH值。,实验三 缓冲溶液,2018年10月26日星期五1时58分11秒,知识拓展,酒精又叫乙醇，是最常用的皮肤消毒剂，75的酒精用于灭菌消毒；50的酒精用于防褥疮；2050的酒精擦浴用于高热病人的物理降温。不同浓度的酒精都是由高浓度(95)酒精用蒸馏水稀释而成的。 酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。75的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于75时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。,2018年10月26日星期五1时58分11秒,实验报告1.名称 2.目的 3.材料4.方法5.结果6.分析,Thank You !,天津医学高等专科学校 基础医学部 生物化学教研室 吕学儒,