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HPLC原理介绍,reservior,injector,pump,column,detector,Data system,reservior,injector,pump,column,detector,Data system,流动相脱气,吹氦脱气法,加热回流法,抽真空脱气法,超声波脱气法,在线真空脱气法,HP-1100HPLC在线脱气结构示意图,1-高压输液泵; 2-贮液罐; 3-膜过滤器; 4-塑料膜管线; 5-传感器; 6-控制电路; 7-电磁阀; 8-真空泵; 9-脱气后流动相至过滤器; 10-脱气单元,溶剂过滤头的清洗,1.取下过滤头放在(1:4,V/V)的硝酸溶液烧杯中超声清洗15分钟; 2.取出后用蒸馏水超声清洗10分钟; 3.用吸球吹出过滤头中的液体; 4.再用蒸馏水超声清洗10分钟; 5.用吸球吹净过滤头中的水份; 6.将过滤头重新插入溶剂瓶中(正相系统注意将过滤头烘干),流程,泵体材料耐腐蚀,泵腔的体积要小,以便快速更换溶剂,能在高压下连续工作,耐压40-50MPa. cm2,压力平稳,无脉冲,高压输液泵,输出流量稳定,重复性高,输出流量范围宽,高压输液泵,恒流泵,恒压泵,注射型泵,往复型泵,双泵头往复式柱塞泵,双柱塞往复式串联泵,往复型泵工作原理图,双泵头往复式柱塞泵,1-流动相入口; 2,3-带有单向阀的泵头; 4-脉冲缓冲器; 5-偏心轮; 6-活塞; 7-电动机; 8-单向阀; 9-至进样口,双柱塞往复式串联泵,1-贮液罐; 2-泵I(柱塞I); 3-单向阀; 4-阻尼器; 5-泵II(柱塞II); 6-至色谱柱;,为什么要冲洗泵头呢?,1-低压计量泵; 1A,1B-时间比例电磁阀; 2-微处理机; 3-混合器; 4-高压输液泵; 5-至色谱柱,6-反馈控制器; 7-混合室; 8-流量计信号; 9-混合溶剂出口,高 压 梯 度,低 压 梯 度,1-程序控制器; 2-溶剂A; 3-溶剂B; 4-高压泵A; 5-高压泵B;,恒流泵中气泡的排除,打开放空阀,按仪器前面板的”溃洗耳恭听”功能键,用大流量溶剂冲洗系统直到流出的液体连续,证明气泡已经排除; 如果用”冲洗”状态仍不能吸液,可以用吸耳球或注射器在排液口抽吸,直至液体流出; 如果仍然无液体流出,可能是阀球阀座粘连,取出单向阀,向单向阀两端分别吹气,一通一堵为正常,两端均堵说明阀球座粘连,需清洗阀球阀座.,5重新连接色谱柱,设定适当流速,当流动相流出约30倍于色谱柱体积,并且检测器基线平衡后,流动相更换完毕,流动相的更换更换互溶流动相,1将新流动相置于储液瓶中,2打开放空阀,启动泵使新的流动相从入空阀出口流出20ml左右,3关闭放空阀,然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开,用小容器放置于过样阀的出口处,4启动恒流泵,让流动相从进样阀出口流出10ml左右,流动相的更换换缓冲液流动相,1用水更换色谱系统中缓冲液2用水含水量量10%60%范围的溶剂冲洗色谱柱中的盐3用新流动相更换水或冲洗色谱柱溶剂,流程,进 样 装 置,停流进样装置,六通阀进样装置,自动进样器,上一页,流程,高效液相色谱检测器,紫外检测器 折光指数检测器 电导检测器 荧光检测器 蒸发激光检测器,可变波长的紫外吸收检测器,二极管阵列检测器工作原理,干 法 装 柱 装 置,等比重匀浆装柱设备流程示意图,THE END,THANK YOU,
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