为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划smz大鼠在体小肠吸收,实验报告实验一、大鼠在体小肠吸收实验一、实验目的1掌握大鼠在体小肠吸收的实验方法。2掌握计算药物的吸收速度常数，以及每小时吸收率的计算方法。二、实验指导大多数药物以被动扩散方式从生物膜的高浓度侧通过膜向低浓度侧转运。被动扩散可用Fick第一定律来描述。该定律指出，扩散速度正比于膜两侧的浓度差，因此有：?dc?Ka?C?Ka(C?Cb)dt式中C是消化道中药物浓度，Cb是血液中药物浓度，Ka是吸收速度常数，其值大小取决于药物的扩散常数，吸收膜的厚度与面积，及药物对膜的穿透性。胃肠道吸收的生物学过程包括这样一个系统，即药物从胃肠道屏障的一侧向另一侧扩散。因为进入血液的药物很快分布到全身，故与吸收部位比较，血中药物浓度维持在很低的水平。几乎在所口服给药的情况下，对于胃肠道来说，血液的作用尤如一个“水槽”。并且在整个吸收相保持很大的浓度梯度，CCb，则CC，于是式可以简化为?dc?KaCdt此为一级速度方程式的标准形式。胃肠道按一级动力学从溶液中吸收大多数药物。用消化液中药物量的变化表示扩散速度，则：?dXa?KaXdt(3)将式积分，并在方程两侧同取对数。lnXa?lnXa(0)?Kat(4)式中Xa为消化液中药物量，Xa为零时刻消化液中药物量，Ka为药物吸收速度常数。以lnXa对t作图得一条直线，其斜率为药物在小肠中的吸收速度常数。三、实验内容与操作1仪器蠕动泵；分光光度计；红外灯；手术剪；止血钳；乳胶管；烧杯；固定板；电热恒温水浴锅。2试剂01%NaNO2液；%氨基磺酸铵溶液；%二盐酸萘乙二胺溶液；，(4)1mol/LHCl;(5)mol/LNaOH;(6)生理盐水；Krobs-Ringer试液；戊巴比妥钠溶液；磺胺嘧啶。3操作(1)取85ml供试液加入循环装置的烧瓶中。将实验前禁食一夜，体重200g左右的雄性大鼠，称重，腹腔注射戊巴比妥钠，麻醉后并加以固定。沿腹中线打开腹腔。自十二指肠上部及回肠下部各剪开一个小口，各插入直径为的玻璃管，用线扎紧，并用37的生理盐水将小肠内容物冲洗干净，然后将大鼠串联到循环装置中。开动蠕动泵，以5ml/分的流速循环10分钟后流速调至/分。自烧瓶中取样为药物和酚红零时间样品，并补加2ml酚红溶液其后每15分钟取样，同时补加酚红溶液。由于酚红不被小肠吸收，用以测定水被小肠吸收的量。4定量方法磺胺嘧啶的定量取样品1ml，加入1mol/LHCl5ml，加入%NaNO21ml，摇匀，放置3分钟，加入%氨基磺酸铵1ml，摇匀，放置3分钟。加入%萘乙胺2ml，摇匀，放置20分钟。在550nm处测定吸收度。参比溶液的配制：取1ml供试液按磺胺嘧啶的定量方法但不加萘乙胺显色剂。酚红定量样品，加入/LNaOH5ml，摇匀，在550nm测定吸收度。参比溶液：酚红的比色空白液为mol/LNaOH。5标准曲线的制备酚红的标准曲线精密称取酚红100mg，置1000ml容量瓶内，加1%Na2CO3溶液溶解并稀释至刻度，制成100g/ml的标准溶液。取1，2，3，4，5，6ml的标准溶液于10ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度。自上述各溶液中吸取，按酚红的定量方法测定吸收度，并绘制标准曲线。SD的标准曲线贮备液的配制：精密称取磺胺嘧啶标准品10mg，置100ml容量瓶中，以蒸馏水溶解并稀释至刻度，使成100g/ml的标准(转载于:写论文网:smz大鼠在体小肠吸收,实验报告)溶液。标准曲线制备：取上述贮备液适量，稀释至20g/ml的工作液，分别吸取2，4，6，8，10ml于10ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度。从上述溶液中各吸取1ml按SD定量方法测定吸收度，并绘制标准曲线。四、实验结果与讨论将实验数据按表1中公式进行计算，以剩余药量的对数对时间作图，求出吸收速度常数Ka，和每小时吸收率。零时间剩余药量?60分钟剩余药量零时间剩余药量每小时吸收率=100%表1大鼠在体小肠吸收量的计算式取样时S间吸收度循环前0D浓度C0C1酚吸收度红供试液体积浓度V0=85ml剩余药量AoAC0Po=85CP1=C1V1oA1A1A2C1C2C0V0V1=C1A2C2V2?(V1?)?C1?40C2P2=C2V2+P3=C3V3+(C1+C2).tnA3.AnC3.CnA3.C3.V3?(V2?)C2?40C3.Vn?(V1?)Cn1?40CnAnCnPn?CnVn?Cii?1n?1五、思考题1作好本实验的关键是什么？2在操作中应该注意哪些问题？专业：_姓名：_实验报告学号：_日期：_地点：_课程名称：_指导老师：_成绩：_实验名称：_实验类型：_同组学生姓名：_一、实验目的和要求二、实验内容和原理三、主要仪器设备四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析七、讨论、心得一、实验目的1、掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的试验方法。2、掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数和吸收半衰期t1/2的方法。二、实验原理1、研究药物消化管吸收试验方法：体外试验法、在体试验法和体内试验法。2、消化管吸收药物主要方式是被动扩散。这种形式的吸收不消耗能量，其透过速度与膜两侧的浓度差成正比，可用下式表示：-dQ/dt=DKS(C-Cb)/hdQ/dt：分子型药物的透过速度D：药物在膜内的扩散系数k：药物在膜/水溶液中的分散系数C：消化管内药物浓度Cb：血液中的药物浓度h：膜的厚度式说明药物透过速度属于表观一级速度过程：以消化液中药物量的变化率dx/dt表示透过速度，则：-dX/dt=KaXlnX=lnX0-KatlnX对取样时间t作图，可得一直线，从直线的斜率可求得吸收速度常数ka，其吸收半衰期t1/2为：t1/2/Ka小肠在吸收过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余的药量。酚红不被小肠吸收，因此向供试液中加入定量的酚红，在一定间隔时间测定酚红的浓度，就可以计算出不同时间供试液的体积，再根据测定的药物浓度，就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。三、实验仪器及试剂仪器：蠕动泵试剂：供试液、酚红液、20%乌拉坦、生理盐水、%NaNO2溶液、1mol/L盐酸、/LNaOH、%氨基磺酸铵(NH2SO3NH4)溶液、%萘乙二胺溶液四、实验步骤1、循环试验的操作恒温水浴调节：将水浴温度调节为37。供试液的准备：量取75-80ml供试液加入循环装置的烧瓶中，置恒温水浴中预热至37。生理盐水的准备：取生理盐水适量，预热至37备用。蠕动泵流速的调节：调节流速为5ml/min和/min。大鼠麻醉：取大鼠一只称重，按/kg体重腹腔注射乌拉坦麻醉，并固定于固定台上。小肠两端插管；沿大鼠腹部中线打开腹腔，在12指肠上部和回肠下部各切一小口，插入直径为的玻璃管，并用线扎紧。肠管洗涤：用注射器将37的生理盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物至净。作成回路：将肠管两端的玻璃管按图所示与胶管连接，作成回路，开动蠕动泵，其流速为5ml/min。取样：以5ml/min流速循环10min后，将流速调节为/min时，立即自供试液烧瓶中取样两份，分别作为SD和酚红零时间样品，另向烧瓶中补加酚红液2ml，其后每隔15min亦按同法取样及补加酚红液，共取样9次，停止循环。2、SD的测定取样品1ml置10ml带塞试管中?加入1mol/LHCl5ml，摇匀，?加%NaNO21ml，摇匀，放置3min?加%NH2SO3NH41ml，摇匀，放置3min?再加%萘乙二胺2ml，摇匀，放置20min。在550nm的波长处测定吸收度。比色空白液:取酚红液1ml代替样品，其余操作与样品处理一致。3、酚红的测定取样品置10ml带塞试管中，加/LNaOH5ml，摇匀，在555nm的波长处测定吸收度。比色空白液：/LNaOH五、实验数据记录和处理1、标曲回归方程：SD：y=(R2=)酚红：y=+(R2=)2、SD和酚红样品浓度计算计算结果如下表：表1大鼠在体小肠吸收量的计算SD取样时间abs浓度ug/ml循环前200酚红abs浓度ug/ml20供试液体积ml75剩余药量X1500lnX12lnXt作图，得一条直线，作图如下：图1大鼠在体小肠吸收后剩余药量对时间的曲线求得Ka=，t1/2=h3、每小时吸收率计算每小时吸收率=/零时间剩余药量*100%=%六、实验结果及分析实验结果详见实验数据记录七、讨论心得思考题：1、在体吸收实验法的特点是什么？在体试验法不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走,能避免胃内容物排出及消化管固有运动等的生理影响，对溶解药物是一种较好的研究吸收的试验方法。但本法只限于溶解状态药物，并有可能将其它因素引起的药物浓度的变化误作为吸收.。2、影响实验结果的主要因素有哪些？主要因素有：大鼠手术是否顺利，小肠内容物是否洗净，所取得药物量是否准确，蠕动泵的转速调节等。P.3、供试液中为什么要加入酚红？小肠在吸收过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余的药量。酚红不被小肠吸收，因此向供试液中加入定量的酚红，在一定间隔时间测定酚红的浓度，就可以计算出不同时间供试液的体积，再根据测定的药物浓度，就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。时间t/h1234酚红AA265A法莫替丁浓度体积酚红浓度ml剩余药量LN10731138115411811208A284目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。