为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划tsk凝胶柱材料TSK-GEL柱TSKGELHPLC柱广泛用于生物高分子的分析、提纯和离析。亲合柱高效、树脂基TSKGEL亲合柱，用于分离或提纯多种酶和其它蛋白质。表1叙述了所提供柱的特性。1TSKGEL凝胶过滤TSKGELSW和SWXL柱含硅胶基亲水键合相填料与蛋白质相互作用最小。普及型TSKGELSW和SWXL柱的性质列于表2。2TSKGELSWSWXL中Nacl水溶液。）一根30cmTSK-GELSWXL柱和一根60cmTSK-GELSW柱提供类似的分辨，但是SWXL柱只需一半时间。样的容量随柱长按比例增加。图A，在TSKGEL和TSKGELSWXL柱上具有相当的分辨。因为TSKGELSWXL柱和TSKGELSW柱是硅胶基质，绝不能超出推荐的PH：范围之外的操作。详细操作条件随柱资料中说明。我们建议用适当的SWXL柱和SW保护柱保护这些柱子。高分辨分析。15cm玻璃或不锈钢柱用5mSWXL载体填充。TSKGELPW和TSKGELPWXL柱用于工业水溶性聚合物和低聚糖的高性能凝胶过滤分离。这些柱的特性列于表3。亲水聚合物基质具有极好的化学和机械稳定性。虽然，通常使用含水溶剂，但该聚合物可与多达50有机溶剂相溶。亲水PW型树脂的亲水性不如多糖凝胶，因此，加入有机改性剂或有时需要减少盐浓度以降低疏水相互作用。除G-Oligo-PW和GXXPW之外，TSK型树脂具有少量剩余负电荷。TSKgelGMPW和TSKgelGMPWXL柱是在宽分子量范围内呈线性校正曲线的混合床柱。因为混合床柱的孔尺寸与窄孔尺寸柱相同，校正曲线的斜率要陡的多，这样就限制了分辨。当样品的分子量组成未知时，混合床柱对于其初步研究是理想的。当样品的分子量分布非常宽时，将选择具有某一孔尺寸的第二根柱串接，以提供最佳分辨。TSKgelG-Oligo-PW柱专门用于分离不带电的或阳离子低聚物。少量残存正电荷使得G-Oligo-PW和GXXPW柱不适于分析阴离子低聚物。另一种专用柱TSKgelG-DNA-PW柱与G6000PW柱的区别在于其颗粒尺寸更小，具有更高柱效，适于核酸分离。对于G2500PW到G6000PW和GMPW柱建议使用一根TSKgelPWH保护柱。对于所有PWXL柱和G-NDA-PW柱应使用TSKgelPWXL保护柱，使用Oligo保护柱保护G-Oligo-PW和GXXPW柱。可定购散装填料重新填充PW型柱和保护柱。疏水作用疏水作用色谱法和反相液相色谱法都是基于蛋白质的疏水性进行分离，并允许蛋白质选择性结合和吸附。但是HIC在相当低的结合能下分离并使用含水流动相。这些特性提供了不大可能干扰蛋白质构象的柔和分离方法。因此，HIC通常更好的保持物质活性。TSK-GELEther-5PW，-5PW和-NPR树脂基柱为色谱条件优化提供了一个疏水性范围。通过使用完全疏水的填料可使硫酸铵浓度降至最低。纯化完全疏水的蛋白质建议使用Ether-5PW柱。Ether-5PW和phenyl-5PW填料基质为TSKgelG5000PW树脂，因此，10m颗粒具有的孔径为1000?。Butyl-NPR填料是由m无孔颗粒制备，允许快速分析。这三种柱型都可用NaOH清洗。通过使用相应的Toyopearl散装树脂可以实现放大羟基磷灰石TSKgelHA1000羟基磷灰石柱分离蛋白质或核酸。这些柱力学性能稳定并提供高度可重复分离。蛋白质回收率典型值为90或更高，这部分归因于其大的孔体积。样品通过离子相互作用吸附和蛋白质或核酸同羟基磷灰石结晶结构的空间匹配而得到分离。向流动相中加入Cacl2将最大限度延长柱寿命，而不影响蛋白质或核酸的分离。通常，用于蛋白质分离的柱也可用于核酸分离。来自蛋白质样品的少量脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶污菌会使核酸降解。离子交换TSKGEL系列包含各种离子交换柱，适用于蛋白质、肽和小分子量有机离子的实验室规模样品纯制和分析。TSKGEL柱具有高柱效并兼作样品提纯而具有极好的回收率。现有多孔聚合物基质和硅胶基质的阴离子和阳离子交换剂以及无孔树脂柱。各种柱型的说明列于表4。TSKGEL5PW和NPR离子交换柱在PH212间稳定；TSKGELSW柱可用于PH：2。TSKGEL2SW离子交换柱最适于分离小分子量溶质，如核苷酸。较大生物分子，包括肽和小的蛋白质，可以在TSKGEL3SW离子交换柱上分析。宽孔径聚合物基5PW柱适用于分析和提纯大的蛋白质和核酸。cmXmm5PW离子交换柱的样品容量约1mg。在无孔TSKGELNPR柱上分析蛋白质和核酸时间缩短35倍。但是，蛋白质在这些柱上的样品容量小50100倍。TSKgelDEAE-NPR柱通常用于分离脱氧核糖核酸碎片，对于由聚合酶链反应得到的DNA碎片更为适宜。当分析聚合酶链反应碎片时，极力推荐DEAENPR保护柱以保护分析柱。在血红蛋白AIC筛选中，SPNPR柱可提供快速的结果。TSKGELNPR柱的颗粒尺寸小必须使用含m烧结物的预柱过滤器保护TSKGELNPR柱。基质官能团亲水树脂SiOSiO25125亲水树脂无孔-CH2CH2N+(C2H5)2-CH2CH-CH2CH-CH2CH2N+(C2H5)2+2N(C2H5)22N(C2H5)2CL-CL-CL-CL-反离子2-122-12PH范围30,00010,排阻限1,000,000容量小离子容量毫克当量/毫毫克当量/克毫克当量/毫毫克当量/毫升升升pKaSiO2SiO2基质亲水树脂亲水树脂亲水树脂颗粒尺寸250无孔孔尺寸官能团反离子PH范围排阻限容量小离子容量pKa-CH2CH2CH2SO3Na+2-121,000,00040毫克当量/毫升-CH2CH2CH2SO3Na+2-毫克当量/克-CH2COO-3Na+2-121,000,00045毫克当量/毫升-CH2COO-3Na+10,000毫克当量/毫升-CH2COO-3Na+30,毫克当量/毫升TSKGEL柱TSKGELHHR凝胶渗透柱适用的溶剂极性范围广。TSKGELHHR柱填料在多种溶剂中稳定表中数据表明溶剂从甲苯直至变为甲醇，凝胶颗粒并未溶胀或收缩。但是，这些柱溶剂不能换为极性溶剂，如水或水/甲醇混合物。这些柱含5m球形聚苯乙烯/二乙烯基苯颗粒，每支30cmx内径柱最低柱效为16,000塔板数。现有8种孔尺寸排阻限范围从G1000HHR柱约XX道尔顿到G7000HHR柱大于10,000,000道尔顿。图A也表示出4根混合床柱扩展了分子量测定的线性范围，适于样品筛选或更多形式的分析。TSKGELHXL型柱是球形苯乙烯一二乙烯基苯凝胶渗透柱，为有机可溶工业聚合物提供高分辨、稳定和可重复的体积排阻。如图A所示，这些柱可得到七种孔径的填料。小分子量化合物可在G1000HXL型柱上分析，而G7000HXL排阻限大大超过10,000,000分子量。可按用户配置将宽范围的特定孔径柱串接以使特殊样品达到最佳分辨。小颗粒尺寸的HXL柱适用于绝大多数要求的分离。混合床适于样品筛选，也可得到更经济，较低柱效的H6和H8柱。溶剂相容性TSKGELH型柱发货时含有四氢呋喃，只有GMHXLHT柱含邻二氯苯。发货时，THF溶剂可以被苯、氯仿、二氯乙烷、二氯甲烷、甲苯或二甲苯取代。在任何HXL柱中不能使用二氯乙烷和二氯甲烷。当改变溶剂时，使用2/分的线性速率梯度和毫升/分流速。如需要，也可供应含丙酮、氯仿、邻一二氯苯或二甲基甲酰胺的柱。目录1凝胶色谱2分类3分子筛效益4凝胶种类及性质5填料合成技术6实验技术凝胶色谱高温凝胶色谱仪凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。分类根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱和凝胶渗透色谱。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子，凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离，常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶，洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布，同时根据所用凝胶填料不同，可分离油溶性和水溶性物质，分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来，凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。化学结构不同但相对分子质量相近的物质，不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的。分子筛效益一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围，有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的，就会全部被排阻在凝胶颗粒之外，这种情况叫全排阻。两种全排阻的分子即使大小不同，也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙，即使它们的大小有差别，也不会有好的分离效果。因此，一定的分子筛有它一定的使用范围。凝胶色谱法原理在凝胶色谱中会有三种情况，一是分子很小，能进入分子筛全部的内孔隙；二是分子很大，完全不能进入凝胶的任何内孔隙；三是分子大小适中，能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。大、中、小三类分子彼此间较易分开，但每种凝胶分离范围之外的分子，在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同，但同属于凝胶分离范围内各种分子，在凝胶床中的分布情况是不同的：分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内，而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长。于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床，这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。另外，凝胶本身具有三维网状结构，大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大，小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时，按照分子量大小排队，凝胶表现分子筛效应。凝胶种类及性质聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂