中药制剂的检查,药物分析教研室,1,第一节 中药制剂杂质检查,制剂通则检查 一般杂质检查 特殊杂质检查 微生物限度检查/ 农残,检查内容,2,杂质的来源,第一节 中药制剂杂质检查,概念：中药制剂的杂质是指能危害人体健康或影响药物质量的物质 意义：评价制剂的优良 中药制剂本身的效力及其有无副作用 含杂质的程度及杂质对人体所发生的影响,3,中药制剂中杂质的来源 中药材原料中带入 在生产制备过程中引入 贮存过程受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生,杂质的来源,第一节 中药制剂杂质检查,4,中药材中混存的杂质 来源与规定相同，但其性状或部位与规定不符 来源与规定不同的物质（地道药材） 无机杂质，如砂石、泥块、尘土等,杂质的来源,第一节 中药制剂杂质检查,5,6,中药制剂杂质分类 一般杂质 特殊杂质,杂质的来源,指在自然界中分布较广泛，在多种药材的采集、收购、加工以及制剂的生产或贮存过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等。(药典）,指一些中药制剂中单独存在的杂质，在制备过程或贮存中可能产生的某一杂质，而非其他制剂均能产生的。在药典中列入个别制剂的检查项下。,第一节 中药制剂杂质检查,7,限量检查（limit test）（对照法） 取一定量与被检杂质相同的纯物质或其他对照品配制成标准溶液，与一定量供试药物的溶液，在相同处理条件下，比较反应结果，确定杂质限量是否超过规定所含杂质的最大允许量。,杂质限量计算,第一节 中药制剂杂质检查,8,限量检查 样品S中所含杂质的量是通过与一定量杂质标准溶液进行比较来确定，杂质的最大允许量也就是杂质标准溶液的体积V与浓度C的乘积，因此杂质限量计算公式：,杂质限量计算,杂质限量LVC/S,第一节 中药制剂杂质检查,9,例：阿胶砷盐检查(标准溶液法）,杂质限量计算,第一节 中药制剂杂质检查,10,例：黄连上清丸中重金属检查(标准溶液法）,11,例：黄连上清丸中重金属检查,12,药典中检查杂质：非标准溶液法（灵敏度法） 在供试品溶液中加入试剂，观察有无正反应 如：肉桂油中重金属检查:肉桂油10ml，加水10ml与盐酸1滴，振摇后，通硫化氢饱和，水层与油层均不应变色,杂质限量计算,第一节 中药制剂杂质检查,13,药典中未规定检查的杂质： 一般不需要检查，特殊情况如检验某成药时发现外观性状不正常，检验时反应不正常，应根据需要对问题进一步追踪检查。 认识尚不够，有待积累资料,杂质限量计算,第一节 中药制剂杂质检查,14,第二节 中药制剂一般杂质检查,一、重金属检查 二、砷盐检查法 三、铁盐检查法 四、有害元素测定 五、干燥失重测定法 六、水分测定法 七、炽灼残渣检查法 八、灰分测定法,15,第二节 中药制剂一般杂质检查,概念: 指在一定条件下的溶液中，能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质,重金属检查法,弱酸性条件下(pH33.5)与硫代乙酰胺作用：,Ag+、As3+、As5+、Bi3+、Cu2+、Cd2+、Co2+、Hg2+、Ni2+、Pb2+、Sb2+、Sn2+、Sn4+,碱性溶液中与硫化钠作用：,Bi2+、Cd2+、Cu2+、Co2+、Fe3+、Hg2+、Ni2+、Pb2+、Zn2+,代表,16,基本原理:,重金属检查法,Pb2+H2SPbS+2H+,第二节 中药制剂一般杂质检查,17,检查方法:,重金属检查法,第一法:硫代乙酰胺法 第二法:炽灼后的硫代乙酰胺法 第三法:硫化钠法,第二节 中药制剂一般杂质检查,18,19,适用于含芳环、杂环以及不溶 于水、稀酸及乙醇的有机药物,适用于溶于水、稀酸、乙醇 的药物,是最常用的方法,适用于难溶于稀酸但能溶于碱性 溶液药物(巴比妥类、磺胺类),第二节 中药制剂一般杂质检查,检查方法:酸性溶液法,重金属检查法,甲管,乙管,+标准铅溶液+醋酸盐缓冲液2mL+水or规定的溶剂,25mL,25mL,+供试品溶液,+硫代乙酰胺2mL，摇匀，放置2min，置白纸上，自上向下透视，乙管浅于甲管,范围：供试品不经有机破怀，在酸性溶液中显色的重金属限量检查,纳氏比色管,20,检查方法:炽灼残渣法,重金属检查法,甲管,硫酸0.51.0mL,供试品,+,蒸干,除尽氧化氮蒸气,炭化,放冷,低温加热除尽硫酸,+,硝酸0.5mL,放冷,+,+,盐酸2mL,水浴蒸干,水15mL,+,氨试液至对酚肽指示液显中性,+,醋酸盐缓冲液2mL,微热溶解,25mL,第二节 中药制剂一般杂质检查,放冷炽灼灰化,21,重金属检查法,配制供试液的试剂,磁皿,蒸干,醋酸盐缓冲液2mL+15mL水,微热溶解,25mL,乙管,水,第二节 中药制剂一般杂质检查,炽灼残渣法适用范围：供试品需灼烧破坏，取灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查,标准铅溶液,22,中药制剂一般杂质检查,检查方法:碱性溶液法,重金属检查法,标准铅溶液,25mL,25mL,+,+,供试品溶液,+,氢氧化钠5mL及水20mL,+,5d硫化钠试液,适用：检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重金属,23,中药制剂一般杂质检查,检查方法:微孔滤膜过滤法,重金属检查法,微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金属限量低的品种,24,中药制剂一般杂质检查,重金属检查法,仪器装置,A: 滤器上盖部分，入口处应能与50ml注射器紧密相联 B: 连接头 C: 垫圈 D: 滤膜，直径10mm，孔径3.0m，用前需在水中浸泡24小时以上 E: 尼龙垫网，直径10 mm F: 过滤器下部，出口处套上一合适的橡皮管,25,中药制剂一般杂质检查,检查方法:微孔滤膜过滤法,重金属检查法,标准铅斑的制备：精取标准铅溶液一定量，置烧杯中，用水或各样品规定的溶剂稀释成1Oml，加醋酸铅缓冲液(PH3.5)2ml与硫代乙酰胺试液1.0ml，摇匀，放置10min，用5Oml注射器转移至滤器中进行压滤(滤速约为1ml/min)，取下滤膜，放在滤纸上干燥，即得。,26,中药制剂一般杂质检查,检查方法:微孔滤膜过滤法,重金属检查法,检查法：取按各药品项下规定方法制成的供试液1Oml，照标准铅斑的制备，自“加入醋酸盐缓冲液(PH3.5)2ml”起，依法操作；将生成的斑点与标准铅斑比较，不得更深。,27,中药制剂一般杂质检查,注意事项,重金属检查法,1.方法灵敏度：标准铅溶液的用量以20g(即相当于标准铅溶液2ml)时加硫代乙酰胺试液，最适于目视法观察，30g,太深,2.反应条件：最佳pH值是3.5，醋酸盐缓冲液用pH计调节。硫代乙酰胺2mL，2min;滤膜过滤法：硫代乙酰胺1mL，10min;,28,中药制剂一般杂质检查,重金属检查法,3.供试液有颜色时的处理：,若稀焦糖溶液无法达到要求，加其他对测定无干扰的试液,稀焦糖液，调整标准溶液,稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖5g，置瓷蒸发皿或瓷坩锅中，加热炒成棕黄色糊状，用水溶解成25ml，贮于滴瓶中备用,29,中药制剂一般杂质检查,重金属检查法,含高铁盐抗坏血酸或盐酸羟胺，还原为亚铁离子 供试品为铁盐Fe3+转化HFeCl62-，用乙醚提取而除去，再加氨试液使呈碱性后，用氰化钾作为微量铁盐的掩蔽剂，再加硫化钠试液测定。(应用氰化钾试液时应特别注意安全，用完不得倒入酸缸中!) 为消除试剂夹杂重金属，对照溶液应取同样量试液在坩锅或瓷皿中蒸干后，依法检查。,4.其他离子干扰：,30,中药制剂一般杂质检查,重金属检查法,中药材及中药制剂的重金属与有机物结合存在 一般都需先行炽灼破坏，温度控制在500600 加硝酸加热处理后将亚硝酸除尽，因其可氧化硫化氢析出硫，影响比色检查 供试品溶液的pH仍为3.5左右,5.中药制剂中重金属检查的前处理：,31,中药制剂一般杂质检查,重金属检查法,标准铅溶液新鲜配制，玻璃仪器不得含铅 注意硫化钠的纯度 含Pb2+的中性或弱酸性溶液一般不应经滤纸过滤 供试品本身能生成不溶性硫化物时，可加入适当掩蔽剂 第四法：让注射器内管自然下降，产生的压力均匀;粘稠的样品溶液，可施加一均匀压力达到1mL/min，保证色斑的均匀性；排除气泡,6.其他,32,中药制剂一般杂质检查,概念,砷盐检查法,用于药品中微量砷限量检查的方法,方法,二乙基二硫代氨基甲酸银法,古蔡氏法,33,中药制剂一般杂质检查,古蔡法基本原理,砷盐检查法,锌+酸 初生态氢 挥发性砷化氢 黄色或棕黄色砷斑 溴化汞或氧化汞试纸,AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn2+3H2O,微量砷盐,+,Zn+2HClZnCl2+H2,34,中药制剂一般杂质检查,砷盐检查法,产生的砷化氢与溴化汞试纸作用,AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3 (黄色) AsH3+2As(HgBr)3 3AsH(HgBr)2 (棕色) AsH3+As(HgBr)33HBr+As2Hg3 (棕黑色),35,中药制剂一般杂质检查,砷盐检查法,五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为砷化氢，但生成砷化氢比三价砷慢。,AsO43-+ 2I-+ 2H+AsO33- +I2 + H2O AsO43-+Sn2+2H+AsO33-+Sn4+H2O I2十SnCl2 + 2HCl2HI十SnCl4,加入碘化钾、酸性氯化亚锡,36,加入各试剂作用,A. KI的作用还原剂：As5+As3+,37,B.酸性SnCl2的作用(还原剂),.将五价砷还原为三价砷(As5+As3+),进而促进AsH3不断生成,稳定的络离子,.将KI被氧化生成的I2再还原为I-,38,.SnCl2与Zn粒表面形成Zn-Sn齐起去极化 作用,使氢气均匀而连续地发生.,.SnCl2与KI存在，可抑制锑化氢生成，在试验条件下，100g锑存在不致干扰测定。,39,C.PbAc2棉花的作用,排除硫化物的干扰(1mgS2- ),40,中药制剂一般杂质检查,古蔡法检查方法,砷盐检查法,A：100mL标准磨口锥形瓶 B：中空的标准磨口塞，上连导气管C C：导气管（外径8mm,内径6mm) D ：具孔的有机玻璃塞 E：中央具有圆孔的有机玻璃旋塞盖,步骤：在导气管C中装入醋酸铅棉花60mg,再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸，盖上旋塞E并旋紧，即得。,41,中药制剂一般杂质检查,古蔡法检查方法,砷盐检查法,标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2mL，置A瓶中，加盐酸5mL与水21mL，再加碘化钾试液5mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540水浴中反应45min，取出溴化汞试纸，即得。,检查法： 取供试品溶液，置A瓶中，照标准砷斑得制备操作。将生成得砷斑与标准砷斑相比，不得加深。,42,中药制剂一般杂质检查,古蔡法注意事项,砷盐检查法,1.方法灵敏度：本法灵敏度约为0.75g(以As计)，砷斑色泽的深度随砷化氢量而定。药典中规定砷斑为2gAs(即取2ml标准砷液)形成的色斑。,供试品含砷限量各有不同，可按规定，改变供试品的取用量，来与标准砷斑比较。但不宜改变标准砷的量(如未指明时，一般常以2ml标准砷液)，来与供试品比较，因为标准砷斑过深或过浅都会影响比色的准确性。,43,中药制剂一般杂质检查,砷盐检查法,2.反应液的酸度及各种试液用量：反应液的酸度相当于2mol/L的盐酸溶液。KI：2.5，SnCl2：0.3，锌粒：2g,3.反应温度与时间：2540，45min,4.锌粒的影响：锌粒大小与反应速度快慢有关，所用锌粒应无砷，能通过一号筛的细粒（约2mm