资源预览内容
第1页 / 共136页
第2页 / 共136页
第3页 / 共136页
第4页 / 共136页
第5页 / 共136页
第6页 / 共136页
第7页 / 共136页
第8页 / 共136页
第9页 / 共136页
第10页 / 共136页
亲,该文档总共136页,到这儿已超出免费预览范围,如果喜欢就下载吧!
资源描述
实验研究的条件AEIR,Animal Equipment Information Reagent,第一章 常用实验动物 (小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠),实验动物学比较医学,教材: 现代医学实验动物学概论王钜 陈振文 主编,中国协和医科大学出版社,(2004) 主要参考书: 现代医学实验动物学施新猷主编,人民军医出版社,(2000) 实验动物学李厚达主编,中国农业出版社,(2002),凡从事医学实验动物饲育和动物实验工作的技术人员实行岗位资格认可制度。从事和参与医学实验动物工作的人员,必须掌握医学实验动物的基础知识、有关法律法规及各种规章制度,并取得医学实验动物技术人员岗位资格认可证书。 江苏实验动物从业人员上岗.mht 医学实验动物管理实施细则规定:应用不合格实验动物或在不合格的医学实验环境设施内进行的科学实验、鉴定或安全评价的结果无效。其研究成果不得上报,科研课题不能申请,论文不予发表,生产的产品不得使用。,实验动物,经人工繁育,对其携带微生物实行控制,遗传背景明确或来源清楚的用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。 实验用动物(Experimental Animals) 实验动物(Laboratory Animals):野生动物、经济动物、观赏动物和实验动物,实验动物的意义,现代科学技术发展的基本支撑条件可概括为:实验动物、 仪器设备、信息资料和化学试剂四个基本要素 。 在医药领域的作用: 研发:研究新合成的化合物的药理、毒理作用, 生产:是生物药品的生产重要的原材料,药品出厂前必须用实验动物作安全性和效果试验。,你可见过它们的原样?,你可知道这些数字?,全世界每年用于实验的动物数以千万计。 美国一家动物保护组织估计: 全美一年约有2800万只动物被用于实验,其中大约1800万只要被杀死。 英国每年因实验而死的动物是251万只 加拿大是166万只 荷兰是73万只,目前,在如何对待实验动物上,美国及欧洲国家广为采用的选择方案是“3R法则”。即: 减少(Reduction)尽可能地减少实验中所用动物的数量,提高实验动物的利用率和实验的精确度 优化(Refinement)减少动物的精神紧张和痛苦,比如采用麻醉或其它适当的实验方法 替代(Replacement)不再利用活体动物进行实验,而是以单细胞生物、微生物或细胞、组织、器官甚至电脑模拟来加以替代。 “3R法则”在发达国家已经普遍采用,并被许多国家列入了保护动物的法律及修正案中。,欧美的“3R法则”,荷兰疫苗技术的的进步对使用猴数量的影响 年代 技术 每年用猴数 1965 -使用进口的猴 用胰蛋白酶体内消化分离细胞 4570 -单层贴壁细胞培养 1970 -用微型SEPHADEX器代替贴壁培养 1590 1975 -用捕获繁殖的猴代替进口猴 463 1980 -用三级培养代替原代培养 -用体外胰蛋白酶消化代替体内消化 47 -灌注渗透技术的改进 20 现在 -用细胞株代替细胞培养 0,“三R”运动最终使实验动物的使用量逐步减少,质量要求愈来愈高,动物实验结果的准确性、可靠性也不断提高。“3R“反映了实验动物科学由技术上的严格要求转向人道主义的管理,提倡实验动物福利与动物保护的国际总趋势。,实验动物福利,动物福利(animal welfare)是指人为提供给动物的相应物质条件和采用的行为方式,要保证动物在健康舒适的状态下生存,使动物处于生理和心理愉快的感受状态。,动物保护的发展,1809年 英国勋爵 1822年 马丁法(Martin Act) 1866年 美国 “禁止虐待动物协会”, 反虐待动物法案 1966年 美国动物福利法 1985年 美国改善实验动物标准法、卫生研究扩展法,满足动物的需求是保障动物福利的首要原则。 动物的需求: 维持生命需要 维持健康需要 维持舒适需要。 这三个方面决定了动物的生活质量。 人为地改变或限制动物的这些需要,会造成动物行为和生理方面的异常,影响动物的健康,影响我们科学实验的真实性 。,解除动物的痛苦,让动物享有如下五大自由,是保障动物福利的基本原则: 1 享有不受饥渴的自由。 2 享有生活舒适的自由。 3 享有不受痛苦伤害和疾病的自由。 4 享有生活无恐惧和悲伤感的自由。 5 享有表达天性的自由。,科学家常常通过对动物实验的研究以及量化分析,将规律性的研究结果返回到人类社会进行检验,这些实验往往会折谢出人类与动物共性的弱点。因此,从某种意义上说 动物实验也是人生实验。 爱护动物,敬畏生命!,实验动物科学的发展趋势,实验动物使用总量下降,高质量实验动物使用量增加 实验动物品种、品系增加 实验动物模型走向商品化 实验动物替代材料的应用和替代方法的研究发展加快,实验动物 上.flv 实验动物 下.flv,选择实验动物的基本原则,选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物 选用结构简单又能反映研究指标的动物 选择适龄的实验动物 选择易获得、经济、易饲养管理的标准化动物 3R原则: Reduction(减少) Refinement(优化) Replacement(替代),实验动物选择时应注意的问题,体重 、性别 、生理状况、健康状况 实验动物微生物学寄生虫学等级 应注意影响动物实验效果的各种因素。尽可能选择其结构、功能和代谢特点接近于人类的动物,不同种属的动物对于同一刺激的反应也不同。 例如,过敏反应或变态反应的研究宜选用豚鼠,因为豚鼠易于致敏。因家兔体温变化灵敏,故常用于发热、热原检定、解热药和过热的实验。狗、大鼠、 家兔常用于高血压的研究。 实验动物品系的选择 同一种属动物的不同品系,对同一刺激的反应也有很大差异。 例如:DBA2小鼠100的可发生听源性癫痫发作;而C57BL小鼠根本不出现这种反应,实验动物等级,GB14922-2001实验动物微生物学和寄生虫学监测等级 一级 普通动物(conventional animal) 不携带主要人兽共患病原和动物烈性传染病的病原。一般为教学示范用。 二级 清洁动物(clean animal)除一级动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。 三级 无特殊病原体动物(specific pathogen free animal,SPF)除一、二级动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验有干扰的病原。国际标准实验动物 。 四级 无菌动物(germ free animal)无可检出的一切生命体。包括悉生动物。,实验动个体的选择 同一品系的实验动物,对同一刺激物反应存在着个体差异。年龄、体重、性别、生理状态和健康情况不同,往往导致对同一刺激的不同结果。,遗传背景,实验动物必须是遗传背景明确的品系动物 近交系:遗传均质性保证了实验反应的稳定性; 封闭群:较好地代表自然群体的遗传特性; F1杂交群:兼有近交系和封闭群的特点; 突变动物:往往具有某些鲜明的人类疾病模型特征。,近交系动物 (inbred animal),近交系动物是指杂种动物经过相当于20代全同胞兄妹单线连续繁殖,各条染色体上的基因趋于纯合,品系内个体差异趋于零。 个体之间极为一致,对实验反应一致,实验数据标准差较小,在实验中实验组和对照组都只需少量的动物。 隐性基因纯合性状得以暴露,可以获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型,如糖尿病、高血压等。这些动物家系清楚,取材方便,是进行基因连锁分析、遗传学、生理学和胚胎生物学研究的理想实验材料。,封闭群动物(closed colony),又称远交群(outbred stock)。是一个长时期与外界隔离,雌雄个体之间能够随机交配的动物群。其遗传组成比较接近于自然状态下的动物群体结构。 避免了近交衰退的出现,具有繁殖率高,疾病抵抗力、生育力强。 群内个体间而言,因其有杂合性,个体间的重复性和一致性不如近交系动物好。 封闭群动物一般适用于药物筛选、毒理安全试验和教学使用。,常用实验动物,小鼠 大鼠 兔 豚鼠 地鼠 犬 猫 猪 鸡 猴,生物学特性 解剖学特点 生理学特点 应用 主要品系,常用实验动物的特点,小鼠:不耐冷、热、饿,适合生活在新鲜、安静、室温23、相对湿度50%-60%的环境中。,大鼠:成熟早、繁殖力强。适配鼠龄,雄性为90日龄,雌性为80日龄;一般大鼠生育期为90300天,寿命为23年。,豚鼠:性情温顺,胆小,行动敏捷。适宜在清洁、凉爽、干燥和安静的环境中生活。,家兔:寿命4-9年,第一次配种期为7-9个月,孕期30天,哺乳期30-50天,一年可产3-5胎,每胎1-5只。,仓鼠:寿命1-1.5年,2个月性成熟可交配,每胎产仔5-6只,妊娠期16-18天,哺乳期20-22天。,猕猴(Macaca mulaiia)体形较小,毛一般为灰棕色,背后颜面部多呈肉色或更红些,栖息于山林中,好群居,常成百只生活在一起。由于猴的生理特点和人接近,因此是医学及生物学重要的实验动物。,比格犬(Beagle)体形较小,性格温顺,是最常用的实验用犬种。,第一节 小鼠,广泛的用于生物学、医学、兽医学、生理学、遗传学、药理、毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学。,一、小鼠的生物学特性,小鼠(mouse)脊椎动物门、哺乳纲、啮齿目、鼠科、鼠属、小家鼠种 。 实验小鼠来自野生小鼠,后经人们长期选择培育而成。,一般特性,体型小,性情温顺,易于饲养管理。 小鼠是哺乳动物中体型较小的动物,出生时体重1.5g,体长20mm左右。成年体重30-40g,体长110mm。 喜黑暗,昼伏夜动。 喜欢群居,雄性好斗。 胆小怕惊,对环境反应敏感,适应性差,汗腺不发达,怕热,高温容易中暑。,繁殖特性,发育迅速,性成熟早 小鼠出生后20日龄左右即可离乳,此时体重达14g(10-16g)左右,稍加饲育即可用于实验及科研(18-22g)。-周龄性成熟。雌性35-50d、雄性45-60d便可交配繁殖。配种最好在65-90日龄。 性周期短,繁殖力强 发情周期4-5d,妊娠期19-21d,哺乳期20-22d。每胎产仔8-15只,最多可达25只,年产6-9胎。生育期为1年,寿命2-3年,解剖学特性,尾巴较长,约等于体长,尾具有平衡、散热和自卫等功能。尾部有四条明显的血管,其背腹面各有一条静脉血管,两侧各有一条动脉血管。,正常生理生化指标,正常体温37-39 ,成年小鼠呼吸频率140-210次/分,心跳平均163次/分,血压:81-113 mmHg (10.8-18.1kPa)。 小鼠生长发育快慢与品系、营养、环境、带仔数的多少、生产胎次有密切关系; 染色体20对。,血液指标,血红蛋白:148(100-190)g/L 血细胞比容:0.415L/L 红细胞:9.3(7.7-12.5) *1012/L 白细胞:8(4-12)*109/L,二、小鼠常用品种、品系,、近交系小鼠 据不完全统计,近交系小鼠品系、亚系及其衍生物总共加起来有1000多个,但在国际上广泛应用的品系数目还是有限的据Festing对已发表的1600篇研究论文进行统计,C57BL/6是最为广泛应用的小鼠品系,其次是C3H品系,1600篇论文涉及到40多个常用品系,但最为常用的6-8个品系使用率达到70。对于绝大多数使用者只需要了解常用近交系小鼠品系的生物学特性。,中国培育的近交系小鼠有:TA1(津白一号) 、 TA2 (津白二号) 、 615系 引进的近交系小鼠有20多种,常用的有4种。 C3H小鼠:1975年从美国引进,毛色为野生色 C57BL/6小鼠:1975年从日本引进,毛色为黑色 BALB/c
网站客服QQ:2055934822
金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号