临床医学论文-1502 例呼吸道感染儿童中肺炎支原体感染分析作者：施前锋 王叶萍 陈岳明【关键词】 呼吸道感染 肺炎 支原体肺炎支原体(Mycoplasma Pneumoniae，MP) 是介于病毒和细菌之间的一种微生物，是造成儿童、老年人呼吸道感染的主要病原体，也是引起社区获得性肺炎的常见病原之一。作者随机采集有呼吸道感染患儿的咽拭子，用荧光定量 PCR（FQ-PCR）检测标本中 MP 含量，该方法有高度的敏感性和特异性。报道如下。1 临床资料1.1 一般资料 2006 年 1 至 12 月间本院儿科门诊和住院患儿，共 1502 例，其中男 877 例，女 625 例；年龄15 岁，平均 4.5 岁。临床症状为咳嗽、发热、气喘等，临床诊断为急性支气管炎，肺炎，哮喘，扁桃体炎及心肌炎等。1.2 标本采集 用无菌棉拭子直接擦拭患儿的咽后壁、扁桃体、假膜边缘后，放回试管送检。所有标本均在当天处理检测完毕。1.3 MP DNA 提取 用 1.5ml 生理盐水浸泡棉签，经反复振荡挤压后弃棉签，将剩余液体倒入离心管中，以 12000 rmin 离心 5 min，弃上清液，加入 50l DNA 提取液（中山大学达安基因股份有限公司）充分混匀，沸水浴 10min，12000rmin 离心 5 min 后备用，DNA 位于上清液中。1.4 FQ-PCR 扩增及结果分析 取上述上清液 2l 加入扩增管内，每次实验均设置阳性、阴性、空白对照。加完样后在 ABI 7000 扩增仪（美国 ABI 公司）上检测，扩增条件如下：95 2min 后，95 15s，56 45s 40 个循环。扩增完成后通过软件判断阴、阳性。1.5 统计学分析 运用 SPSS 10.0 for Windows 统计软件对数据进行处理，P0.052.3 不同月份 MP 阳性率比较 见表 2。7 月份感染率最高达 37.3%；8、9 月份次之，分别占 34.4%，29.5%。表 2 不同月份 MP 阳性率(略)注：Pearson Chi-Square 检验2=32.682；P=0.001，P0.052.4 不同年龄 MP 阳性率比较 见表 3。从表中数据可见 06 岁感染率为 14.5%31.9%，明显低于 715岁感染率（48.0%62.1%）。表 3 不同年龄 MP 阳性率(略)注：Pearson Chi-Square 检验 2=154.981，P=0，P0.05，不同年龄组间阳性率有显着性差异3 讨论支原体是细胞外生存、能在无细胞培养基中生长的最小微生物，肺炎支原体（MP)是对人类有致病性的主要支原体，是各年龄段儿童急性上、下呼吸道感染常见病原之一。许多资料显示 MP 年感染发病率为 9.6%66.7%,每隔 38 年有一次流行，并可在一个封闭环境中如学校、幼托机构、夏令营等造成暴发。本调查中 MP 感染率为 26.0%，明显低于庞保东报道河北地区的阳性率（47%），但和黄海辉报道上海地区2 岁儿童社区获得性肺炎的阳性率（26.7%）相近。MP 感染性别无显着性差异，这是由于人类对其有普遍易感性。波兰华沙资料中 36 岁是发病第一高峰，最高峰 1016 岁，占总数的 25%，而发病率最低为 06 个月龄组，仅 0.8%6。韩国首尔资料也显示 03 岁组 MP 抗体滴度最低，46 岁组和7 岁组滴度明显升高，而特异性体质对抗体滴度并无影响7。本资料中 715 岁儿童感染率最高，但并未显示1 岁儿童感染率最低。文献中婴幼儿期 MP 感染率较年长儿低，提示其感染概率确实低，但也有可能该年龄段 MP 感染症状不典型，易被漏诊或误诊。此外，Lind 等8认为婴幼儿产生抗体的免疫应答反应相对低下也是低抗体滴度的原因之一。作者采用 FQ-PCR 方法检测 MP DNA 能有效避免这些因素对调查结果的干扰。也有文献报道婴幼儿期 MP 高感染率，但据此得出 MP 感染的发病年龄越来越小的结论不妥。因此，MP 感染可发生在婴幼儿甚至新生儿，但高峰发病年龄依然是学龄前和学龄期。MP 感染全年均有散发，我国北方以冬季为主，南方以夏秋季为主。作者监测本地区 2006 年的情况中，以 7、8、9 月份的发病率最高。波兰连续28 年资料揭示 MP 的感染开始于每年的第 3 季度，高峰在第 4 季度，至次年的第 2 季度最低6。不同地域的气候，包括气温、湿度等均可影响 MP 感染的流行曲线9。 PCR 技术检测呼吸道分泌物中 MP DNA 是最敏感的方法，为更早期快速诊断MP 感染提供可能。更进一步，FQ-PCR 技术是将 PCR 技术的灵敏性和探针技术的特异性结合。Maltezou 等10应用此方法在痰液中检测 MP，发现 22.0% MP-IgM 阴性的 MP 感染病例。目前该技术已有取代测定血清中抗体滴度的趋势。【参考文献】1 Caillat J, Flahault A, De Barbeyrac B, et al. Community epidemiology of chlanmydiae pneumoniae in LRTI in France over 29 months. Eur Epidemiol, 2005, 20(7): 643651.2 Macfarlane J, Holmes W, Gard P, et al. Prospe ctive study of the incidence, actiology and outcome of adult lower respiratory tract illness in the community . Thorax, 2001, 56(2): 109114.3 Nagalingam NA, Adesiyon AA, Swanaton WH, et al. Prevalance of mycoplasma pneumoniae and chlamydia pneumonia patients in four major hospitals in Trinidad. New Microbiol, 2004, 27(4): 345351.4 庞保东，董 琰，张慧玉，等. 儿童社区获得性肺炎非典型病原体临床分析.中国综合临床，2005，2（9）：849850.5 黄海辉，张婴元，黄绍光，等. 上海地区社区获得性肺炎的病原学调查. 中国抗感染化疗杂志，2003，3（6）：321324.6 Rastawicki W,Kaluz ewski S,Jagielski M,et al.Epidemiology of mycoplasma pneumoniae in poland:28 years of surveillance in warsaw 19701997.Eur Surveill,1998,3(10):99100.7 Yu J,Yoo Y,Kim do K,et al.Distribution of antibody titers to mycoplasma pneumoniae in korean children in 20002003.J Korean Med Sci,2005,20(4):542547.8 Lind K, Bentzon MW.Ten and a half years seroepidemiology of mycoplasma peumoniae infection in Denmark.Epidemiol Infect,1991,107(2):189199.9 陆权，陆敏.肺炎支原体感染的流行病学.实用儿科临床杂志，2007，55（8）：241243.10 Maltezou HC, La-Scola B, Astra H,et al.Mycoplasma pneumoniae and legionella pneumophila in community-acquired lower respiratory tract infections among hospitalized children:Diagnosis by real time PCR.Scand J Infect Dis,2004,36(9):639642.