1,洁净厂房空调系统 & 灭菌法和无菌保证,2,一、洁净厂房,概述 药片是特殊商品，除了必须严格控制药片的成份以外，还必须控 制微生物量。随着科学技术的深化，发现细菌等微生物在空气中 难以存活，它必须依附在尘埃上才能存活。科学家和工程师根据 微生物生存特性，研制不同类型的过滤器，通过多道过滤，最终 根据药片生存要求，可以达到100,000级，10,000级和100级洁净 度要求。同时，通过冷冻除湿或氯化钙转轮除湿方法，达到生产 车间舒适或低湿要求，温度也可通过换热器控制。,3,一、洁净厂房, 药品生产企业必须有整洁的生产环境。 厂区的地面、路面及运输等不应对药品的生产造成污染。 生产、行政、生活和辅助区的总体布置应合理，不得互相防碍。 相邻的厂房之间的生产操作不得相互防碍。 在遵守国家总体工业规划的同时，选择大气含尘、含菌浓度低、无有害气体，自然环境好的区域。 平面布置合理，人流、物流分开，避免交叉污染。 厂区绿化尽量多种草坪，少种花粉类的植物。,4,1-1 洁净厂房设计, 药厂总平面布置和工艺布局的总设计 整洁的生产环境，人流物流分开，相互不受影响，不会造成交叉污染。 洁净厂房设计方法 全封闭全空调，人流物流放开 洁净度通过缓冲逐级提高，达到无菌的要求。100级无菌室的设计，目前国际上一般采用比较经济的做法：通过缓冲达到10万级，再通过缓冲达到1万级，最后在1万级房间局部加层流罩达到100级。,5,1-2 工艺布局, 按照生产工艺流程及所要求的空气洁净等级进行合的理布局，同一厂房内的生产操作不能相互影响，不同洁净度区域之间人员和物流出入，要设缓冲区，防止交叉污染。 取样室（可设在储藏区）、称量室、备料间空气洁净度与生产要求一 致。 足够大的中间储藏室、设备清洗和储存、卫生设备清洗和储存。 生产区和包装区分开，更衣室分开。 不同洁净度工作服分别清洗、整理。 取样室、中心称量室，采用层流设计。,6,1-3 洁净厂房建筑要求, 洁净室（区）的内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落，并能耐受清洗和消毒。墙壁与地面的交界处宜成弧形或采取其他措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。 洁净室（区）内各种管道、灯具、风口以及其他公用设施，在设计和安装时，应考虑使用中避免出现不易清洁的部位。与墙壁或天棚的连接部均应密封。 洁净室（区）应根据生产要求提供足够的照明。主要工作室的照度宜为300勒克斯，对照度有特殊要求的生产部位可设置局部照明。厂房应有紧急照明设施。 洁净室（区）安装的水池、地漏不得对药品产生污染。100级洁净 （区）不得设置地漏。,7,1-4 空调设计,1-4-1 空气平衡和流向 空气从洁净室流向次洁净室。 生产区对外保持正压（10PA） 活性物质生产室保持负压。 易产生粉尘的车间为负压。 开口工段为正压。（或局部层流） 洁净设备间为负压。 洁净房间对隔层和机房为正压。 生产车间内办公室保持正压。,8,1-4 空调设计,1-4-2 气体组织 包装车间、更衣室、走廊和浴室采用上送上回。 生产车间、灌装车间、储藏室采用上送下回。 洁净车间不得采用走廊回风。 洁净区无法采用上送下回时，可采用侧送侧回，但要注意气流是否流过生产操作面。 风口设置时，注意气体流能保护操作面。,9,1-5 环境系统验证,1-5-1 环境控制确认 确认100级无菌区，10,000级和100,000级洁净区，辅助洁净区室尘埃粒子的控制。 安装确认 环境控制区域相应的被批准的设计图及有关流向图（空气流向、压差、温度、湿度、人流、物流）。 系统描述和设计特征。 有关文件有：DOP测试、完整性试验、环境参数文件 仪表校验文件、操作手册和标准操作法。,10,1-5 环境系统验证, 运行确认 确认整个环境调试、运行时达到设计要求。搜集调试运行时数据（温度、相对湿度、风速、换气次数、风压、风量、空气流向以及机电设备运行状态参数）。 测试总尘埃粒子和菌落数，证明系统运行达到设计要求。 主要性能测试：空气平衡（空气总风量、新风量、回风量、空气流向和空气分配）；温度、湿度和照度测试；空气压力和控制测试；悬浮粒子数测试；外界诱导空气测试；粒子分散和过渡过程持续时间的测试微生物测试（悬浮菌和沉降菌）。,11,1-5 环境系统验证,1-5-2 验证 尘埃粒子测定 浮游菌和沉降菌测定 初次测试不合格处理 验证时，总尘埃粒子或空气菌落数测试结果超过范围需在不合格后紧接在原取样点重做二次，二次结果合格都放入表格内，可认为通过验证。 重做菌落样前房间需消毒,12,说明 1 尘埃粒子、浮游菌、沉淀菌在验证区域满足洁净级别要求。 2 如果超出标准，每超出标准的取样点必须重新取样2次测试。每次重新测试的结果必须符合验证标准。重新测试的样品必须尽可能在不合格结果后立刻取样。 3 重新测试取样之前，必须清洁有菌落样的区域。,13,4 验证取样条件 4-1 在取样空气系统验证区域必须连续运行6小时以上，层流必须运行30分钟以上、在取空气有菌量的区域，必须在取样消毒。一旦验证开始，系统必须每天24小时，一周7天运行。 4-2 动态是指灌装机运行（但无粉灌入），测试区内有操作人员存在的情况下取样。 4-3 静态是指在生产完成后，测试区无人的情况下，经过15分钟-20分钟的净化后，再对测试区进行取样。 4-4 记录整个验证时期的温度、湿度和压差的操作参数。 4-5 高效过滤器每年必须进行完整性测试和记录。,14,E-5 欧洲和美国的GMP对环境控制要求,1 概论 欧洲共同体药物控制局（MACThe Medicines Control Agency）环境控制要求，验证环境控制要达到A，B，C，D条件。美国标准209E中提出无菌100级，清洁10,000级和辅助100,000级的微粒和微生物控制要求。 2 A，B，C，D分级定义 A级 高风险操作区，即直接影响操作的区域。像隧道灭菌烘箱、无菌灌装、瓶子开口处、高压灭菌冷却区等需用100级层流。直接影响产品质量，称A级。 B级 间接影响无菌操作区，直接环绕A级区域的地方，像无菌灌装房间、高压灭菌冷却房间。 C和D级 进入无菌生产区的过度性洁净区。准备间、更衣间和缓冲间。,15,3 欧洲洁净级别要求 洁净级别 总平均粒子数 浮游菌 沉淀菌 欧洲（EU） 209E美国 0.5M 5M CFU/M3 CFU/4 Hours A级（静态） 100级 25P/ft3或875P/M3 0 1 1 A级（动态） 100级 100P/ft3或3500P/M3 0 1 1 B级（静态） 100级 100P/ft3或3500P/M3 0 2 2 B级（动态） 10,000级 10,000P/ft3或350,000P/M3 58P/ft3或200P/M3 5 5 5 C级（静态） 10,000级 10,000P/ft3或350,000P/M3 58P/ft3或 200P/M3 20 20 C级（动态） 100,000级 100,000P/ft3或3,500,000P/M3 580P/ft3或 20,00P/M3 50 50 D级（静态） 100,000级 100,000P/ft3或3,500,000P/M3 580P/ft3或 20,00P/M3 100 50,16,5 验证取样标准 5-1 空气有菌量应用生物空气取样器取样，使用标准TSA培养基盘。 5-2 所有工作水平面的空气有菌量和颗粒取样应在工作活动平面层流方 向取样（灌装线瓶子开口处，及离地 750-1000mm）。 5-3 每个取样点的工作水平取样1ft3的空气样，测试大于等于0.5m 的颗粒总数。计算每立方英尺的空气颗粒平均数。 5-4 在A，B，C和D级的每个房间的工作水平应取样5次， 每次1立方 英尺，测总颗粒数。,17,E-6 日常生产环境监控,1 无菌生产区环境监控 1-1 生产洁净级别划分 洁净级别 适应室（区） EU 209E A级（静态） 100级 无菌灌装机、灭菌隧道、高压无菌斧出料冷却车 A级（动态） 100级 同上 B级（静态） 100级 无菌灌装室（区）、高压灭菌斧的冷却室（区） B级（动态） 10,000级 同上 C级（静态） 10,000级 进高压灭菌斧准备间、清洗设备室、消毒、更衣、缓冲、走廊 C级（动态） 100,000级 同上 D级（静态） 100,000级 洗瓶、隧道、洗衣房、更衣室、第一缓冲室、进洗室前缓冲室,18,1-5 环境系统验证,1-5-3 欧美洁净级别比较 洁净级别 总平均粒子数 浮游菌 沉淀菌 欧洲（EU） 209E美国 0.5M 5M CFU/M3 CFU/4 Hours A级（静态） 100级 25P/ft3或875P/M3 0 1 1 A级（动态） 100级 100P/ft3或3500P/M3 0 1 1 B级（静态） 100级 100P/ft3或3500P/M3 0 2 2 B级（动态） 10,000级 10,000P/ft3或350,000P/M3 58P/ft3或200P/M3 5 5 C级（静态） 10,000级 10,000P/ft3或350,000P/M3 58P/ft3或 200P/M3 20 20 C级（动态） 100,000级 100,000P/ft3或3,500,000P/M3 580P/ft3或 20,00P/M3 50 50 D级（静态） 100,000级 100,000P/ft3或3,500,000P/M3 580P/ft3或 20,00P/M3 100 50,19,灭菌法和无菌保证,灭菌的定义：将物体上的所有微生物包括细菌芽孢全部杀死或除去的措施 。 灭菌法是指杀死或除去所有微生物的方法，是灭菌药剂生产的主要过程，对于注射剂尤为重要。微生物包括细菌、真菌、病毒等，凡有生命的地方都有微生物存在，微生物繁殖很快。细菌的芽胞具有较强的的抗热力，不易杀死，因此灭菌效果，应以杀死芽胞为标准。在药剂中选择灭菌方法，与微生物学上的要求不尽相同，不但要达到灭菌的目的，而且要保证药物的稳定性。常见的灭菌法有热压灭菌、干热灭菌、紫外线照射灭菌、过滤除菌和化学药剂灭菌。,20,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,微生物致死间曲线与D值 ：人们对微生物死亡的动力学研究表明，其死亡速度属一级过程，在一定温度下符合下述方程,式中N。为原始微生物数，Nt为残存的微生物t时残存的微生物。残存数的对数时间作图，得一条直线，直线的斜率K2.303，K为速度常数，单位为时间。,21,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,为了方便起见，引用D，并定义D为一定温度下杀死被灭菌物品中微生物数的90(降低一个对数值 )所需时间，可描述为：,22,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,D值因微生物的种类、环境、灭菌温度不同而各异,下表为不同灭菌法不同微生物的D值 ：,23,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,Z值：一旦在不同温度下对特定的微生物的在特定介质或环境中求得D值后，就可用logD值对温度作图，在一定温度范围内，logD与T呈直线关系，直线的斜率logD2logD1T2T1， 由于此斜率为负值，为避免引入负数，而提出Z值的概念，ZTT1logD2logD1，故定义Z值为降低一个logD值需的温度数，也可以认为Z值是降低微生物数90所需要的温度数。,24,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,25,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,不同溶液以嗜热脂肪芽孢村菌测定Z值,26,F与Fo值在灭菌中的意义与作用,F值与Fo值数学表达或可表示如下：,t是测量被灭菌物温度的时间间隔， F为在一定温度（T），给Z值所