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小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验,山东师范大学生命科学学院 邢维贤,目的要求 实验原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告,目的要求,1了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3了解细胞吞噬实验的研究意义,基本原理,吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式,也是高等动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,会向异物处聚集,将其内吞入细胞质,形成吞噬泡,然后吞噬泡与溶酶体融合,将异物消化分解。 吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助,如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞,则可阻断吞噬泡的形成;免疫抑制剂环磷酰胺(CYP)对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。 通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬,计算吞噬百分数和吞噬指数,可以分析判断机体的免疫水平。,实验用品,1器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、 载玻片、盖玻片、吸管等 2试剂: 0.85%生理盐水;阿氏(Alsever)血液保存液;蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用。 3材料:小白鼠;1%鸡红细胞悬液,方法与步骤,鸡翼下静脉取血后,加生理盐水离心两次,然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水,调至鸡红细胞浓度为1%。,实验前三天,每天向小鼠腹腔注射2%的蛋白胨溶液1ml,实验前1小时,向腹腔内注射1%鸡红细胞1ml。,脱椎致死,吸取腹腔液,在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水,向其中滴加一滴腹腔液,静置10分钟,使腹水细胞贴壁,弃去生理盐水,待其稍干后,进行瑞氏染色。,未被吞噬的鸡红细胞,吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞,实验报告,镜检时,你能在视野中看到几种类型的细胞? 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。 活化的吞噬细胞的数量 吞噬百分数= 100个吞噬细胞 活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量 吞噬指数= 100个活化的吞噬细胞,
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