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激光共聚焦步骤:1. 细胞用4%的多聚甲醛固定20min(时间不宜太长),用PBS洗3遍。2. 用0.1%曲拉通-100透膜10min(摇动),用PBS洗三遍。3. 用5%的BSA封闭1h或过夜(摇动),用PBS洗三,加一抗孵育2h,用PBST洗三遍,加二抗孵育1h,碧云天DPAI5min(不宜过长)洗三遍(可多洗几次每次5min)。4. 封片,看片。
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