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细胞中的元素和化合物1.研究细胞中元素和化合物的基本方法元素是对具有相同核电荷数的一类原子的总称。不同元素的发光光谱(元素的原子受到刺激时所呈现的特有颜色)是不一样的,由元素发出来的光谱,用分光器(棱镜或光栅)大体上可以辨别是什么颜色。另外,也可以由元素的吸收光谱来判断。每种化合物都有它独特的红外光谱,可以作为化合物的“指纹”。鉴定一种化合物,要先根据化合物的来源和其他性质提出有限的几个可能化合物,然后把它的光谱和这些已知化合物的光谱相比较。另外,还可以用电子光谱、旋光度、核磁共振、质谱法、X射线、衍射等方法来进行分析。2.植物体和土壤的部分元素含量的比较表7 植物体和土壤部分元素含量比较表元素植物的平均组成(新鲜物重量比例)/%土壤的平均组成/%CHCaKNSiMgPSNaClFe701810.50.50.30.30.20.040.070.050.020.020.01502-1.41.50.1340.60.10.050.70.0143.检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的其他简易方法(1)检测生物组织中糖类的其他简易方法Molisch反应(- 萘酚反应) 此方法是鉴定糖类最常用的颜色反应。它的原理是:糖类在浓酸作用下所形成的糠醛及其衍生物可以与- 萘酚作用,形成红紫色复合物。由于在糖溶液与浓硫酸两液面间出现红紫色的环,因此又称紫环反应。- 萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替,麝香草酚溶液比较稳定,其灵敏度与- 萘酚一样。除了糖类之外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等都可以呈现近似的阳性反应。因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应只能说明有糖类存在的可能。蒽酮反应 糖类经浓酸水解,脱水生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10-酮-9,10-二氢蒽)反应生成蓝绿色复合物。Benedict反应 班氏试剂是斐林试剂的改良(也是含有Cu2+的碱性溶液),能使具有自由醛基或酮基的糖类氧化,其本身则变成砖红色或黄色的Cu2O,可用来测定还原糖的存在。它利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂,其碱性比斐林试剂弱,灵敏度高,干扰因素少,因而在实际应用中有更多的优点。Bial反应(甲基间苯二酚反应) 戊糖与浓盐酸加热形成糠醛,在有Fe3+存在的条件下,它与甲基间苯二酚(地衣酚)缩合,形成深蓝色的沉淀物(此沉淀物溶于正丁醇)。己糖也能发生反应,产生灰绿色甚至棕色的沉淀物。(2)检测生物组织中脂肪的其他简易方法油点试验(spot test) 将含有脂肪的混合物磨碎后擦在一片滤纸(或牛皮纸)上,然后朝向光源观看,应该有半透明的油点出现。此油点不能挥发掉。当滤纸浸过苯(或醚、异丙醇等)后,油点消失;或将混合物磨碎后溶于苯液中,然后过滤。取一滤纸放入滤液中,取出后让苯挥发,朝向光源观看,如有半透明油点存在,则证明混合物中含有脂肪。乳液形成试验(emulsion test) 将一含有脂肪的混合物溶液稍微加热,加入少量乙醇,摇匀后静置。脂肪可分散成许多微粒,形成白色乳状液。(3)检测生物组织中蛋白质的其他简易方法对各种氨基酸特异的某些颜色反应(见表8),可用来检测含有这些氨基酸的蛋白质。这些颜色反应包括Millon反应、黄蛋白反应、茚三酮反应以及Hopkins-Cole(水合乙醛酸)反应等。Millon反应 米伦试剂为硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸汞的混合物,能与单酚及双酚和吲哚衍生物产生颜色反应,但不能检验尿蛋白。茚三酮反应 蛋白质、多肽和各种氨基酸具有茚三酮反应。除无氨基的脯氨酸和羟脯氨酸呈黄色外,其他氨基酸生成紫红色,最终为蓝色化合物。黄蛋白反应 它是芳香族氨基酸,特别是酪氨酸和色氨酸蛋白质所特有的颜色反应。表8 部分氨基酸的颜色反应所测定的氨基酸名称试剂颜色精氨酸半胱氨酸半胱氨酸组氨酸,酪氨酸色氨酸色氨酸酪氨酸酪氨酸酪氨酸,色氨酸苯丙酪氨酸Sakaguchi(坂口)反应硝普盐反应Sullivan反应Pauly反应水合乙醛酸反应(Hopkins-Cole反应)Ehrlich反应Millon反应Folin-Ciocalteu反应黄蛋白反应- 萘酚和次氯酸钠硝普钠(亚硝基铁氰化钠)溶于稀氨溶液中萘醌-1,2-4-磺酸钠和亚硫酸氢钠重氮化的对氨基苯磺酸溶于碱性溶液水合乙醛酸溶于硫酸中对二甲基氨基苯醛溶于盐酸中硝酸汞溶于亚硝酸,加热磷钼钨酸煮沸的浓硝酸红红红红紫蓝红红黄
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