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快速微生物鉴定快速微生物鉴定 传统方法与最新技术 中国人民解放军总医院微生物科 沈定霞 主要的快速鉴定试验主要的快速鉴定试验 斑点吲哚试验斑点吲哚试验 斑点氧化酶试验斑点氧化酶试验 PYR试验 芽管试验芽管试验 需氧菌的触酶试验需氧菌的触酶试验 快速斑点快速斑点CAMP试验试验 试管血浆凝固酶试验试管血浆凝固酶试验 胆汁溶解试验胆汁溶解试验 CLSI M35-A2 保护工作人员,正确处理患者,防止病原菌扩 散 不用生化反应,商业设备,过夜培养 20022008 大肠埃希菌 ?初步:G-杆菌,非迁徙生长,在羊血平板(BAP)上 有溶血环,或麦康凯或伊红美兰平板上分解乳糖, 斑点吲哚阳性,氧化酶阴性 ?明确:吡咯烷酮奈酰胺(PYR)试验阴性。如BAP平 板上无溶血环,乳糖阴性,应采用MUG试验,阳性 可鉴定为大肠埃希菌。 ?注意: 1.如来自无菌部位应进一步鉴定以确定不发酵乳糖的大 肠埃希菌 2.99%E.coli O157:H7 MUG阴性 铜绿假单胞菌 ?初步:革兰阴性杆菌,氧化酶阳性, 具有特殊 气味(醇香的葡萄味或玉米饼味) ?明确:菌落有金属光泽或珍珠光泽,产色素,或 呈粘液型菌落,可鉴定为铜绿假单胞菌。 ?注意: 1.如无气味或色素,应在42生长 2.从囊性纤维化病人分离的铜绿假单胞菌形态不典型,有 时与洋葱伯克霍尔德菌菌落相似,应注意区分。 变形杆菌 ?初步:菌落迁徙生长, 吲哚实验:阴性-奇异变形杆菌 阳性-普通变形杆菌 ?确定:氨苄西林敏感,不需其它实验确定为奇异变形杆 菌。 ?注意:对氨苄青霉素耐药、吲哚阴性的变形杆菌要用麦 芽糖和鸟氨酸试验鉴定 菌种麦芽糖鸟氨酸 彭氏变形杆菌+ - 奇异变形杆菌-+ 流感嗜血杆菌 ?初步:革兰阴性小杆菌,在巧克力平板(不是血平 板)上于5%CO2中35培养24h,生长的菌落直径 大于1mm;羊血平板上有卫星现象 ?确认:快速卟啉试验阴性可鉴定为流感嗜血杆菌。 卡他莫拉菌 ?初步:革兰阴性双球菌,氧化酶阳性,巧 克力平板和羊血平板上均生长,BAP上菌 落可移动 ?确认:快速丁酸酯酶试验阳性可鉴定卡他 莫拉菌。 ?注意:其它莫拉菌多数丁酸酯酶阳性,但 为球杆状,而非双球菌。 金黄色葡萄球菌 ?初步:革兰阳性球菌,葡萄串状排列,在血平板 上呈白色、黄色、奶油状不透明菌落,触酶阳 性,玻片凝集(+) ?明确:4h快速试管凝集试验,乳胶凝集试验,或 快速耐热DNA酶试验(+)鉴定金黄色葡萄球菌。 ?注意: 1.若分离自无菌部位,应进行试管法血浆凝固酶试 验 ,采用无菌EDTA兔血浆 2.施氏和路登葡萄球菌可以玻片凝集+(90%: 87.3% 1021 clinical isolates, 967(95%) concordance with Phoenix
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