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BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BD Accuri C6 PI染色染色染色染色DNA检检检检测细胞周期测细胞周期测细胞周期测细胞周期 所需所需所需所需试剂试剂试剂试剂 1. BD PI/RNase Staining Buffer 货号:550825 2. 70%冷乙醇 样本制备样本制备样本制备样本制备 操作步骤:以下步骤可以直接在流式管中操作 1.收集细胞,加入PBS,500g离心5分钟 洗涤细胞,弃上清。 2. Drop by Drop加入70%冷乙醇(尽量多),固定18h以上,固定在试管中即可。 3. 以500g离心5分钟,小心弃取上清,试管小心倒扣在滤纸上,吸尽酒精,弹起细胞。 4. 加入0.5ml PI/RNase 染色液(货号:550825),充分混匀细胞后,37oC 孵育 15分钟。 5. 分析前4 oC避光保存样本。1小时之内上流式细胞仪检测。 注意:PI染色的样本在上机检测之前和之后都需要彻底清洗机器,以保证机器管路的干净。 BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com 画实验模板画实验模板画实验模板画实验模板 第一幅图选择散点图,X轴和Y轴参数分别设为FSC-A、SSC-A,圈定目的细胞群 第二幅图选择散点图,X轴和Y轴参数分别设为FL2-A、FL2-H,去除粘联体细胞 第三幅图选择直方图,X轴设为FL2-A,PI直方图,分析G0/G1期,S期,G2/M期细胞 BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号, No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03,05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com 收集样本数据收集样本数据收集样本数据收集样本数据 在CFlow Workspace左侧界面选择Run Settings设置储存细胞总数。选择收集P1门内的数据。 样本管上样,开始收集数据。当计算机成功地收取足够数据,会自动储存数据文件。点击下一个 空样本孔继续收集其他样本数据,完成检测。 结果例图:
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