BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BD Accuri C6 PI染色染色染色染色DNA检检检检测细胞周期测细胞周期测细胞周期测细胞周期 所需所需所需所需试剂试剂试剂试剂 1. BD PI/RNase Staining Buffer 货号：550825 2. 70%冷乙醇 样本制备样本制备样本制备样本制备 操作步骤：以下步骤可以直接在流式管中操作 1.收集细胞，加入PBS，500g离心5分钟 洗涤细胞，弃上清。 2. Drop by Drop加入70%冷乙醇(尽量多)，固定18h以上，固定在试管中即可。 3. 以500g离心5分钟，小心弃取上清，试管小心倒扣在滤纸上，吸尽酒精，弹起细胞。 4. 加入0.5ml PI/RNase 染色液(货号：550825)，充分混匀细胞后，37oC 孵育 15分钟。 5. 分析前4 oC避光保存样本。1小时之内上流式细胞仪检测。 注意：PI染色的样本在上机检测之前和之后都需要彻底清洗机器，以保证机器管路的干净。 BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com 画实验模板画实验模板画实验模板画实验模板 第一幅图选择散点图，X轴和Y轴参数分别设为FSC-A、SSC-A，圈定目的细胞群 第二幅图选择散点图，X轴和Y轴参数分别设为FL2-A、FL2-H，去除粘联体细胞 第三幅图选择直方图，X轴设为FL2-A，PI直方图，分析G0/G1期，S期，G2/M期细胞 BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com BDBDBDBD CHINA Unit 02B, 03, 05, 28/F, Tower 3, China Central Place 北京市朝阳区建国路77号， No.77 Jianguo Road, Chaoyang District, 华贸中心3号写字楼28层02B03，05室 Beijing, 100025 Tel: 86-10-5813 9000 Fax: 86-10-5813 9191 www.bd.com 收集样本数据收集样本数据收集样本数据收集样本数据 在CFlow Workspace左侧界面选择Run Settings设置储存细胞总数。选择收集P1门内的数据。 样本管上样，开始收集数据。当计算机成功地收取足够数据，会自动储存数据文件。点击下一个 空样本孔继续收集其他样本数据，完成检测。 结果例图：