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临床检验标本采集指南及注意事项临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。为做到临床检验质量保证,中华人民共和国卫生部卫生技术标准化委员会已将临床检验标本采集和处理的有关问题,列为国家和行业的标准化文件,以达到对临床检验工作的规范化要求。如中华人民共和国卫生行业标准ws/T225-220.WS/T229-202.WS/T223-2002.WS/T222-2002.WS/T230-2002和中华人民共和国国家标准GB 19489-2004等,分别对临床化学检验标本、便携式血糖仪血标本、凝血因子测定标本、尿液标本、乙型肝炎表面抗原酶免疫检测标本、临床酶活性浓度测定标本、临床诊断中聚合酶链反应标本和实验室生物安全等标本均提出了标准化的要求。实践证明,为保证临床检验质量,必须做到全过程质量控制,即对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括:实验前(分析前)、实验中(分析中)和实验后(分析后)三个阶段的质量控制,其中实验前质量控制尤其重要。国内外均有报道,试验误差中6070%来自实验前(分析前),而且实验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。因此,必须注意做好实验前质量管理。实验前质量控制主要包括:(1)病人准备 (2)标本采集 (3)标本运送 (4)标本处理等一、病人准备标本采集前病人的状态对检测结果会有一定的影响,因此,各种不同检测项目对标本采集前病人的状态有不同的要求。如血脂测定须病人禁食1214h后采血(否则出现脂血);情绪紧张会使血糖升高;吗啡、可待因可使淀粉酶(AMS)升高;吃香蕉能使尿液5-羟吲哚乙酸升高等。所以,在病人要做某些化验检查之前,必须嘱咐病人做好相应的准备。二、标本采集1、血液标本1.1防止干扰物污染(特别是定量分析标本)1.2采血方法要正确。1.3信息无误:标本采集后,必须在试管或容器上贴上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。 1.4叮嘱病人采血前4小时勿喝茶或咖啡、勿吸烟饮酒。尽量了解病人对刺激物和成瘾药物的接触史,供评价检验结果时参考。 1.5采血时间在上午79时进行,采血前病人应禁食12小时。采血尽量安排在其他检查和治疗前进行。 1.6应尽量统一采血姿势,输液病人在不能停输的情况下静脉采血一定要注意远端原则。也就是说输液病人要在对侧手静脉采血。当需要重复使用止血带时,应使用另一上臂。1.7血和混浊(收集标本用力震荡或用玻璃棒及竹签搅拌会导致溶血,餐后采血会出现脂血而混浊)。1.8抗凝剂及防腐剂要准确使用。 1.9温度最好不超过20。 2 . 尿液标本2.1尿标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大,特别是饮食的影响,故一般来说晨尿优于随机尿。2.2尿留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿、维生素c干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查。2.3 12小时尿细胞计数,即Addis(前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液),因时间较长,细菌易繁殖,须加入防腐剂甲醛。 2.4 24小时尿(第一天晨6时排空膀胱后留取至次日晨6时的所有尿液)中化学物质的定量,包括蛋白、糖、钙等,检测不同的物质,应选择不同的防腐剂防腐。 2.5清洁中段尿多用于尿细菌培养,要求无菌,冲洗外阴后留取标本。 2.6所有尿标本的收集都应足量,最少12ml,最好50ml,定时尿须全部收集,对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。3. 粪便标本粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处等多处取材。 4. 脑脊液标本脑脊液标本采集后应立即送检,放置过久将影响检验结果:(1)如细胞变性、破坏、或纤维蛋白凝集成块,导致细胞分布不均而使计数和分类不准确。(2)有些化学物质如葡萄糖等将分解使含量减少(3)细菌发生自溶,影响细菌(尤其是脑膜炎球菌)的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查。三管顺序不宜颠倒。 5. 胸腹水标本与脑脊液标本一样,采集后的标本注意安全,及时送检。一般也分装三管,第一管细菌培养,第二管生化检查,第三管作常规细胞学检查,顺序以与脑脊液相同为宜。生化检测管应用肝素钠抗凝,否则纤维蛋白析出造成总蛋白结果偏低且有可能引起生化仪加样针的堵塞。6. 微生物标本 6.1标本的采集时间:最好为清晨的第一口痰;支气管扩张患者,清晨起床后进行体位引流,可采集大量痰标本。6.2标本采集方法:6.2.1在留取痰标本之前,用清水、冷开水反复漱口或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下,以减少常居菌的污染,并尽可能在使用抗生素之前采集标本。用力从气管深部咳出痰,直接吐入无菌痰杯中,标本量应1m1。6.2.2支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法和支气管肺泡灌洗法,均由临床医生操作采集。 6.2.3小儿取痰法:由临床医生用弯压舌板或用手指叩胸骨柄诱发咳痰法采集。 6.3咽拭子标本的采集: 标本采集应在用药前,最好在清晨,嘱患者用清水漱口,由检查者将舌向外拉,使悬雍垂向外牵引,将咽拭子超过舌根到达咽后壁或悬雍垂的后侧,在咽部肉眼见明显发红或有假膜处局部反复涂抹棉拭,放入无菌拭管内立即送检。 6.4尿液标本的采集: 常用中段尿采集法:女性病人以1:1000高锰酸钾冲洗外阴及尿道口后留取标本;男性病人应清洗阴茎头后留取标本。标本多取晨尿,因为晨尿在膀胱潴留时间较长(一般都超过4h),细菌在尿中繁殖得较多,可提高阳性率,故一般取中段晨尿23ml于无菌容器后立即(半小时以内)送检,不能立即送检者,应放在4冰箱中保存。(注:送细菌培养的尿标本在膀胱内潴留超过4小时以上临床意义才大)6.5脓、创伤感染标本的采集:首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。对已破溃的脓肿先用无菌棉拭子把表面的脓粘干净后丢弃,再用无菌的棉拭子取底部的脓液和分泌物(不要采集浅部的脓液);未破溃的脓肿消毒皮肤后,用无菌注射器抽取脓液及分泌物立即送检。如深部脓肿在送需氧培养的同时应考虑送厌氧培养,厌氧培养标本应隔绝空气立即送检。 6.6穿刺液标本的采集: 应在患者用药之前或停药l2d后进行穿刺,标本应立即送检或保存于4冰箱。脑脊液标本应保温,(2537C),并立即送检(用手心握住送检)。 6.7大便标本采集: 6.7.1自然排便采集法:用无菌棉签挑取新鲜有脓血粘液部份的粪便23克置于无菌容器中立即送检。 6.7.2直肠拭子采集法:直肠拭子培养多见于新生儿或直肠癌患者术后。可以用于新生儿在肠道菌群建立之前的菌群监测和直肠癌术后直肠内直肠的需氧或兼性厌氧菌的监测。将无菌肛拭子用甘油湿润后插入肛门45cm(幼儿23cm)处,轻轻在直肠内旋转,置于无菌容器内立即送检。有腹泻的病人,在送培养标本的同时可以送细菌涂片检查。抗生素相关性腹泻性腹泻,培养是阴性,但涂片检查却可以看到细菌比例失调,涂片临床意义大于培养。 7,病理标本 7.1按要求填写病理诊断申请单,病人病史须详细完整。7.2采集时请勿挤压、损伤组织。 7.3活检组织按要求采集,组织勿太少。 7.4标本应立即放入固定液(10福尔马林缓冲液),固定液为标本体积的45倍。 7.5盛装标本瓶的瓶口宜大些,勿乱切标本。 7.6结核标本需固定710天才能切开。 7.7盛放标本瓶外面一定要写上或贴上病人姓名、科室或检验单的条形码号。 7.8如同一病人有两种或数种不同的组织送检,或在同一器官的不同部位取材标本必须要用分开的容器盛放。 7.9不同病人的标本绝不能放于同一容器内。 7.10外地邮寄标本要妥善包装,以免途中损坏。 7.1l各种液体穿吸液的细胞检查标本应立即送检,不能立即送检者应离心,涂片24张,再按规定要求固定后送检。8 . PCR标本要求 8.1血清用无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升,注入PCR专用的一次性试管(不得与其他生化标本混用),于室温离心,吸取上清即为血标本。所需标本类型为未溶血的血清或血浆,用无菌真空试管(由检验中心统一提供)采集,注意血浆标本所用的抗凝剂,不可使用肝素。标本为全血时及时分离出血浆保存。 8.2分泌物 男性:取尿道分泌物用细小棉拭子伸入尿道约24厘米,略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管,用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。 女性:阴道用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物,再用无菌棉拭子插入宫颈内,停5秒钟后旋动棉拭子采取宫颈分泌物,将棉拭子置入无菌玻璃管,用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。 女性:尿道用无菌生理盐水棉球洗净尿道口,再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米,略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将棉拭子置入无菌玻璃管,用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。三、标本运送注意事项1、标本采集后连同检验申请单一起由专职护工或护士送住院部检验科进行及时处理,并在合适的环境中存放,一般血液标本应首先分离血清或血浆,否则由于血细胞代谢,气体交换及物质转移使血细胞内外多种成份发生变化,导致分析结果出现误差如血钾增高,血糖降低等。2、标本送到检验科后,检验科将由专人负责标本的收集,核对和编号处理。标本上的姓名一定要与检验申请单上病人姓名相符,若不相符,要求重新采集标本或拒收此标本。检验科到临床各科收标本时间规定为每天上午8:309:OO收集血液标本(生化、血沉、血凝、血常规),9:OO9:30收集大小便标本,错过收集时间请临床各科安排护士或护工将标本送到检验科进行检验。3、标本的保存,血液、大小便标本采集后必须在1小时内送到检验科进行检验,尿蛋白定量标本需加甲苯或二甲苯35m1防腐,尿艾迪氏计数标本需加甲醛35ml防腐,特殊项目当天不能检测标本必须将血清分离后放28冰箱保存。一般标本检验后保存3天,合血或特殊项目标本需保存7天。四、标本运送要求 l标本由临床运送至实验室要尽可能快,必要时可分离出血清(浆)后运送。2标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染(标本管要盖盖子)。3有特殊要求的标本要按特殊要求运送(如血气分析标本应严格密封,与外界空气隔绝;测定VA、VB6、B一胡萝h素、胆红素等标本,应注意避免暴露于光线下,用黑纸或铝箔保护标本)。4关于自动化运送(物流)系统(真空采血管;运送车;气运;人工运送等物流系统),应注意保证对实验结果无影响(保证红细胞膜完整性)。红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有:LDH、K、Hb、ACP;有值得注意的影响的项目主要有:Fe、ALT、T4;有轻微影响或不太受影响的项目主要有:TP、ALB、ALP、AST、TBiL、WBC、Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。 5标本送出及签收临床人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接受临床标本,均应按标准化要求进行,并且一定要做到认真核对。包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接受人员都要做认真的记录并签字。患者准备对检测结果的影响1患者的状态:原则上患者应在平静、休息状态下采集样本,特别是血液样本。患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。运动后,由于能量消耗、体液丢失、剧烈呼吸,可造成许多
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