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蛋白芯片联合检测多种抗结核 抗体在结核病诊断中的应用价值,论文分析,结核病 最具威胁性的感染性疾病之一 全球 每年新发900万例 每年死亡数约为300万 我国 每年新发145万例 每年死亡数约为25万,实验背景,实验方法 实验原理抗原抗体反应,蛋白芯片:7种结核特异性抗原,样品:静脉血(分离血清) 胸水、腹水、关节液(高速离心驱除纤维蛋白原等干扰成分),选定蛋白细胞定位设计引物 构建载体、克隆纯化蛋白,胶体金:特定大小的金颗粒,由于静电作用呈稳定胶体状态。 胶体金葡萄球菌A蛋白探针标记后:黑褐色颗粒(LM下) 大量聚集粉红色斑点(肉眼) 加入银显影液放大结果,实验方法 免疫金银染色法,特异性吸附抗体或抗原,胶体金葡萄球菌A蛋白探针,实验方法 实验流程,实验结论,Ag85A和6kD蛋白阳性,38kD和TB10.4蛋白阳性,结果判断原则:7种抗原中任何2种或2中以上抗原阳性则判定为阳性 仅1种抗原阳性判定为可疑 7中抗原均为阴性判定为阴性,实验结论,本实验基于结核分枝杆菌抗原的检测蛋白芯片具有较高的灵敏度和特异度,在临床诊断上具有明显的应用价值。可以用于结核病的临床辅助诊断,有效提高临床检测的阳性率,原因: 1.选用了7种结核分枝杆菌抗原,提高检出率 2.采用免疫金银染色,具有很强的信号放大效应,谢谢 O(_)O,
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