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资料常用pH缓冲溶液的配制和pH值 常用pH缓冲溶液的配制和pH值常用pH缓冲溶液的配制和pH值http:/www.biodrug.cn序号 溶液名称 配制方法 pH值1 氯化钾-盐酸 13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均匀后,加水稀释至100 ml 1.72 氨基乙酸-盐酸 在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml浓盐酸,再加水稀释至1L 2.3 3 一氯乙酸-氢氧化钠 在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后,加40 g NaOH,溶解完全后再加水稀释至1 L 2.8 4 邻苯二甲酸氢钾-盐酸 把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均匀,加水稀释至100 ml 3.6 5 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠 把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml 4.8 6 六亚甲基四胺-盐酸 在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g,加浓HCl 10 ml,再加水稀释至1 L 5.4 7 磷酸二氢钾-氢氧化钠 把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml 6.8 8 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至100 ml 8.0 9 氯化铵-氨水 把0.1 mol/L 氯化铵与0.1 mol/L 氨水以2:1比例混合均匀 9.1 10 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml 10.0 11 氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠 把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化钠与51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀 11.6 12 磷酸氢二钠-氢氧化钠 把 50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4与26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至100 ml 12.0 13 氯化钾-氢氧化钠 把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl与66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml 13.0一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,GR)、分析试剂(Antalytical reagent,AR)化学纯(Chemical pure,CP)和实验试剂(Laboratory reagent,LR)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2药品称量要精确。3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.57.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液11/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,AR)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。21/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO42H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。3按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。附表1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0UID18帖子722精华16积分8阅读权限10来自宜昌在线时间49 小时注册时间2006-3-2最后登录2010-9-11查看个人网站查看详细资料 (三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO42H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO412H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO42H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。(四)0.2Mol/L PB缓冲液附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法pH0.2 Mol/L Na2HPO4(ml)0.2Mol/L NaH2PO4(ml)5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO42 H2O溶液35.61g/LNa2HPO412 H2O溶液含71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4H2O溶液含27.60g/LNaH2PO42 H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时,则在溶液中加0.85的NaCl溶液即可。(五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)(0.15Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g(如为Na2HPO412H2O,则为2.89g)KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中,完全溶解后,115高压灭菌10min15min,存在4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。UID18帖子722精华16积分8阅读权限10来自宜昌在线时间49 小时注册时间2006-3-2最后登录2010-9-11查看个人网站查看详细资料(六)硼酸盐缓冲液(Borate saline buffer)1硼酸(3BO3)0.2Mol/L硼酸:硼酸12.37g加水至1 000ml。2硼砂(Na2B4O7)0.05Mol/L硼砂:硼砂19.07g加水至1 000ml。附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0(七)巴比妥缓冲液1pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥钠 47.6g蒸馏水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml(1.17 N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水) 将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。 加1.17 N HCl 55ml。 用HCl调节pH到8.2,并加蒸馏水至4 265ml。2pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g巴比妥钠 10.30g加蒸馏水至 1 000.00ml3pH8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.66g巴比妥钠 12.76g加蒸馏水 1 000.00ml(八)0.2Mol/L醋酸盐缓冲液 见表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)233723379.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5(九)三羟甲基甲烷盐酸缓冲液(TrisHCl缓冲液)不同pH,0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加ml0.1NHCl,加水稀释至100ml(见下表)附表6 TrisHCl缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl
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