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资源描述
血液学一般检查,【目的】 掌握显微镜红细胞(red blood cell count, RBC)计数的原理及操作方法。 【原理】 用等渗稀释液将血液以一定倍数(200倍)稀释并充入计数池,在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数量。,【器材】 试管、试管架。 2 ml吸管、吸耳球。 微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。 玻璃棒。 改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布。 显微镜。,Micropipettes,Markers: 10ul 20ul Warning line,【试剂】 红细胞稀释液:枸椽酸钠1.0 g ,36%甲醛液1.0ml,氯化钠0. 6 g,加蒸馏水至100 ml,混匀,过滤两次后备用。 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,【操作】 1加稀释液 红细胞稀释液2 ml 于小试管。 2采血及加血 颠倒混匀样本,用微量吸管吸取全血10l,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中红细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层红细胞稀释液清洗吸管23次。 3充池 充入计数池,放置23 min 。 4计数 将光圈调到最小,光线调暗,用低倍镜找到计数区和格子线,用高倍镜计数中央大方格内4角和正中,共5个中方格内的红细胞数。 5计算,红,红,红,红,红,红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6 =(N/100)*1012 【参考值】 成年人:男性(4.095.74)1012/L,女 性 (3.685.13) 1012/L。 新生儿:(5.26.4) 1012/L。 婴儿:(4.04.3) 1012/L。 儿童:(4.04.5) 1012/L。,五个中方格计数和求均值乘以中方格数量乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,1器材 2试剂 3标本 4稀释液及稀释倍数 5采血 6充池 7计数,白细胞计数,【目的】 掌握显微镜法白细胞计数(white blood cell count)的方法。 【原理】 采用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,【器材】 同红细胞计数,0.5ml吸管 【试剂】 白细胞稀释液:2冰乙酸溶液 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,【操作】,1加稀释液 吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。 2采血及加血 颠倒混匀样本,用微量吸管吸取全血20l,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管23次。 3混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色。 4充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬液1滴,注入计数板的计数池中,室温下静置23min,待白细胞完全下沉后再做白细胞计数。 5计数 将光圈调到最小,光线调暗,用低倍镜找到计数区和格子线,用低倍镜(或高倍镜)下计数四角4个大方格内的白细胞总数。,6计算 白细胞数/L=(N/4)*20*10*10E6=(N/20)*109 【参考值】 成人:(410)109/L 儿童:(1520)109/L;6个月2岁:(1112)109/L。 新生儿:(1520)109/L,四个大方格计数和求均值后乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,类似于红细胞计数。 应注意白细胞较红细胞少,因此充池更加注重均匀。 稀释倍数,因细胞多少而异。,试验结束后,将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到大垃圾桶 将玻璃试管用水冲洗干净倒插入试管架中 将牛鲍计数板冲洗干净放入盒中 将显微镜按照背后的号码还原至盒中 关闭电灯,拔下插线板,
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