第 八 章 动物实验质量监控 第一节 动物实验设计 第二节 实验动物选择 第三节 动物实验结果的评价 及其意义重 点 掌 握 内 容1、实验动物选择的原那么。2、成年实验动物的体重标准，慢性实验选择未成年实验动物的体重。3、实验动物选择的根本意见。4、GLP、SOP的概念。5、SOP包括的13方面内容。第一节第一节 动物实验设计动物实验设计一、动物实验设计应具备的条件一、动物实验设计应具备的条件 1、相关学科的专业知识。 2、实验对象：实验动物的选择。 3、处理因素：实验因素、 统计学分析、 环境因素的控制。 4、实验效应：预期结果。 例如： 研究某个终止早孕药物的作用，实验对象应选择早孕大鼠，处理因素是指该终止妊娠药物的使用、统计学处理及实验条件的质量控制，而实验效应那么为早孕终止及相关的科学分析。二、动物实验设计应遵循的伦理原那么 “3R原那么1、替代replacement原那么 用低等或非实验动物代替高等实验动物；2、减少reduction原那么 尽可能减少实验动物的用量；3、优化refinement原那么 应优化实验设计和操作，减少实验动物痛苦。三、动物实验设计的根本类型 自学一完全随机化设计，二随机区组设计，三配对设计四、动物实验的样本含量自学 22(tt)2 n 2 式中为标准差；t取显著性=0.05时的t分布值，0.05 =1.96；t为无显著性的t分布值，1-为实验检验才能，动物实验一般取1-0.80，0.20=0.842；指处理组与对照组均值之间的差异, 值可从预实验或文献资料中获得。由以上参数可计算正式实验所需样品含量。 第二节第二节 实验动物选择实验动物选择一、实验动物选择的原那么：一、实验动物选择的原那么：一相似性原那么：一相似性原那么：1 1、构造、功能、代谢与人相似。、构造、功能、代谢与人相似。2 2、年龄近似。表、年龄近似。表8-18-1、表、表8-28-2、图、图8-18-13 3、群体分布相似性。、群体分布相似性。4 4、生态或安康状况的近似性：普通级、生态或安康状况的近似性：普通级、SPF SPF 级、无菌级。级、无菌级。5 5、疾病特点的相似性。、疾病特点的相似性。6 6、操作实感的相似性。、操作实感的相似性。图图8-1 8-1 人和各种实验动物的年龄对应人和各种实验动物的年龄对应二差异性原那么：黑、灰兔对阿托品不敏感；马对百、白、破菌不敏感。三易化原那么：选择可以满足实验要求的最简单动物如：果蝇寿命12天，染色体4对。四相容或相匹配原那么：动物与设备。五可获性原那么：能得到，经济、 易饲养。六重现性、均一性原那么： 近交系、杂交群。二、实验动物选择的某些详细问题一年龄、体重：幼年、成年。成年实验动物体重小鼠18-22g、大鼠180-220g 、豚鼠350-650g 、兔2-3kg 、猫1.5-2.5kg 、犬6-15kg。未成年实验动物体重小鼠15-18g、大鼠80-100g 、豚鼠150-200g 、兔1.5-1.8kg 、猫1.0-1.5kg 、犬6-8kg成年。二性别：一般宜选用雌雄各半。三生理状态与安康情况： 安康，无怀孕、哺乳等。四品系、等级： 白化、SPF级动物运输途中被污染等。五实验动物选择的根本意见五实验动物选择的根本意见1呕吐选犬、猫，不选草食 性动物和大鼠。2过敏、变态反响豚鼠。3机体发热家兔。4药物致癌大鼠、小鼠。5气体、蒸汽对黏膜刺激 猫， 吸入粉尘对机体的影响 大鼠。6药物对皮肤部分刺激 兔、豚鼠猪。7毒性物质对脏器损害 小鼠。8药物迟发性神经毒作用 来航鸡。9药物的细胞遗传效应 小鼠、大鼠。10血压变化犬、大鼠。 动脉粥样硬化兔、大鼠。11放射病犬、猴、大鼠、小鼠。12免疫毒理C57BL/6小鼠。13研究新药毒理2种以上不同种属实验动物。 第三节 动物实验结果的评价及其意义 目前对新药的要求 “平安、可控、有效。 动物毒性实验会出现4种结果： *、真阴性没有毒性正常结果。 *、真阳性有毒性正常结果。 *、假阴性药物毒性不被觉察，用到人身上后直接危及人类的安康与生命。 *、假阳性使一个很有前途的新药被淘汰。一药害事件：1、19351937年： 美国用二硝基酚减肥，引起白内障及骨髓抑制，死亡177人。2、19371959年：美国用黄体酮保胎和治疗前兆流产，600女婴生殖器男性化。 3、19541956年：美国用二甘醇磺胺酏剂致107人死亡。4、19541956年：法国的有机锡胶囊引起207人视力障碍和102人死亡。5、19661972年，日本的氯碘喹啉造成上千人失明或下肢瘫痪。6、19591962年，西德的沙利度胺反响停引起万余名婴儿畸形。 被反响停夺去胳膊的孩子们 美国食品和药品管理局FDA于1976年仿效医药品优良消费标准GMP，发布了药品非临床平安性研究标准GLP。随后，世界许多国家也制定和执行GLP，新药临床前研究逐步标准。GLP good laboratory practice： 药品非临床研究质量管理标准。 广义GLP 实验室研究在方案、执行、监视、记录和报告方面的组织过程和条件。SOPstandard operating procedure,标准操作规程对每项工作都制定操作步骤，确保实验结果的可靠性和可重复性，促使GLP的施行。SOPSOP包含包含1313方面的内容与动物有关的占方面的内容与动物有关的占5 5条：条：1 1供试品和对照品的承受、贴标签、供试品和对照品的承受、贴标签、储存、处理、配制方法以及取样等；储存、处理、配制方法以及取样等；2 2动物实验室准备和动物饲养管理；动物实验室准备和动物饲养管理；3 3设施和设备的维护、修理；设施和设备的维护、修理；4 4动物的转移、饲养、安置、动物的转移、饲养、安置、 标记、编号等；标记、编号等；5 5动物的一般状况观察；动物的一般状况观察；6 6各种检查、测试等操作；各种检查、测试等操作； 7濒死或者己死动物的检查处理； 8动物的尸检以及组织病理学检查； 9实验标本的搜集和编号； 10数据处理、储存和检索； 11研究单位、平安性研究机构，质量保证部门和专题负责人的职责； 12工作人员的安康检查制度； 13平安性研究机构认为需要制定标准操作规程的其他工作。二新药研究执行的6个“P：GAPgood agriculture practice， 中药材消费质量管理标准。 GMPgood manufacture practice， 药品消费质量管理标准。GLPgood laboratory practice， 药品非临床研究质量管理标准。GCPgood clinic practice， 药品临床试验质量管理标准。GSPgood supply practice， 药品经营质量管理标准。GUPgood using practice， 医疗机构药剂质量管理标准。三我国在新药研究中的战略1、“九五期间，原国家科委制定了“九五医药技术创新科技专项行动1035工程：在2000年建成5个GAP中心、5个GLP中心、5个GCP中心。2、新成立的国家药品监视管理局正在推行GMP认证和GSP认证。3、原国家科委与国家中医药管理局共同推行了国家“九五攻关课题中药现代化开展战略研究。 提出在“九五期间开发出一批符合国际市场需求的现代中药，争取有23个品种进入国际医药市场；到2021年，将我国中药在国际草药市场的占有率由目前的5%进步到15%。 目前国际草药市场的草药销售额为400亿美元/年，占5%为20亿美元，占15%为60亿美元。 原国家科委还专门组建了2个中药GLP中心设在广州中医药大学和中国中医研究院。重 点 掌 握 内 容1、实验动物选择的原那么。2、成年实验动物的体重标准，慢性实验选择未成年实验动物的体重。3、实验动物选择的根本意见。4、GLP、SOP等概念。5、SOP包括的13方面内容。