Word文档链球菌的检验 食品伙伴网注：本方法源自奶牛乳房炎防治技术指南(试行)（农医发20l029号） 引起临床型乳房炎或者亚临床型乳房炎的链球菌常见的有无乳链球菌、停乳链球菌以及乳房链球菌。 1主要试剂和试验方法 CAMP试验：在血琼脂平板上用金黄色葡萄球菌培育物划一条直线，然后将链球菌培育物划一条线，与金黄色葡萄球菌培育物的划线相互垂直，但不要接触，二者相距3-5mm，各链球菌分别菌划线间距l020mm。置37温箱内培育24h后观看结果。在两划线交界处消失箭头样的溶血区为阳性。 2乳样的采集 选取消失临床症状（或者怀疑为亚临床型乳房炎）乳房炎奶牛，先用温水，再用0.2新洁尔灭擦洗乳房，最终用70的酒精擦拭乳头。采样者同时进行手指擦拭消毒。每个乳室先挤去头23把奶，以排解污染的杂菌，每头奶牛取乳样5mL于无菌乳样杯中，待检。 3病原菌的分别培育 初步诊断：将少量乳汁涂片、革兰氏染色、镜检。如发觉圆球形革兰氏阳性细菌可怀疑为链球菌。 分别培育：将乳样摇匀，分别取适量接种于养分肉汤（10血清）、鲜血琼脂、麦康凯琼脂培育基（平板）后，置于37温箱培育2448h。观看每个平板中细菌生长的状况，记录菌落生长表现。 一般琼脂平板上，37，2472h培育后，未见到菌落。 鲜血琼脂平板上长有灰白色、半透亮表面光滑圆形隆起的小菌落，消失溶血现象，假如是溶血则疑为无乳链球菌，假如为溶血，疑为停乳链球菌或者乳房链球菌，如为溶血，则疑为乳房链球菌。 血清肉汤中生长初呈匀称浑浊，管底消失絮状沉淀，上清变得透亮。 挑取典型菌落涂片、染色、镜检，镜检如呈球状，短链状或者长链状排列，无芽胞、荚膜，革兰氏染色阳性则疑为链球菌。 4生化鉴定 镜检形态符合链球菌特性，且触酶试验阴性细菌，即鉴定为链球菌属细菌。若细菌CAMP试验阳性，不水解七叶苷和马尿酸钠，即鉴定为无乳链球菌；若细菌CAMP试验阴性，不水解七叶苷和马尿酸钠，即鉴定为停乳链球菌；若细菌CAMP试验阴性，水解七叶苷和马尿酸钠，即鉴定为乳房链球菌。 5动物试验 对试验动物，只有停乳链球菌具有致病性，将其18h血清肉汤培育物0.5mL注入小白鼠腹腔，或给家兔静脉接种l2mL，可使动物在1周内死亡。对接种后发病、死亡小鼠（家兔）的肝脏进行病原菌重分别。进行菌落涂片、革兰氏染色、显微镜检查，观看所分别菌株是否为原接种菌。假如是则进一步确定病原菌为停乳链球菌。其他两种链球菌并不能使试验动物致死。 3