本科毕业实习报告 本科毕业实习报告瑞舒伐他汀钙UV溶出度检查方法学研究专业名称 应用化学专业 实习单位 北京天衡药物研究院 瑞舒伐他汀钙UV溶出度检查方法学研究摘 要：瑞舒伐他汀钙是一种新型全合成单一对映异构体他汀类药物，化学品溶出度是指在规定的溶剂和条件下，药物从片剂、胶囊剂、颗粒剂等固体制剂中溶出的速度和程度。本报告以(+) (3R, 5S)-双7-4-(4-氟苯基)-6-异苯基-2-(N-甲基-N-甲磺酰基氨基) 嘧啶-5-基-3, 5-二羟基-6-(E)-庚烯酸钙为原料药，对其进行UV溶出度检查方法学研究试验。通过本试验，确定了瑞舒伐他汀钙的溶出试验条件和紫外检测条件，符合瑞舒伐他汀钙国家药监局药品注册标准。关键词：瑞舒伐他汀钙 溶出度 方法学 UVMethodology Study on Dissolution Test and UV Detection of Rosuvastatin CalciumStudent: Ni YiTutor: Hu RuishengAbstract: Rosuvastatin Calcium is a novel drug of HMG-CoA reductase inhibitors, and Dissolution rate is the rate and extent of drugs dissolve from solid formulations of tablets, capsules, granules etc. in specified conditions. In this report, (+)-(3R,5S)bis(E)-7-4-(4-fluorophenyl)-6-isopropyl-2-methyl(methylsulfonyl)aminopyrimidin-5-yl(3,5-dihydroxyhept-6-enoicacid)calcium, as the raw material, was researched. Through this experiment, the condition of dissolution test and UV detection of Rosuvastatin Calcium were identified, which conform the SFDA drug registration standards.Key Words: Rosuvastatin Calcium, Dissolution rate, Methodology, UV目录第一章 绪论11.1瑞舒伐他汀钙药物简介11.1.1他汀类药物简介11.1.2瑞舒伐他汀钙简介11.1.3瑞舒伐他汀钙药理作用21.2 化学药品UV溶出度检查试验21.2.1紫外-可见分光光度计法(UV)21.2.2化学药品溶出度方法研究4第二章 瑞舒伐他汀钙UV溶出度检查试验62.1试验样品、试剂和仪器62.1.1主要试验样品62.1.2主要试验试剂62.1.3主要试验仪器62.2 UV溶出度检查研究试验72.2.1样品检测波长的确定72.2.2空白辅料对原料药吸收波长的影响82.2.3工作曲线的绘制82.2.4仪器精密度的确定92.2.5回收率试验92.2.6原料稳定性试验112.2.5两批样品（素片和包衣片）溶出度检查122.3溶出度检查方法比较试验（包衣片）152.3.1方法及转速比较152.3.2溶出介质比较16第三章 结论18致谢19参考文献20 内蒙古大学本科毕业实习报告 第 20页第一章 绪论1.1 瑞舒伐他汀钙药物简介1.1.1 他汀类药物简介他汀类药物是20世纪80年代后期开发的羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂。该类药物的问世是降脂药治疗史上的重大进展，其除具有调脂作用强、耐受性好等优点外，在冠心病的一级和二级预防中也发挥着重要作用，即可降低心血管事件发生率和心血管疾病死亡率。目前，已经上市的他汀类药物包括：洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、阿托伐他汀、瑞舒伐他汀钙等。其中瑞舒伐他汀钙的疗效和安全性最好，匹伐他汀是潜在的“超级他汀”。1 1.1.2 瑞舒伐他汀钙简介瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin Calcium) 化学名：(+) (3R, 5S)-双7-4-(4-氟苯基)-6-异苯基-2-(N-甲基-N-甲磺酰基氨基) 嘧啶-5-基-3, 5-二羟基-6-(E)-庚烯酸钙，分子式：(C22H27FN3O6S)2Ca，分子量：1001.15。是日本盐野义制药公司研发的一种新型全合成单一对映异构体他汀类药物。其结构式如图1.1。瑞舒伐他汀钙片于2002年11月在荷兰批准上市，2003年在美国正式获准上市，其商品名为Crestor。瑞舒伐他汀钙适用于经饮食控制和其它非药物治疗（如：运动治疗、减轻体重）仍不能适当控制血脂异常的原发性高胆固醇血症（IIa型，包括杂合子家族性高胆固醇血症）或混合型血脂异常症（IIb型）。本品对光灵敏，需遮光，密封，在阴凉（不超过20干燥处保存。2 瑞舒伐他汀钙具有强力的HMG-CoA还原酶抑制活性，并具有肝细胞作用选择性，且其药动力学性质优异，半衰期长，安全性好，符合理想的他汀类药物的必备条件。经过大量临床试验确认，其降低LDL-C，升高HDL-C的作用优良。瑞舒伐他汀钙临床耐受性好，无肝毒性和肌毒性。只需1日1次用药，早、晚服用均可，患者顺应性好。3-5图1.1 瑞舒伐他汀钙结构式1.1.3 瑞舒伐他汀钙药理作用瑞舒伐他汀钙与HMG-CoA还原酶有相似结构，能竞争性抑制HMG-CoA还原酶（该酶是胆固醇生物合成中的限制酶），导致干细胞内胆固醇含量降低，因而刺激肝细胞表面LDL受体表达增加，促进LDL和LDL前体从循环中清除。瑞舒伐他汀钙还可以抑制肝脏合成载脂蛋白-100和减少富含甘油三酯脂蛋白的合成与分泌。6 瑞舒伐他汀钙有典型的他汀钙药效集团，通过独有的甲基磺胺基(methyl sulfonamide) 与HMG-CoA还原酶结合，甲基磺胺基使瑞舒伐他汀相对亲水。不同于其他他汀类药物相对亲脂，制剂在脂质中溶解增加，不加鉴别地进入所有细胞，瑞舒伐他汀钙对肝细胞有高度选择性，通过特异转运蛋白进入肝细胞，明显抑制肝细胞胆固醇合成，但不抑制肝以外细胞的胆固醇合成。71.2 化学药品UV溶出度检查试验1.2.1 紫外-可见分光光度计法(UV)紫外-可见分光光度计法指通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度，进行定量或定性分析的方法。200400nm为紫外光区，400760nm为可见光区。一、原理单色（单波长）光穿过被测物质溶液时，在一定浓度范围内，吸光度与溶液的浓度和吸收池厚度成正比。即 A=Ecl （比尔定律）其中A为吸光度；c为浓度(g/100ml)；E为吸收系数，指当溶液浓度为1%(g/ml)、液层厚度为1cm时的吸光度；l为吸收池厚度，cm。通常使用1cm吸收池（当浓度太小时可使用2或5cm吸收池），用对照品比较法测定。E、l为常数，则A1/A2=c1/c2，c1=A1c2/A2二、溶剂的选择在样品能溶解的前提下，选无毒且便宜的溶剂。首选水；其次常用0.1MHCl、Ph6.8磷酸盐缓冲液；水溶液不溶时选用有机溶剂如甲醇、乙醇等。三、波长的选择方法：原料按1030ug/ml配制溶液，测定吸光度，根据A值找出恰当浓度后，在200400nm范围内扫图，并用与之匹配浓度的辅料扫图。判断标准：在检测波长处，原料有最大吸收值，且空白辅料无明显吸收。四、工作曲线原理：在一定范围内，吸收值A与浓度c呈线性关系。方法：取原料药适量，精密称定，配制浓溶液，移取不同体积稀释成6个浓度（检测浓度为中心），测定吸收值，计算r。判断标准：r0.998（通常要求0.999）五、精密度取工作曲线项下浓溶液稀释成6份相同浓度的稀溶液，测定吸收值，A值的RSD2.0%。六、回收率目的：验证辅料对原料溶解是否有干扰。原理：回收率(%)=主药测得量/称样量*100%方法：取原料药适量，精密称定，加入处方量空白辅料，配制成相当于检测浓度80%、100%、120%的溶液（平行配制3份）测定吸收值。判断标准：回收率应为98.0%102.0%，RSD2.0%。七、稳定性取精密度项下溶液，于0、2、4、8小时分别测定吸收值，要求RSD2.0%。目的检查药品否变质。81.2.2 化学药品溶出度方法研究溶出度（Dissolution rate）也称溶出速率，是指在规定的溶剂和条件下，药物从片剂、胶囊剂、颗粒剂等固体制剂中溶出的速度和程度。测定固体制剂溶出度的过程称为溶出度试验（Dissolution test），它是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外试验方法。药物溶出度检查是评价制剂品质和工艺水平的一种有效手段，可以在一定程度上反映主药的晶型、粒度、处方组成、辅料品种和性质、生产工艺等的差异，也是评价制剂活性成分生物利用度和制剂均匀度 的一种有效标准，能有效区分同一种药物生物利用度的差异，因此是药品质量控制必检项目之一。对于溶出度，范围应为限度的20；如规定限度范围，则应为下限的-20至上限的+20。9用一句话总结：溶出试验的目的是建立制剂的生物利用度与体外溶出度试验的相关性。10溶出度研究试验主要包括 以下内容：（1）溶出介质的选择，（2） 溶出介质体积的选择，（3）溶出方法（转篮法与桨法）的选择，（4）转速的选择，（5）溶出度测定方法的验证，（6） 溶出度均一性试验（批内），（7）重现性试验（批间）等。1、溶出介质的选择：通常情况下，溶出介质首选水 ，其次是0.1mol/L盐酸、缓冲液（pH值38）、人工胃液或人工肠液；若介质中加适量有机溶剂如异丙醇、乙醇或加分散助溶剂如十二烷基硫酸钠（0.5%以下）等，应有文献依据，并尽量选用低浓度，必要时应做生物利用度考察。通过测定药物在不同介质中的溶出曲线（通常应测定至药物全部溶出）来选择适宜的溶出介质。2、溶出介质的体积选择：溶出介质的体积需使药物符合漏槽条件，一般一个剂量单位以溶剂900ml或1000ml为最普遍，规格较小时也可使用常用体积的1/23/4。为了满足某些特殊制剂的要求，中国药典自1995年版起增加了小杯法（即溶出度测定法第三法），小杯法常用体积为100250ml。一些申报资料中，部分品种特别是规格较小的品种，为满足在溶出量测定时药物浓度的需要，在测定溶出度时，将两粒或数粒片剂或胶囊投入1个溶出杯中，这种溶出度试验法是不可行的。因为此时的溶出度测定已是数粒片剂或胶囊的平均溶出度，并没有客观地反映出每粒片剂或胶囊的溶出情况。通常小剂量药物的药效或毒性一般都较高，采用以上方法是不能保证药品的有效性和安全性的，应提请研究者加以注意。3、转篮法与桨法的选择：一般情况下，片剂多选择桨法，转篮法多用于胶囊剂或漂浮的制剂，研