实验一 饲料中吸附水的测定（烘干法）一、原理试样在1052烘箱、一个大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为水分。二、适用范围本方法适用于测定配合饲料和单一饲料中水分的含量，但用作饲料的奶制品、动植物油脂及矿物质除外。三、仪器设备1. 实验室用样品粉碎机或研钵。2. 分样筛，孔径0.45mm（40目）。3. 分析天平，感量0.0001g。4. 电热式恒温干燥箱（烘箱），可控温度在1052。5. 铝盒（或称量瓶），直径40mm以上，高25mm以下。6. 干燥器，用变色硅胶或氯化钙作干燥剂。四、试样的选取与制备1. 选取有代表性的试样，其原始样量在1000g以上。2. 用四分法将原始样品缩至500g，风干后粉碎至40目，再用四分法缩至200g，装入密封容器，置阴凉干燥处保存。五、测定方法1. 空铝盒烘干至恒重（W0）洁净铝盒在1052烘箱中烘1h，取出，在干燥器中冷却30min，称重（准确至0.0001g）；再烘干30min，同样冷却、称重，直至两次称重之差小于0.0005g为恒重。2. 称样（W）用已恒重的铝盒称取两份平行试样，每份2g左右（含水重0.1g以上，样品厚度4mm以下），准确至0.0001g，平铺于铝盒中。3. 铝盒+样品烘干至恒重（W1）将称好试样的铝盒开盖置于1052烘箱中烘3h，取出，盖好铝盒盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。六、结果计算1. 计算公式2. 重复性每个试样至少取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。两个平行样测定值相差不超过0.2%为合格。七、注意事项1. 进行恒温计时应以达到设定温度开始，而不以接通电源算起。2. 某些含脂肪高的样品，烘干时间长反而会增重，为脂肪氧化所致，应以增重前称量值为准。3. 含糖分高、易分解或易焦化试样，应使用减压干燥法（70，600mm汞柱以下，烘干5h）测定水分。4. 多汁鲜样去除初水分后为风干物质，风干物质去除吸附水后为绝干物质。5. 计算时，取恒重中的小数值进行计算。下同。八、其他除本节述及水分测定方法外，尚有水分测定仪等仪器可对水分含量进行快速测定。实验二 饲料中粗灰分的测定（灼烧法）一、原理试样在550充分灼烧去除有机物后所得的残渣为粗灰分。残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，亦包括混入饲料中的砂石、泥土等，故称粗灰分。二、适用范围本方法适用于配合饲料及各种单一饲料中粗灰分的测定。三、仪器设备1. 实验室用样品粉碎机或研钵。2. 分样筛，孔径0.45mm（40目）。3. 分析天平，感量0.0001g。4. 高温电炉，可控温度在55020。5. 瓷坩埚，30mm。6. 干燥器，用变色硅胶或氯化钙作干燥剂。四、试样的选取与制备选取有代表性的试样，粉碎至40目，用四分法缩减至200g，于密封容器中保存防止成分变化和变质。五、测定步骤1. 空坩埚灼烧至恒重（W0）将干净坩埚放入高温电炉，在55020下灼烧30min，取出，在空气中冷却约1min，然后移入干燥器冷却30min，称重。再同样灼烧，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.0005g为恒重。2. 称样（W）在已恒重的空坩埚中称入2g左右试样，准确至0.0001g。3. 坩埚+试样灼烧至恒重（W1）将称好试样的坩埚放入高温电炉中，先在300下炭化20min左右，然后温度升至55020下灼烧3h，取出，在空气中冷却约1min，移入干燥器冷却30min，称重。再同样灼烧1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。六、结果计算1. 计算公式2. 重复性每个试样至少取两个平行样测定，以其算术平均值为结果。粗灰分含量5%时，允许相对偏差为1%；粗灰分含量5%时，允许相对偏差为5%。七、注意事项1. 试样第一次高温灼烧前应进行炭化，以使燃烧氧化完全，但炭化过程不应太快，以防试样飞溅。2. 灼烧残渣颜色与试样中各元素含量有关，如含铁高时为红棕色。但有明显黑色炭粒时，为炭化不完全，应延长灼烧时间。3. 为避免坩埚盖混淆，需在瓷坩埚上作标记，可用FeCl3溶液处理，方法为：取0.5%FeCl3溶液30ml，加数滴0.1mol/L AgNO3溶液（或钢笔水），混均，用细笔尖蘸此溶液在瓷坩埚上作标记，然后将其置于550高温电炉中灼烧后即可。实验三 饲料中粗脂肪的测定（浸提法）一、原理在索氏（Soxhlet）脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，其中除脂肪外，还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。二、适用范围本方法适用于各种配合饲料和单一饲料。三、仪器设备1. 实验室用样品粉碎机或研钵。2. 分样筛，孔径0.45mm（40目）。3. 分析天平，感量0.0001g。4. 电热式恒温水浴锅，室温100。5. 电热式恒温烘箱（烘箱），可控温度在1052。6. 铝盒（或称量瓶），直径40mm以上，高25mm以下。7. 干燥器，用变色硅胶或氯化钙作干燥剂。8. 定性滤纸，中速，12.5cm，脱脂。9. 索氏脂肪提取器，100或150ml。四、试剂乙醚（GB 12591-90），分析纯。五、试样的选取和制备选取有代表性的试样，用四分法将试样缩减至500g，粉碎至40目，再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存防止成分变化和变质。六、测定步骤1. 称样（W）称取2g左右试样，准确至0.0001g，用滤纸包好，并以脱脂棉线系牢，再用铅笔于滤纸包上标记待放入的铝盒号，然后将滤纸包放入相应铝盒中。2. 试样+滤纸包+铝盒烘干至恒重（W1）将以上铝盒开盖置于1052烘箱中烘6h，取出，盖好铝盒盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。3. 乙醚浸提将恒重的滤纸包放入索氏提取器的提脂腔中（注意滤纸包不能超过虹吸管上端），加入乙醚，乙醚加量以全部浸泡滤纸包为宜，装好装置，在6075的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约5070次（以检查提取腔流出的乙醚在滤纸上挥发后不留下油迹为浸提终点）。4. 浸提后，试样+滤纸包+铝盒再烘干至恒重（W2）取出滤纸包，放回相应铝盒中，在室温通风处使乙醚挥发掉，然后开盖置于1052烘箱中烘6h，取出，盖好铝盒盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。七、结果计算1. 计算公式2. 重复性每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量10%时，允许相对偏差为3%；粗脂肪含量10%时，允许相对偏差为5%。八、注意事项1. 浸提后的滤纸包不要立即放入1052烘箱中烘干，否则因乙醚着火点低而发生燃烧。2. 用过的乙醚不要丢弃，可通过回流回收重复使用。九、其他除本节所述饲料脂肪测定方法外，亦可借助脂肪测定仪进行脂肪含量的快速测定。实验四 饲料中粗蛋白质的测定（凯氏定氮蒸馏法）一、原理各种饲料的有机物质在还原性催化剂（如CuSO4或Se粉）及Na2SO4（防止暴沸）下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其它有机态氮都转变为NH4+，并与H2SO4化合成(NH4)2SO4；而非含氮物质，则以CO2、H2O、SO2状态逸出。消化液在浓碱作用下进行蒸馏，释放出氨气，氨气由硼酸溶液吸收并生成四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿为指示剂，用HCl标准溶液（0.1mol/L）滴定，求出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常以6.25计算），即为粗蛋白质的含量。主要化学反应如下：二、适用范围本方法适用于配合饲料和各种单一饲料。三、仪器设备1. 实验室用样品粉碎机或研钵。2. 分样筛，孔径0.45mm（40目）。3. 分析天平，感量0.0001g。4. 消煮炉或电炉。5. 消化管，100ml。6. 凯氏半微量水蒸气蒸馏装置（或常量直接蒸馏式）7. 容量瓶，100ml。8. 锥形瓶，150或250ml。9. 酸式滴定管，25或50ml。10. 移液管，5或10ml。四、试剂1. 浓硫酸（GB 625-89），化学纯。2. 硫酸铜（GB 665-78），化学纯。3. 硫酸钠（HG 3-123-76），化学纯。或硫酸钾（HG 3-920-76），化学纯。4. 氢氧化钠（GB 629-81），分析纯。40g溶于100ml蒸馏水配成40%溶液。5. 硼酸（GB 628-93），分析纯。2g溶于100ml蒸馏水配成2%溶液。6. 混合指示剂。甲基红（HG 3-958-76）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3-1220-79）0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存，三月内有效。7. 0.05mol/L盐酸标准溶液1）配制：4.2ml盐酸（GB 622-89，分析纯）加蒸馏水定容至1000ml，摇匀即得。2）标定 无水碳酸钠标定精密称取在300干燥至恒重的基准无水碳酸钠0.1g，准确至0.0001g，加蒸馏水50ml使溶解，加甲基红溴甲酚绿混合指示剂10滴，用盐酸标准溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗紫色为终点。同时做空白试验。根据下式计算HCl标准溶液浓度：式中，W基准无水碳酸钠的称取量（g）；V滴定时消耗盐酸标准溶液的体积（ml）；V0空白试验滴定时消耗盐酸标准溶液的体积（ml）。 硼砂标定称取0.1g干燥的四硼酸钠（即硼砂Na2B4O710H2O，GB 632-78，分析纯），准确至0.0001g，置于250ml锥形瓶中，加100ml蒸馏水溶解，加甲基红指示剂56滴，用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至溶液由黄变橙色为止。根据下式计算HCl标准溶液浓度：式中，W四硼酸钠称取量（g）；V滴定消耗HCl溶液体积（ml）。每次标定至少取3份平行样进行操作，计算结果的相对偏差不得超过0.2%，否则需重新标定，以其算术平均值作为标定结果。8. 蔗糖（HG 3-1001-76），分析纯。9. 硫酸铵（GB 1396-78），分析纯。五、试样的选取与制备取具有代表性试样，粉碎至40目，用四分法缩减至200g，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。六、测定