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成肌细胞是骨骼肌的前体细胞,是一种正常情况下位于成熟肌纤维表面的肌源性细胞 具有很强的增殖和分化能力。小鼠成肌细胞系C2C12细胞由Yaffe等83克隆建立,体外培 养的C2C 12细胞能在低血清诱导条件下分化为多核的肌管,并表达myosin和myogenin等 成熟骨骼肌的各种标志蛋白。因此,C2C12细胞通常成为体外研究成肌细胞增殖和分化的 首选模型。C2C12细胞的生长特性相差倒置显微镜下,刚传代的C2C12细胞呈球形或椭圆形,有折光性,30 min后开始贴壁, 8h后贴壁完全。贴壁后的C2C12细胞呈梭形,单核,位于细胞中央。起始4.0X104了个细 胞接种于直径为35 mm的细胞培养皿,3d后达80%左右汇合,4d后几乎占据培养皿所有细 胞生长表面,继续培养则相邻细胞变长并相互融合,肌小管形成增多。80%)待细胞在完全生长培养液(DMEM/10% FBS/S/P)生长至80%左右汇合时,换成分化培养液 (DMEM/2% HSISJP)后,大量细胞开始融合成肌管,分化培养3d后,肌管大量形成,之后 肌管进一步增长增粗。
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