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戴安公司高效液相色谱基础理论测试题(答卷)一填空题1. 高效液相色谱是一种以液体作 流动相和固体微粒作 固定相,待测组分在柱内 的两相之间进行高速 分配和高效分离的柱液体色谱方法。2. 在一定的色谱条件下,组分最大浓度点的洗脱时间(柱保留时间)是一定的,可作为色谱法组分定性的依据。组分的洗脱浓度正比于色谱峰的 峰高或峰面积,这是色谱法定量分析的依据。3正常色谱峰为对称形的正态分布曲线,不对称色谱峰有两种:前延峰和拖尾峰4. 液相色谱中的相平衡参数为:分配系数(K);容量因子(k);选择性因子(:)二名词解释及常用公式:1保留时间:色谱流出峰浓度最大点的时间。2.基线噪音: 基线起伏的最大波幅3 .基线漂移:基线在一定时间内的变化幅度4检测限(敏感度)D (写出计算公式): 基线噪音的二倍D=2N/S5. 理论塔板数(并写出计算公式):组分在塔板之间瞬间达到分配平衡时其分配等温线与 溶液浓度关联的热力学公式为:n=5- 54 (謬一尸=16 (倍尸6 色谱峰的对称因子(并写出计算公式):f _0. OSh _ B +47. 容量因子(K 计算公式k= tR-tO / tO8. 分离度(R)计算公式:并=(如?_鶴(WW /2判断题:a. 确基线噪音和漂移是检测器稳定性的主要技术指标(b. 灵敏度是检测器的主要性能指标()c. 检出限与噪音无关(x )d. 要提高柱的分离效能,必须:增加柱长L (增加n),增加选择性a,调节流动相的组成,控制容量因子k ()e. 溶解于流动相中的气体在色谱分离的过程中不会影响流动相的流速 和检测器的稳定性(x )f. 分析一个k值范围很宽的复杂混合物,恒溶剂洗脱是不能令人满意的。可在分离的过程中连续改变流动相的组成,即所谓梯度洗脱()注:(正确-; 错误-x)四.选择题:i.反相色谱柱,如 C18键合相的功能团是:(C )a.极性的b.中极性的c.非极性的2 两相邻组分要达到完全分离,其分离度Rs必须:(c )a. Rs1.03 紫外-可见光检测器是:(b )a. 通用型检测器b. 选择性检测器4反相色谱方法开发过程中流动相的洗脱强度(有机相在溶剂中的比例):a. 洗脱强度从大逐渐变小(有机相在溶剂中的比例从多逐渐变少)b. 洗脱强度从小逐渐变大(有机相在溶剂中的比例从少逐渐变多)五简答题:1 液相色谱柱子所用的化学键合相填料主要有哪些类型?答:极性键合相(正相色谱)非极性键合相(反相色谱)键合离子交换剂(离子交换色谱)2 反相色谱应用最广泛的流动相和固定相是哪些种类?答:流动相:H2O (高极性纯水n-C6(正己烷)最常用乙腈,甲醇和水固定相:C2 C18烷烃(R)键合相(疏水性)最常用 Ci8柱3 什么类型的样品需要采用梯度洗脱方法?答:分析一个k值范围很宽(即分析时间很长)的复杂混合物4 用过缓冲盐流动相后,系统应作如何清洗?答:先用5%甲醇的水溶液冲洗 20倍柱体积(15cm柱子60ml ,25cm柱子80ml) 再用100%甲醇冲洗30mim (参照清洗程序)
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