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检验标本采集手册检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息,临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段,观察疾病的变化,判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。一、病人准备1病人状态一般需在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。运动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、 ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高3050。2饮食多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。甚至喝代咖啡的饮料,可引起淀粉酶(AMY)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长,会使GLU,蛋白质降低,而胆红素升高。(2) 高脂餐后24h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。(3) 高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。(4) 高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(5) 含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。(6) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。吸烟:儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。3药物药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大毒素、氨苄青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。4体位体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、 Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。5时间病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。建议清晨抽血,理想时间是7:00 8:00(特殊情况除外)。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本的采集要点分述如下:(一) 血液标本1标本采集注意事项:(1) 采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5,胆固醇增加5,铁增加6,胆红素增加8,乳酸则不能使用止血带。(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍,而HDH则高出百倍以上,一旦溶血,特别是严重溶血,造成血清(浆)中这些物质的测定值增高,干扰测定结果。(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果使相应的结果偏高(如输K+、Glu时,可使所测K+、Glu明显增高),或使血液稀释结果偏低。(4)血气分析原则上抽动脉血,用肝素抗凝,且不可接触空气。血培养的样品要采用无菌技术,防止污染。(5) 标本采集后,必须在试管或容器上贴上标签(住院病人应有科别床号和姓名),且应当场核对无误。(6) 采血顺序 血培养凝血管血常规管血沉管生化及其它管。血细胞分析:紫色管,EDTA-K2抗凝抽血2ml,轻微颠倒5次混匀。血沉:黑色管,枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液比例为1:4,即装0.4ml抗凝剂,抽血至2ml,轻微颠倒5次摇匀,及时送检。凝血功能、溶贫两项、抗人球蛋白、庶糖试验、DIC:兰色管,枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液比例为1:9,装0.3ml抗凝剂,抽血至3ml,轻微颠倒5次摇匀,及时送检(DIC抽两管)。生化标本:红色管,一般应空腹抽血3ml,及时送检。免疫标本:红色管,抽血3ml,及时送检。(二) 尿液标本根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(12h、24h等)。(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,因标本浓缩,条件恒定,便于对比,能真实地反映肾功能病变等情况,可用作尿常规检验。(2) 随机尿不为条件所限,适于门诊、急诊病人,但受多种因素影响有形成分的浓度较低。(3) 计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,根据检验目的加入适当的防腐剂。 (4)清洁尿(中段尿、导尿、膀胱穿刺尿等)适于细菌培养,应注意无菌操作。(5)常用的防腐剂:甲醛,用于管型尿和细胞防腐,按1L尿液加入5ml甲醛的比例防腐;甲苯,用于尿酸、蛋白、K+、Na+、CL+、CA+等防腐,按1L尿液加入5ml甲苯的比例防腐。(三) 粪便标本采集后及时送检;采集待检粪便标本时,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表,一般以无滤漏容器留取510g即可。(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,及时送检。(五) 痰液标本采集晨间第一口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血液药物浓度最低水平时采样。(六) 阴道分泌物取阴道分泌物前应避免性生活、盆浴、阴道灌洗和局部上药。由妇产科医师采样后即时送检,否则影响滴虫动力,易于漏检。(七)细菌培养标本的采集:1血液及骨髓标本的采集(1) 应在病人发热初期或发热高峰时采集。一般情况下,要选择在抗菌药物治疗之前,对已用药物而不能中止的病人,也应在下次用药之前采集。(2) 以无菌方法取病人静脉血5ml,立即注入培养基中(约50ml),轻摇混匀。骨髓采集应在严格消毒后抽取骨髓12ml。(3) 采血量一般为培养基的1/10,婴幼儿采血12ml;对已用药的病人,可使血:培养基为1:20或更高;亚急性感染性心内膜炎及布鲁杆菌病,要多次采血和增加采血量,并主张此种病人应从肘动脉或股动脉采血。2尿液标本的采集(1)标本采集1) 中段尿采集法:是临床上最多采用的方法,女性病人先以肥皂水或 1:1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口;男性病人应翻转包皮,用肥皂水或1:1000苯扎溴铵冲洗或消毒尿道口,再用灭菌纱布擦干,让病人排尿,弃去前段尿,收集中段尿1020ml,盛于无菌容器内立即加盖送检。2) 导尿法:采取导尿管导尿法,是一种较好的无菌采集法。取得10 15ml尿液盛于无菌容器中送检。3粪便标本的采集(1)标本采集粪便多采集自然排出之粪便,亦可用直肠拭子法采集。1) 自然排便采集法:自然排便后,可挑取有脓血、粘液部分的粪便23g。液体粪便取絮状物,盛于灭菌的广口瓶或蜡纸盒中,或置于保存液或增菌液中送检。2) 直肠拭子法:如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿,可采用直肠拭子法采便。其方法是将拭子前端用甘油湿润。然后插入肛门约45cm(幼儿约23cm)处,轻轻在直肠内旋转,擦取直肠表面粘液后取出,盛入无菌试管或保存液中送检。(八)精液和前列腺液 采集精淮应在禁欲35天后进行,采用手淫法或体外排精法采集于洁净的塑料杯内,不能用乳胶或避孕套盛装标本。精液采集后应于30min内保温送达检验科,特别是气温比较低时,应将盛标本的容器放入内衣贴身运送。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,可直接滴于玻片送检,立即检查。 (九) 其他标本根据具体检验项目而定;对于特殊项目,临床医师在开申请单前,应同检验科相关部门联系并询问详细后,注明检查要求,再采样并及时送检。总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予以重视。 三、标本保存和运送标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检,如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血现象。(1) 采样后须立即送检的常规项目:血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。(2) 采样后0.5h内送检的常规项目:血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。(3) 采样后12 h内送检的常规项目:各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。临床检验中心
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