本科毕业论文题 目 一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验系 别 动物医学系 专 业 动物医学 年 级 2011级 学 号 222011602033114 姓 名 指 导 教 师 副教授 成 绩 二0一五年五月一十八日目 录任 务 书1文献综述2开题报告5正 文7 摘 要7 前 言7 材料与方法8 实验结果9 分析与讨论12 结 论12 参考文献与附录12 致 谢13指导教师评阅表I交叉评阅表II答辩记录III西南大学本科毕业论文（设计）任务书论文（设计）题目 一株鸭大肠杆菌E.coli RCya及其对部分抗生素制剂的药敏试验 系别、专业 动物医学 动物医学 学生姓名 学号 222011602033114 指导教师姓名 开题日期 2014年4月25日 论文（设计）的主要内容（技术指标）与要求： 1.鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定。 2.部分抗生素制剂对分离菌的药敏试验。 要求：独立查阅资料和撰写综述，按试验要求独立写出试验方案和准备研究用的各种试剂，独立撰写毕业论文，并保证试验数据的客观、真实！通过本课题熟悉和掌握科研立项的一般流程，掌握常规的实验室细菌分离鉴定技术及复方抗生素制剂的抗菌机理。进 度 安 排2014年5月-7月： 病原的分离鉴定2014年8月-12月：药敏试验2015年3-5月：撰写论文系意见： 注：1、任务书由指导老师填写。 2、任务书必须在第七学期13周前下达给学生。文献综述鸭大肠杆菌病的诊断与防控研究进展 摘要：本病是由大肠杆菌埃希氏菌的某些致病性血清型菌株引起的疾病总称。该文就该病的病原学、血清型、流行病学、临床症状与病理变化、诊断及防治等方面进行了综述。关键词：鸭；大肠杆菌；流行病学；防治；研究进展 鸭大肠杆菌病（Duck.E.coli disease）是由埃希氏大肠杆菌引起的各种日龄鸭的急性败血性细菌病1，以心包炎、气囊炎、肝周炎、腹膜炎为主要特征。1 病原学 大肠埃希氏杆菌是中等大小杆菌，其大小为1-3微米0.5-0.7微米，有鞭毛，无芽胞，有的菌株可形成荚膜，革兰氏染色阴性。在170种O型抗原血清型中1/2左右对禽有致病性，但最多的是O1、O2、O78、O35四个血清型。本菌对一般消毒剂敏感，对抗生素及磺胺类药等极易产生耐药性2。2 病型及临床症状与病理变化32.1 鸭胚和雏鸭早期死亡：该病型主要通过垂直传染，鸭胚卵黄囊是主要感染灶。鸭胚死亡发生在孵化过程，特别是孵化后期，病变卵黄呈干酪样或黄棕色水样物质，卵黄膜增厚。病雏突然死亡或表现软弱、发抖、昏睡、腹胀、畏寒聚集、下痢(白色或黄绿色)等，个别有神经症状。病雏除有卵黄囊病变外，多数发生脐炎、心包炎及肠炎。感染鸭可能不死，常表现卵黄吸收不良及生长发育受阻。2.2 气囊病：气囊病主要发生于3-12周龄幼雏，特别是3-8周龄肉鸭最为多见。气囊病也经常伴有心包炎、肝周炎，偶尔可见败血症、眼球炎和滑膜炎等。病鸭表现沉郁、呼吸困难、有啰音和喷嚏等症状，气囊壁增厚、混浊，有的有纤维样渗出物，并伴有纤维素性心包炎和腹膜炎等。2.3 大肠杆菌性急性败血症：本病常引起幼雏或成鸭急性死亡。特征性病变是肝脏呈绿色和胸肌充血，肝脏边缘钝圆，外有纤维素性白色包膜，各器官呈败血症变化，也可见心包炎、腹膜炎、肠卡他性炎等病变。2.4 大肠杆菌性肉芽肿：病鸭消瘦贫血、减食、拉稀。在肝、肠(十二指肠及盲肠)、肠系膜或心上有菜花状增生物，针头大至核桃大不等，很易与禽结核或肿瘤相混。2.5 心包炎：大肠杆菌发生败血症时发生心包炎。心包炎常伴发心肌炎，心外膜水肿，心包囊内充满淡黄色纤维素性渗出物，心包粘连。3诊断用实验室病原检验方法，排除其他病原感染(病毒、细菌、枝原体等)，经鉴定为致病性血清型大肠杆菌，方可认为是原发性大肠杆菌病；在其他原发性疾病中分离出大肠杆菌时，应视为继发性大肠杆菌病4。4 防治4.1 搞好禽舍空气净化：降低鸭舍内氨气等有害气体的产生和积聚是养鸭场必须采取的一项非常重要的措施5。常用方法如下：4.1.1 药物喷雾:过氧乙酸：常规方法是用0.3%过氧乙酸，按30毫升/立方米喷雾，每周1-2次，对发病鸭舍每天1-2次；多聚甲醛：在25平方米垫料中加入4.5千克多聚甲醛，它可和空气中的氨中和，氨浓度很快下降，但21天后又回升到原来水平，因此应重新使用。4.1.2 机械清除:及时清粪，并堆积密封发酵，及时通风换气。重视环境治理，饲养场地绿化，种草植树。4.2 搞好种蛋：孵化厅及禽舍内外环境清洁卫生，并按消毒程序进行消毒，以减少种蛋、孵化和雏鸭感染大肠杆菌。4.3 防止水源和饲料污染：可使用颗粒饲料，饮水中加消毒剂，如含氯或含碘消毒剂；水槽、料槽每天应清洗消毒。4.4 药物防治：应选择敏感药物在发病日龄前1-2天进行预防性投药，或发病后作紧急治疗。4.4.1抗生素:氨苄青霉素：按0.2克/升饮水或按5-10毫克/千克拌料内服；阿莫西林：按0.2克/升饮水；庆大霉素：2-4万微克/升饮水；土霉素类：按0.1-0.6%拌饲或0.04%饮水，连用3-5天。4.4.2 合成抗菌药:磺胺嘧啶：0.2%拌饲，0.1-0.2%饮水，连用3天；磺胺喹恶林：0.05-0.1%拌饲，0.025-0.05%饮水，连用2-3天，停2天，再用3天；呋喃唑酮：0.03-0.04%混饲，0.01-0.03%饮水，连用3-5天，一般不超过7天。参考文献：1D ho Moulin M , Fairbrother J M . Avian pathogenic Escherichia coli (A PEC ) J .Vet Res,1999,30:299-316.2鲍国连,韦强,季权安,等.鸭大肠杆菌病流行病学与病原特性研究J.浙江农业学报,2001(03):33-37.3李延龙,张其星,于占松.鸡大肠杆菌病的诊断综述J.家禽科学, 2008(11):43-45.4磨龙春,熊毅,邓朝阳,等.广西鸭大肠杆菌病的病菌血清型及防治J.广西农业科学,2001(04):193-194.5胡继明,魏芝贵.鸭传染性浆膜炎和大肠杆菌病的防治措施J.农技服务2007(03):85-86.西南大学本科毕业论文（设计）开题报告论文（设计）题目一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验系别专业动物医学系 动物医学年 级2011级开题日期2014年4月25日学 号222011602033114姓 名陈甫指导教师孙裕光1.本课题研究意义：我们收集了临床病鸭很多例，经过多次分离鉴定，表明大肠杆菌和沙门氏菌比较常见，希望通过应用所学知识对生产上出现的病鸭做出临床诊断和实验室诊断，给出处置方案，同时验证部分抗生素制剂的抗菌效果，对指导用药提供试验根据,所以设计了这样的研究课题。2.研究内容：2.1鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定2.2 部分抗生素制剂对分离菌的药敏试验3.技术路线、研究方法和研究进度：3.1 技术路线 病鸭-剖检-临床诊断（初步诊断）-微生物诊断（确诊）：平板划线接种-菌落特征鉴定-细菌纯化培养-染色镜检-动物试验-生化试验鉴定-种属（大肠杆菌）-血清型鉴定-种（大肠杆菌）-药敏试验-抑菌圈大小-敏感抗生素制剂。3.2研究方法3.2.1培养基的制备:麦康凯、蛋白胨20克，乳糖10克，蒸馏水1000毫升，牛胆盐5克，氯化钠5克，中性红0.03克，琼脂14克，PH为7.1-7.23.2.2普通肉汤培养基:牛肉膏3克，蛋白胨10克，氯化钠5克，蒸馏水1000毫升，PH为7.4-7.6（调节PH值用1mol/L的NaoH或1mol/L的HCL）3.2.3革兰氏染色镜检：（1）取黄色菌落和红色菌落稀释涂布于载玻片上，用酒精灯火焰固定；（2）用草酸铵结晶紫染色1分钟；（3）用自来水冲洗；（4）加碘酸覆盖涂面染1分钟，用自来水冲洗，用吸水纸吸去水分；（5）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸取水分；（6）最后用复红染色液染1分钟后，用自来水冲洗，用吸水纸吸干，镜检。3.24细菌的纯化: （1）取黄色菌落用三区划线法涂布于麦康凯培养基上，置于37摄氏度的恒温箱中培养24小时，观察菌落的形态和颜色。 （2） 取红色菌落用三区划线法涂布于麦康凯培养基上，置于37摄氏度的恒温箱中培养24小时，观察菌落的形态和颜色。 （3)取红色菌落在普通肉汤培养基上在37摄氏度的水浴恒温震荡仪上培养24小时。3.2.5细菌的毒力测试将培养好的菌液吸取5毫升注射在4只5日龄的鸭子上，另外同龄的4只不打菌液，作为对照组。3.2.6生化鉴定3.2.7药敏试验打孔法3研究进度2014年5月-7月： 病原的分离鉴定2014年8月-12月：药敏试验2015年3月-5月：撰写论文 指导教师（签名）： 年 月 日5.系意见： 系（盖章） 年 月 日说明：开题报告应在教师指导下由学生独立撰写。在毕业论文（毕业设计）开始二周内完成，交指导教师是审阅，并接受学校和系检查。正文一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验 西南大学荣昌校区动物医学系，重庆荣昌 402460摘要：无菌采取荣昌某鸭场疑似大肠杆菌病死鸭的心脏、肝脏和脾脏等进行病原菌的分离、鉴定、生化试验、动物实验和药敏实验。实验结果表明：分离到的大肠杆菌对鸭子具有致病性，对610日龄的雏鸭具有较高的致死率。用兽药企业生产的在市场上销售的抗生素制剂做体外药敏实验，其结果发现盐