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第六章 电泳技术和常见电泳仪习题参考答案一、名词解释1 .电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相 反的电极移动的现象。2 .毛细管电泳的电场强度:在给定长度的毛细管两端施加一个电压 后所形成的电效应强度。3 .蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定 pH值时,它将带 有相同数量的正、 负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不 会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。4 .电泳速度:在单位时间内,带电粒子在毛细管中定向移动的距离。5 .迁移率:带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常见区来表示。6 .毛细管电泳技术:是一类以毛细管为分离通道、 以高压直流电场 为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度 (淌度)和分配行为上的差异 而实现分离的一类液相分离技术。7 .电泳淌度:带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度 之比。8 .迁移时间:毛细管中,带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。9 .毛细管电泳电渗流:在高电压下,溶液中的正电荷与毛细管壁表 面的负电荷之间作用,引起流体朝负极方向运动的现象。10 .焦耳热:在高电场下,毛细管中的电解质会产生自热现象 ,称该 热量为焦耳热。11 .电渗:电场中液体对于固体支持物的相对移动。12 .吸附作用:介质对样品的滞留作用。选择题【A型题】1.C2 D3 B4 E5 A6.B7. C8. E9. D10 A11.E12. E13 D14 C15 E16A17 D18 C19 E20 B21C22 D23 E24 B25 D26.E27 D28 B29 C30 A31 . B36. C【X型题】32 D37 D33 C38 D34 D35 B1ABCE2 ABCD3.ABCDE4.ABCE5 ABCD6ABCE7. ABE8 ACE9 ABC10 ACDE1115ABCD.BCDE12ABCDE13 ABCE14 ABCD16. ABCDE20. ABCDE17BCDE18 ABCE19 ABDE2126ABCD.ABDE22 ABCD23 ABCE24 ABCD25 BCDE三、简答题1.简述电泳、 电泳技术的概念。答:电泳是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。2 .简述电泳的基本原理。答:物质分子在正常情况下一般不带电,可是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、 颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的 移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。3 .影响电泳的外界因素有哪些 ?答:外界因素有电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度、电渗 作用、 粒子的迁移率、 吸附作用等。4 .临床常见的电泳分析方法有哪些 ?答:纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、 等速电泳、 双向凝胶电泳(二维电泳)、免疫电泳。5 .溶液的Ph值对电泳速度有何影响 ?答:溶液的pH值决定了带电质点的解离程度,也决定了物质所带电 荷的多少。对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言,pH值离等电点越远,颗 粒所带的电荷越多,电泳速度也越快。反之,则越慢。6 .何谓蛋白质的等电点(pI) ?答:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(既净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。7 .什么是粒子的迁移率?迁移率与哪些因素有关?答:迁移率为带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常见w来表示。主要与颗粒直径、形状以及所带的净电荷量等有关。8 .电泳技术根据分离原理如何分类 ?答:根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、 等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。9 . 一般所说的电泳设备可分为哪些 ?答:可分为主要设备(分离系统)和辅助设备(检测系统)。主要设备 指电泳仪电源、 电泳梢。辅助设备指恒温循环冷却装置、伏时积分器、凝胶烘干器等,有的还有分析检测装置。10 .电泳设备对支持物一般有何要求 ?答:要求不溶于溶液,不导电,吸液量多而稳定,不带电荷,没有电 渗,不吸附蛋白质等其它电泳物质 ,热传导度大,结构均一而稳定,分离 后的成份易析出等。11 .醋酸纤维素薄膜电泳的特点是什么?答:分离速度快、 电泳时间短、 样品用量少。因此特别适合于病理 情况下微量异常蛋白的检测。12 .简述聚丙烯酰胺凝胶电泳特点及应用范围。答:特点:具有机械强度好、弹性大、 透明、化学稳定性高、无电渗作用、 设备简单、 样品量小(1区g 100 w g)、分辨率高等。应用范围:可用于蛋白质、 核酸等分子大小不同的物质的分离、定性和定量分析。还可结合去垢剂十二烷基硫酸钠 (SDS),以测定蛋白质亚 基的相对分子质量。13 .简述等电聚焦电泳法的原理、特点。答:原理:不同的蛋白质等电点不同,如果分子处于 pH和等电点一 致的溶液中,则泳动就停止进行。如果溶液内的pH是位置的函数,或者说有一个pH的位置梯度,那么在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液(两性载体电解质)中进行分离,每一种被分离的两性物质都移向与它的 等电点相一致的 pH位置,在那里不再移动(称为聚焦)。由于在这点净 电荷(正负抵消)为零,因而又称等电聚焦。特点:使用两性载体电解质,在电极之间形成稳定的、 连续的、线 性的pH梯度;由于聚焦效应”,即使很小的样品也能获得清晰的、鲜
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