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溶血对生化检验的影响溶血是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。鉴于红细胞的脆性较大,血液标本采集、分离等过程中稍有不慎,均可引起标本发生不同程度的溶血而影响检验结果。笔者对溶血的原因、发生机制及对检验结果的影响及其对策进行综述。1 溶血的原因及其对策溶血可分为体内溶血和体外溶血。体内溶血可由物理因素(如人工心脏瓣膜或大血管手术后)、生物因素(恶性疟疾)、药物因素等引起;体外溶血多由物理因素(机械性破坏、冻疮)、化学因素(如血液接触表面激活剂)和代谢因素(如遗传病引起红细胞脆性增加)等引起。常见体外溶血的原因有:1)扎压脉带时间过长、过紧; 2)静脉穿刺处的消毒酒精液未干即开始采血; 3)针头在皮下反复穿刺3次以上,过度损伤组织; 4)针头过细或抽血速度太快,负压太大,红细胞通过针尖时破坏而溶血; 5)抽出的血液注入试管时用力过猛、速度过快,或带针头将血液注入试管,红细胞受挤压破裂; 6)抗凝时用力摇晃试管或剥离血凝块; 7)用破裂的离心管盛放标本,离心速度太快,离心管和套管之间有硬物; 8)标本置于过冷或过热的水箱或在运输过程中动作幅度过大; 9)采血量不足,相对低渗抗凝; 10)抽血器具内含氧化还原性洗涤1剂。要规范采血程序,选择合适静脉,要求扎压脉带后1min内采血,避免用力拍打或反复握拳等不良动作,见血即松压脉带,并一针见血,抽血速度要慢,向试管内注血前先取下针头,沿试管壁缓慢将血液注入洁净试管,不得将气泡注入。妥善处理和保存标本,严把注射器和试管质量关。2 体内溶血和体外溶血的鉴别2体内溶血多见于血管内溶血性疾病,实验室检查有以下几个方面的改变: 1)血浆游离血红蛋白增加; 2)血清结合珠蛋白降低; 3)血浆高铁血红素清蛋白阳性; 4)血红蛋白尿,尿潜血试验阳性; 5)尿含铁血红素试验阳性; 6)血清游离胆红素增高,尿胆原阳性; 7)外周血网织红细胞增高; 8)增生性贫血骨髓像,以中、晚幼红细胞增多为主。体外溶血由标本采集和处理不当引起。体外和体内溶血的主要区别是前者血清或血浆Hb、LDH和钾同时升高,而后者通常是血清或血浆Hb和LDH升高,而钾不升高,还可通过珠蛋白检测、间接胆红素3测定和网织红细胞计数进一步加以鉴定。3 溶血对生化检验结果的影响溶血时血清ALT、AST和ALP升高1.18.0倍,而CK升高不明显,GGT则明显降低4。Fe、AST、CK、LDH、CK-MB、K、ALT、TP、TB、DB、CH、P、Mg、Urea升高,5UIBC、HDL-C、GLU、Ua、CO2、Na、ALB、AMY、TBA、Crea、CI、Ca降低。轻度溶血AST、ALT仅轻微升高,中、重度溶血明显升高,因此明显溶血的标本不能用于AST和ALT6的测定;轻度溶血LDH活性显著升高,故测定LDH标本应避免溶血。溶血可使CK、CK-7MB、LDH、-HBDH、TP、AST升高,而GGT降低。溶血对酶类、电解质和胆红素影响最大, CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST 5项心肌酶测定随溶血程度加重增高显著,其中LDH89升高最明显。溶血对肝功能指标有显著影响。4 溶血对检验结果的影响机制溶血对不同检验项目结果的影响机制不同,主要表现为以下几个方面: 1)细胞内外成分浓度差的干扰,细胞内含量高的血红蛋白、酶类、离子、有机物等,溶血后细胞内的物质顺浓度差溢出,使测得值明显高于非溶血标本;相反,红细胞内浓度极低的物质,如脂蛋白、胆固醇酯、钠等随溶血,细胞内液对血清的稀释作用,使测定结果明显下降; 2)细胞内、外液成分之间反应的干扰; 3)有色物质对吸收光谱的干扰,造成吸光度和散光度产生较大的误差,当被测溶液的颜色与有色物质的颜色接近时发生正干扰,而与有色物质的颜色相差较远时产生负干扰; 4)溶血标本中血红素中的正铁离子,可被试剂中的氧化剂(如亚硝酸钠)氧化成为黄色的高铁血红素,对两点比色法造成干扰;在血清总胆固醇CHODPAP终点法中,Hb高于2g/L时会引起正干扰;在磷的测定中,溶血标本中红细胞内磷酸酯被水解,使无机磷增加; 5)溶血引起稀释的负干扰和Hb增加吸光度的正干扰相互作用形成综合干扰。5 溶血标本的处理与评价为减少误差,提高检验结果的准确性,一旦发现标本溶血,应采取相应的措施: 1)主动与临床联系,结合临床首先排除体内溶血的可能。若不是体内溶血,建议重新采集标本。
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