生物学实验教学中心Central Laboratory微生物学实验实验一玻璃器皿的包扎及灭菌2009生物学实验教学中心课前预习与目的要求【课前预习】1 高压蒸汽灭菌原理。2.上海申安LDZX-50KBS灭菌锅的使用方 法。【目的要求】1. 学习并掌握玻璃器皿的包扎方法。2. 掌握高压蒸汽灭菌的基本原理及操作方 法。生物学实验教学中心基本原理微生物学实验所用的器皿，大多数要进行 消毒、灭菌，才能用来培养微生物。玻璃器皿的包装方法正确合理，在使用过 程中才能有效防止杂菌的污染。玻璃器皿包装好后，一般用高压蒸气灭菌 法进行灭菌。生物学实验教学中心基本原理高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个 密冈的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌 锅隔套间的水沸牆而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀 中驱尽，关闭排气阀，继续加热，此时由 于蒸气不能溢岀，而增加了灭菌锅内的压 力，从而使沸点增高，得到高于100C的温 度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌 的目的。生物学实验教学中心实验用品棉花，试管，培养皿，纱布，三角瓶，橡 皮筋，量筒，牛皮纸（或旧报纸），LDZX- 50KBS立式高压蒸气灭菌锅等。iences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biology生物学实验教学中心方法步骤1 熟悉微生物学实验的结构与功能。2清洗试管、三角瓶，培养皿等玻璃器具， 烘干。3. 制作试管棉塞及三角瓶棉塞（参照微生物 学实验基本操作技术）。4. 用量筒或吸管取适量自来水于三角瓶和试 管中，包装好以制备无菌水。5. 包装空培养皿，移液管。6. 灭菌（参照I ）。生物学实验教学中心玻璃器皿清洗方法玻璃器皿在使用过程中确保干净，用过的 器皿应及时清洗。器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗洁净清 洗。琼脂培养基的器皿应先将培养基刮去。琼脂和固体物不能丢弃到水池中，以免堵 塞管道。清洗方法详见I。iences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biologya炉巒生物学实验教学中心棉塞的制作棉塞的作用有二：一是防止杂菌污染, 是保证通气良好。形状，大小，松紧适度。iences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biologyiences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of BiologyCiences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biology培养皿的包装培养皿常用旧报纸紧紧包裹，一包710套 ,包好后干热或湿热灭菌。也可用金属筒包装。ABiences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biology移液管的包装a覽咚生物学实验教学中心作用：以免使用时将杂菌吹入其中，或不 慎将微生物吸岀管外。es、Hubei Normal UniversityCentral Laboratory of Biology0 Sciences, Hubei Normal U/iivcrsityCentral Laboratoiy of Biology试管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅胶塞；用二层报纸包扎好（如有牛皮纸，效果更 好），进行干热或湿热灭菌。试管较多时，一般7个或10个一组，再用双 层报纸包扎。如实監学中止海申安LDZX-50KBS灭菌锅的使用D打开电源与开关，检 查水位显示灯；2）加灭菌物品；3）盖紧；4）设定温度和时间；5)查看排气（水）阀旋至排气处;6）排气； 7）结束后取物。0 Sciences, Hubei Normal U/iivcrsityCentral Laboratoiy of Biologya炉巒生物学实验教学中心实验结果记录自己制作的实验用品（含无菌水）名 称的规格与数量。iences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biology生物学实验教学中心注意事项1实验前，熟悉实验室平面布局图，了解实 验仪器用品摆放规律及用途。2制备无菌水时，试管装水量要超过试管高 度的1/5,三角瓶装水量不要超过规格容量 的1/2 （装量过多，灭菌过程中易喷出或润 湿棉塞）；3.灭菌锅的操作安全。生物学实验教学中心实验报告1高压蒸气灭菌开始之前，为什么要将锅内 冷空气排尽灭菌完毕后，为什么待压力降 低“0”时才能打开排气阀，开盖取物。2在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，怎样杜绝 一切不安全的因素。3.灭菌在微生物实验操作中有何重要意义。iences. Hubei Normal UniversityCentral Laboratoiy of Biology生物学实验教学中心Thanks for your attention!Central laboratory of Biology