碳稳定性同位素分析食物网中能量流动摘要：随着科学技术发展，稳定性同位素已经广泛应用在生态学研究的诸多领域。在研究食物网中能 量流动关系时，稳定性同位素能提供更迅速、客观的分析。此次实验利用碳稳定性同位素技术对受到人类 破坏或其他因素影响的选定区域分析其食物网中的能量流动，旨在研究该区域生物之间的能量流动关系， 从而对该区域采取合理的保护措施。关键词：碳稳定性同位素；食物网；能量流动；61C值Carbon Stable Isotopeanalyzes Studies Energy Flux in Food WebABSTRACT: Stable isotopehas been widely used in various fields in ecology studieswith the development of science and technology.Stable isotope can provide rapider and more objective analysis when researching energy flux relationship in the food web. In the process of this experiment, we analyze the energy flux relationship in the food web of the chosen areas that are destroyed by human beings or affected by other factors by means of carbon stable isotope technology, with the aim of researching the energy flux relationship among population in this area, consequently we can adopt reasonable protective measures in this areas.KEY WORDS: Carbon stable isotope； food web； energy flux； 613C一研究背景随着世界人口的持续增长和人类活动范围与强度的扩展和增加，地球上的生物多样性逐 渐降低。例如，持续不断地砍伐树木已经导致世界上大量树木物种面临灭种的危险；环境污 染使得动植物的栖息地环境遭到严重的破坏，致使物种数量锐减1。在某一区域中，动植物 数量的减少还有一个很重要的原因，即某些因素（例如栖息地减少和改变、滥捕乱猎、外来 物种的引入、污染等2）导致该区域部分动植物数量的减少，而这进一步通过该区域的食物 网影响到区域中其他动植物的种类和数量，进而对整个区域各种生物体造成影响。食物网是在生态系统中的生物成分之间通过能量传递关系存在着一种错综复杂的普遍 联系，直接反映生态系统的结构和功能3。生产者制造有机物，各级消费者消耗这些有机物， 生产者和消费者之间相互矛盾，又相互依存。不论是生产者还是消费者，其中某一种群数量 突然发生变化，必然牵动整个食物网。食物网是生态系统长期发展的进化过程中形成的。人 类活动使生态系统中某一生物体种群数量遭到破坏，将使生态平衡失调，甚至是生态系统崩 溃2。因此，研究食物网中生物的能量流动关系，对于维持生态系统的稳定、利用动物间的 相互制约来减缓人类活动对生态系统的破坏具有重要的意义。但是研究食物网中各生物的能量流动关系是十分复杂的，因为食物网的真正结构或功能 不易通过直接观察生物觅食、胃容物或粪便等的分析而决定，而且这仅能反映出短暂的营养 关系4。而生物体内的稳定性同位素比值可作为一种自然的标记，用来示踪营养物质在食物 网中的流动。因此研究食物网中生物的能量流动关系时选用稳定性同位素技术便可以很方便 地进行实验研究。原子是由质子、中子和电子组成。具有相同质子数不同中子数（即不同质量数）的同一元素的不同核素互称为同位素。同位素可以分为放射性同位素和稳定性同位素。稳定性同位 素是天然存在于生物体内的不发生或极不易发生放射性衰变的一类同位素。元素和N元素 分别有两种中子数不同的稳定性同位素，即13C和12C以及15N和14NO中子数多的同位素（如 13C和15N等）称为重同位素，中子数少的同位素（如12C和14N等）称为轻同位素。同位素 丰度是指一种元素的不同种同位素混合后，其中某一特定同位素的原子数与该元素的总原子 数之比，它代表了元素的同位素组成。重同位素的自然丰度很低，轻同位素的自然丰度很高， 因此一般不直接测定重同位素和轻同位素各自的绝对丰度，而是测定它们的相对丰度或同位 素比率（R）,以碳元素为例可表达为：13R（C）=13C/12C。为了便于比较物质同位素组成的微小 变化，物质的同位素组成更常用稳定性同位素比值（6值）表示，公式是6R样品（）=（R样品-R 样品样品标准）/R标准x1000o其中，R样品是被测样品13C样品/12C样品的比值，R标准是标准物质13C标准/12C标准 的比值。当6值大于零时，则表示此样品的重同位素比标准物质富集重同位素，小于零时 则表示此样品的重同位素比标准物质贫重同位素。6值与标准物质的选择有关，结果对比时 应采用相同的标准。因此，6值能清晰地反映同位素组成的变化。在某一生态系统中，生产 者的613C相对于该生态系统中其他消费者的613C的差异，可用于追踪生态系统中的主要物 质碳源的来源和物质流动4 5O在研究食物网中生物的能量流动关系时，相对于传统的消化道内含物分析，稳定性同位 素能提供更迅速、客观的分析。稳定性同位素分析为研究食物网结构提供了一种特别的方式， 显示出长期以及短期内生物的食性变化，建立营养流动过程以及生物在食物网及营养层的地 位。随着生物觅食习性的不同，碳稳定性同位素比值随其在营养层的位置以特定方式增加， 因此可用以分析食物的来源和组成。稳定性同位素技术早在20世纪70年代末期就被引入到 生态学领域。最初是利用植物碳稳定性同位素的差异开展了许多有关营养流动方面的研究； 到90年代,稳定性C和N同位素被用来分析动物的食性、营养级位置关系以及食物链结构； 本世纪初，由于科学技术的进步，在国外稳定性同位素（特别是H同位素）被用来开展动 物迁徙习性方面的研究O本次研究拟利用碳稳定性同位素技术对某区域食物网中生物的能量流动关系进行实验 研究，旨在分析生物之间的相互作用，明确该区域中食物网中生物的能量流动关系，了解某 些动植物种群数量的减少或增加对该区域中其他动植物的影响，从而提出科学合理的解决方 案，最终减少人类活动等因素对该区域生态系统的干扰，使该区域的生态问题得以有针对性 地解决。二器材和试剂 实验器材：解剖针、解剖镊、解剖剪、恒温干燥箱、研钵、研磨杵、100目筛、 Finnigan MAT DELTAPLU SXL 同 位 素 质 谱 仪 、 元 素 分 析 仪 、 比 集 运 量 质 谱 仪 （ Finnegan Mat,Bermen,Germany） 实验试剂：标本固定液等三研究技术路线1选定研究区域选定此次实验研究的区域。在该区域中，人类的活动导致某些动植物的种群数量发生变 化，影响了该区域的生物多样性。但是目前对该区域中食物网各生物的能量流动关系尚不明 确，无法提出科学合理的解决对策，因此需要通过此次实验加以明确。2测定生物群落中碳稳定性同位素比值（613C）选取选定区域中待研究的动植物样品，测定碳稳定性同位素比值（6i3C）o具体测定步 骤可以参考以下实验步骤，不过具体实验步骤依照实际情况而定。参考实验步骤：选取选定区域中主要植物及部分动物的样品，鸟类以胸肌作样品，哺乳 类以后退肌肉作样品，昆虫及两栖类则取全部作样品。所有样品经恒温干燥箱6080C烘 干至恒重，充分研磨，过100目筛备用。以Finnigan MAT DELTAPLU SXL同位素质谱仪和元素 分析仪进行测定，二者的操作界面为ConF III。制备条件：氧化炉温度为900C，还原炉温 度为680C，柱温为40C。产生的CO2在真空管中经纯化注入比集运量质谱仪(Finnegan Mat,Bermen,Germany)进行测定。测定之后要计算碳稳定性同位素比值(S13C值)，计算公式为6R (%o)=(R样品 R )/R样品样品标准标准x1000。在这个公式中，6R样品为被测材料的碳稳定性同位素比值；R样品为被测样品13C样品标准样品样品样品/12C样品的比值，R标准是标准物质13C标准/12C的比值。当6值大于零时，则表示此样品的重样品标准标准标准同位素比标准物质富集重同位素，小于零时则表示此样品的重同位素比标准物质贫重同位素 6 值与标准物的选择有关，结果对比时应采用相同的标准。3获得碳同位素富集因子 由该区域中某些已知的植食性动物的肌肉或植物的叶片以及植食性动物的胃容物二者的碳稳定性同位素比值差异平均后得到碳同位素富集因子。例如，计算得到的肌肉或叶片碳 稳定性同位素(613C)平均数是(-25.190.37)%。，胃容物碳稳定性同位素(613C)平均数是 (-26.240.30)% ，二者相减得到碳同位素富集因子是 (1.050.45)% 。 DeNiro M J&Epstein S (1978 , 1981)报道的植食性动物与其食物间的碳同位素富集因子为1%o2%o67，这个可以 作为一个参考标准。4食物链营养关系分析食物链营养关系分析的时候主要依赖于碳稳定性同位素分析，并且辅以胃容物分析，即 通过胃容物获得部分食物信息，并比较两种可能存在取食与被取食的生物间的碳同位素差异 与营养级间的碳同位素富集因子(例如1.05% 0.45% )相比较。如果二者在碳同位素富集 因子范围内波动，则可认定二者之间存在取食与被取食的营养关系；相反，若二者差异不在 此范围之内或差异较大，则可认定二者之间不存在(或存在微弱的)取食与被取食的营养关 系。5食物链长度计算食物链的长度按下述公式计算：FCL= (613C顶极物种-613C初级生产者)/本次实验测定的碳同位顶极物种初级生产者素富集因子。在此式中，FCL是指待计算的食物链的长度，613C顶极物种为顶级物种的碳稳定性顶极物种同位素比值， 613C 初级生产者为初级生产者的碳稳定性同位素比值，最后与本次实验测定的碳同 初级生产者位素富集因子相除便可得到食物链的长度。四研究进度安排此次实验的进行时间主要取决于选取选定区域中待研究的动植物样品的时间，因为该实 验步骤需要充分考虑研究区域中动植物的生活规律，从而依据动植物的生活规律可以顺利高 效地选取到待研究的样品。其他实验步骤可以在实验室完成，对自然环境的要求较低，因此 实验时间比较灵活。五研究成本预算此次实验的研究成本主要来自实验仪器的购买，相对昂贵的实验仪器包括恒温干燥箱、 同位素质谱仪、元素分析仪、比集运量质谱仪。另外研究成本还包括科研工作人员在选定的 研究区域和实验室两地来回的交通费用和在研究区域选取样品期间科研工作人员户外餐饮 住宿等的费用。六可行性分析生物多样性(biodiversity)是指生命有机体的种类和变异性及其与环境形成的生态复合 体以及与此相关的各种生态过程的总和，包括动物、植物、微生物和它们所拥有的基因以及 它们与其生存环境形成的复杂的生态系统和自然景观。生物多样性通常被认为有三个层次， 即：遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性。其中，物种多样性是生物多样性在物种上 的表现形式，反映了地球上生物有机体的复杂性，是生物多样性研究的核心内容。种群（population）是指在特定时间内，分布在同一区域的