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新鲜蔬菜中B-胡萝卜素的提取、分离和测定班级:临五一班(2 小班)姓名:任依梦 学号:5117119051【实验目的】掌握从新鲜胡萝卜中提取、分离胡萝卜素的方法掌握应用紫外-可见吸收光谱法测定胡萝卜素的紫外光谱图 了解共轭多烯化合物nn*跃迁吸收波长的计算方法及共轭多烯化合物的紫 外吸收光谱特征【实验原理】简介 胡萝卜素是维生素A的前体,具有类似维生素A的活性,有a、丫异 构体,其中以胡萝卜素生理活性最强。彷胡萝卜素的结构如下:胡萝卜素是长链多烯化合物,它的n-n*跃迁吸收带处于可见光区,因此纯力胡 萝卜素是橘红色晶体。提取 胡萝卜素不溶于水,可溶于有机溶剂,故可用有机溶剂来提取。分离采用柱层析法将提取液中B-胡萝卜素分离出来。测定经分离提纯的B-胡萝卜素含量可以直接用紫外-可见分光光度法测定。 【实验步骤】1. B-胡萝卜素的提取20g新鲜胡萝卜+40mL1: 1丙酮-石油醚混合溶剂研磨5min (研钵)一 萃取(分液漏斗)2. 柱层析 在层析柱中加入少许浸有石油醚的脱脂棉f加入一半层析柱高的石油醚f加入 20g中性氧化铝f在氧化铝上面加一圆形滤纸f加入B-胡萝卜素提取液f用9:1 (体积比)石油醚-丙酮溶液洗脱,进行层析3. B-胡萝卜素的紫外-可见吸收光谱的测定将层析分离得到的橙黄色试样稀释后加到1cm的比色皿中,以石油醚作空白试剂,用分光光度计测定 400600nm 范围内的吸收【实验结果】B-胡萝卜素的吸收曲线
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