1.1DNA重组技术的基本工具课时演练促提升1.有关DNA重组技术中的工具一一“分子缝合针” “分子手术刀” “分子运输车”的组合正确的是（）DNA1接酶 DNAm合酶 限制酶 RNAm合酶 载体A.B.C.D.答案：C2.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误白是（一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核甘酸序列酶能识别和切割A.）限制酶的活性受温度影响限制RNA限制酶可从原核生物中提取B.限制酶的操作对象是原核细胞C.D.解析：限制酶的作用是在基因工程中提取目的基因和切割载体 细胞，也不能识别和切割 RN册子。答案：C3.下列黏性末端属于同一限制酶切割而成的是（），是作用于DNA分子，而非原核A.B.C.D.解析：将黏性末端分别进行比较，只有相同，因此属于同一种限制酶切割形成的末端。答案：B4 .下面是质粒的结构示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨茉青霉素抗性基因，tet 为四环素抗性基因，箭头分别表示四种限制性核酸内切酶的不同酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨茉青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的限制酶酶切位点与哪一选项相符？（）解析：要得到能在四环素培养基上生长而不能在氨茉青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，选用的质粒应为 ori正常、am啾破坏、tet正常。 答案：A5 .现有一长度为1 000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶 EcoRI酶单独酶切后得 到的DNA分子仍是1 000 bp,用Kpnl单独酶切得到 400 bp和600 bp两种长度的DNM段, 用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到 200 bp和600 bp两种长度的DNM段。该DNA分子的酶 切图谱正确的是（）的R.I 酗1600 I2QOI2OO|AiRl电版反战1旗4600 两。孙Ba?ElI解析：从图谱中可发现有链状 DNA环状DNA,用ECORI酶切割后DNA的长度不变，此DNA应 该为环斗用 Kpnl酶单独酶切后得到 400 bp和600 bp两种长度的DNA,因此DNA应该存 在两个Kpnl酶的切割位点。答案：D6 .基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒 ，便于重组和筛选。已知限制酶I的 识别序列和切点是一 G GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是一 GATC-。根据图判断下列 操作正确的是（）注:Gene和CkneH表示两种标记基因 Q表示限制醒仅有的识别序列放大A.目的基因和质粒均用限制酶n切割B.目的基因和质粒均用限制酶I切割C.质粒用限制酶n切割，目的基因用限制酶I切割D.质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶n切割解析：因为目的基因要切下，质粒只要切开，酶n识别序列和切点是一 gatc-,单独使用时可 以把目的基因和质粒都切断，而且会把两个标记基因都切开，限制酶I的识别序列和切点是一GGATCC ,只能把它们切开，单独使用时不能切下，所以切目的基因用限制酶II切割，质粒用限制酶I切割。答案：D7 .下列关于E- coli DNA连接酶的叙述，正确的是（）催化相同黏性末端的 DNA片段之间的连接催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成催化两个核甘酸之间的磷酸二酯键的形成A.B.C.D.解析：在DNAt组技术中，两个DN/#段间必须有相同黏性末端才能互补配对，进行Z合；具有相同黏性末端的 DNA分子连接时，E coli DNA连接酶的作用是催化两个核甘酸之间的磷酸 二酯键的形成，即把“梯子”的“扶手”缝合起来。答案：D8 .下列T4DNM段能够用DNA连接酶连接起来的是（）GCCG G-TGCA C GT-CA-CTGCAG GG-CG-G CTTAAA.和B.和C.和D.和解析：T4DNA1接酶既能连接平末端,也能连接黏性末端,图的黏性末端不互补,不能连 接起来，图中只有是相同的平末端。答案：A9 .能催化磷酸二酯键形成的酶有 （）E-coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶RNA聚合酶 DNA酶限制酶A.B.C.D.解析：DNA连接酶和 DNA聚合酶都能催化形成磷酸二酯键，不同之处是 DNA连接酶连接的是DN*段，而DNAm合酶连接的是单个脱氧核甘酸，将单个脱氧核甘酸连接形成与模板链互补的单链；RNA聚合酶也可催化磷酸二酯键的形成，在转录过程中可将游离核糖核甘酸连接形成RNA解旋酶的彳用是将 DNA两条链的氢键解开。DNAB和限制酶都是催化磷酸二酯键的断裂。答案：CAATC I I I I I I =C-T 一丁/A-G110 .某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的 叙述，不正确的是（）A.获取基因a的限制酶的作用部位是上图中的B.连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的C.基因a可在马铃薯细胞中稳定存在并表达D.基因a进入马铃薯细胞后，可随马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞 解析：为氢键，为磷酸二酯键，DNA连接酶和限制酶都是作用于磷酸二酯键，不能作用于氢键。答案：B11 .质粒是基因工程常用的载体，它的特点是（）能自主复制不能复制结构简单常有一个至多个限制酶切割位点，可供外源DNA1入其中双链环状DNA常含有标记基因基本组成单位是核糖核甘酸A.B.C.D.解析：在基因工程中，通常用质粒作为载体。质粒是裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并能自主复制的双链环状 DNA分子，其基本组成单位是脱氧核甘酸。在质粒上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入其中，另外质粒上还有标记基因，如四环素抗性基 因等。答案：A12 .以动植物病毒作为目的基因的载体进行转基因操作，有关说法错误的是()A.作为基因工程载体的动植物病毒一定为DNA病毒B.操作过程需要限制酶和 DNA1接酶C.目的基因和病毒 DNAt拼接成重组DNAD.进入受体细胞的是含蛋白质外壳的动植物病毒，而不是裸露的重组 DNA解析：病毒感染宿主细胞时，进入宿主细胞的是病毒的核酸 ，蛋白质外壳留在外面不起作用。答案：D13.下图为DN册子的切割和连接过程。1切此位点IGATTCI|双铸新开EJ IAATTCI回 IAATTCIIC TTAAJ E3“不同来源的口 NA片段结合E3 1AATTCICTT向冉I EDNA分子的切割和连接EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割结果产生的 DNA片段末端形式为。(2)不同来源的 DNA片段结合，在这里需要的酶应是 ，此酶的作用是在 与 之间形成 键，而起“缝合”作用的。其中能连接平末端的连接酶是 。解析：EcoRI是一种限制酶，从图中可以看出其识别序列是GAATTC切割位点是鸟喋吟脱氧核甘酸和腺喋吟脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键。切割后产生的DNA末端形式为黏性末端。要将不同来源的DN/#段连接起来，需要DNAt接酶，其作用是形成磷酸二酯键而将两DN*段“缝合”起来。T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端，也可以“缝合”平末端。答案：(1)限制性核酸内切(限制)GAATTC鸟喋吟脱氧核甘酸腺喋吟脱氧核甘酸磷酸二酯黏性末端(2) E- coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶 鸟喋吟脱氧核甘酸腺喋吟脱氧核甘酸 磷酸二酯 T4 DNA连接酶 14.根据基因工程的有关知识，回答下列问题。(1)限制酶切割DN肪子后产生的片段，其末端类型有 和。(2)质粒用EcoR I切割后产生的片段如下：AATTC-GG CTTAA为使载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性 内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。 实际操作中,往往用EcoRI和另一种限制性内切酶同日分别切割质粒和外源DN心子,其优点在于可防止。（4）按其来源不同，基因工程中所使用的 DNA1接酶有两类，即 DNA1接酶和 DNA连接酶。（5）基因工程中除质粒外,和 也可作为载体。解析：（1）DNA分子经限制酶切割产生的 DNM段末端通常有两种形式,即黏性末端和平末端。（2）若用不同的酶切割目的基因 ，形成的末端一定要与 EcoRI切割载体产生的末端相同 ，这 样才能互补连接。（4）根据酶的来源，可将DNA!接酶分为E coli DNA1接酶和T4DNA1接 酶两类。（5）基因工程中常用的载体有质粒、入噬菌体的衍生物和动植物病毒等。答案：（1）黏性末端 平末端 （2）切割产生的DNA片段末端与 EcoRI切割产生的相同 （3） 质粒和含目的基因的外源 DNA片段自身环化 （4）Ecoli T4 （5）动植物病毒 入噬菌体 的衍生物