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动物驱虫试验及其效果评定驱虫是寄生虫病防治的重要措施,通常是指用药物将寄生于动物体内外的寄生虫杀灭或驱除。这种 措施具有双重意义:一是在宿主体内或体表驱除或杀灭寄生虫,使宿主得到康复;另一方面,杀灭寄生 虫就是减少病原体向自然界的散布,也就是对健康动物的保护或预防。驱虫可分为治疗性驱虫和预防性 驱虫两种类型。治疗性驱虫指当动物感染寄生虫之后出现明显的临床症状时要及时用特效驱虫药对患病 动物进行治疗。预防性驱虫指按照寄生虫病的流行规律,定时投药,而不论其发病与否。防治蠕虫病常 采用定期预防性驱虫,防治球虫病常采用长期给药预防。通常在选择用药或实施大规模驱虫之前都要对 动物进行驱虫试验。一、实验目的及要求熟悉动物驱虫试验的方法步骤,掌握驱虫试验的效果评定方法。二、实验器材(一)实验材料1. 试验动物:猪、羊、牛等。(二)实验用具1. 容器:盆、盘、不同容量的玻璃缸、平皿、量杯2. 工具:刀、小解剖刀、标本针、镊子、解剖针3. 显微镜,手提放大镜4. 载玻片、盖玻片、麦氏计算室5. 放蠕虫的试管和其他容器6. 小标本瓶7. 注射器(三)药品1. 伊维菌素针剂:伊维菌素注射液2. 0.85%生理盐水3. 饱和盐水(四)其它1. 棉花和纱布2. 毛巾、肥皂3. 普通水4. 铅笔、记号笔三、实验方法、步骤和操作要领(一)动物的分组选择性别相同、体重相近的试验动物20头,经粪便检查自然感染线虫。将试验动物随机分成二组, 每组10只,使每组之间体重大致相当。(二)驱虫前检查投药前12天,每天逐头两次收集粪便,混匀,采用饱和盐水漂浮法检查试验动物感染数,用麦 克马斯特法检查各组每头试验动物粪便中虫卵的数量,计算每克粪便中线虫虫卵的数量(EPG)。(三)投药第一组按0.3ml/10kg体重注射1%伊维菌素。第二组为对照组。(四)驱虫后检查1. 观察试验动物的饮食欲、精神状况和粪便状况等。2. 用药后35天,将所排出的粪便用粪兜全部收集起来,进行水洗沉淀,计算并鉴定驱出虫体的 数量和种类。3. 用药后第6天,剖检各组中一半试验动物,收集并计算残留在试验动物体内各种线虫的数量, 鉴定其种类。4. 其它试验动物在用药1520天后,每天逐头两次收集粪便,混匀,采用饱和盐水漂浮法检查试 验动物感染数,用麦克马斯特法检查各组每头试验动物粪便中虫卵的数量,计算每克粪便中线虫虫卵的 数量(EPG)。(五)驱虫效果的判定采用虫卵减少率、虫卵消失率、精计驱虫率和粗计驱虫率几种指标来判定驱虫效果。驱虫试验的结 果可按下表(表24-1和表24-2)处理。虫卵减少率()=(驱虫前平均虫卵数/g 驱虫后平均虫卵数/g)宁驱虫前平均虫卵数/gX100% 虫卵消失率()=(驱虫前动物感染数一驱虫后动物感染数)宁驱虫前动物感染数X100% 精计驱虫率()=驱出虫数宁(驱出虫数+残留虫数)X100%粗计驱虫率(%)=对照动物荷虫总数一驱虫后试验动物(体)内残留活虫数宁对照动物荷虫总 数 X100%。表24-1试验动物粪便中虫卵变化检查项目伊维菌素亍处理组对照组驱虫前驱虫后20天驱虫前驱虫后20天阳性动物头数阴性动物头数克粪便虫卵数虫卵转阴率虫卵减少率注:“”为无数据表24-2驱出虫数与体内残留虫数检查项目伊维菌素处理组对照组驱出虫数残留虫数精计驱虫率粗计驱虫率(六)驱虫试验实例1材料和方法(1)实验药物。1%伊维菌素注射液,1%阿维菌素注射液。(2)实验动物。猪,21头,系某养殖场饲养,经检验自然感染线虫。(3)实验方法。 分组和投药。第一组7头(1头育肥猪,3头哺乳猪,3头怀孕母猪),注射1%阿维菌素0.3mL/10kg 体重。第二组7头(4头哺乳猪,3头怀孕母猪),注射1%伊维菌素0.3mL/10kg体重。第三组7头,对 照组。 驱虫效果观察。实验过程中观察猪的饮食欲、精神状况和粪便状况等,用药前1天、用药后1 15天,每天逐头两次收集粪便,混匀,用沉淀法检查体内线虫的排出情况,用麦克马斯特法检查各组 每头猪粪便中虫卵的数量,计算每克粪便中线虫虫卵的数量(EPG)和虫卵减少率,用饱和盐水漂浮法 检查每组每头猪粪便中虫卵的有无,计算虫卵转阴率,公式如下:虫卵转阴率()=驱虫后虫卵转阴猪头数宁驱虫前虫卵阳性猪头数X100%虫卵减少率()=(驱虫前EPG驱虫后EPG)宁驱虫前EPGX100%2. 试验结果。(1)阿维菌素实验组,在驱虫前平均的EPG为132,在注射阿维菌素后第9天,麦克马斯特法检 查未发现虫卵,饱和盐水漂浮法检查,粪便中无线虫虫卵检出,虫卵转阴率为100%,虫卵减少率为100%(见表 24-3)。表24-3不同时间猪粪便中虫卵变化检查项目处理组对照组阿维菌素伊维菌素驱虫前驱虫后9天驱虫前驱虫后9天驱虫前驱虫后9天阳性猪头数707077阴性猪头数070700克粪便虫卵1320970115121虫卵转阴率一100%一100%一0虫卵减少率一100%一100%一4%注:“一”为无数据(2)伊维菌素实验组,在驱虫前平均的EPG为97,在注射伊维菌素后第9天,麦克马斯特法检 查未发现虫卵,饱和盐水漂浮法检查,也未发现虫卵,虫卵转阴率为100%,虫卵减少率为100% (见 表 24-3)。(3)对照组,在驱虫前EPG为115,第9天后阳性猪头数为7头,平均EPG为121,虫卵转阴率 为0,虫卵减少率为-4% (见表24-3)。(4)实验组在使用阿维菌素和伊维菌素后,第一天猪就有虫体排出,24天为排虫高峰,第7天 后无虫体排出,对照组在此时间内无虫体排出(见图24-1)。EPG在两种药物驱虫后第4天明显减少, 第9天后无虫卵排出,对照组虫卵变化不明显(见图24-2)。35时间(天)阿维菌素伊维菌素对照组个数体虫出排图24-1虫体排出数和时间关系图00123456789时间(天)阿维菌素口伊维菌素对照组图24-2虫卵(EPG)和时间变化关系图(5)根据粪便检查中发现的虫卵特点和排出的虫体,初步确定本群猪感染的线虫主要为蛔虫、食 道口线虫和鞭虫,并且为混合感染。四、实验注意事项(一)选准驱虫时机对于定期驱虫而言,驱虫效果的好坏与驱虫时机选择的合适与否密切相关。驱虫的具体日期,应根 据各种蠕虫的发育史,尤其是在宿主体内发育至成熟的时间,感染的季节动态等来决定,如条件允许选 择在“成熟前驱虫”最好。因为这样可以在产卵之前驱除虫体而彻底消灭病原。一般对仔猪蛔虫可于2.53月龄和5月龄各进行一次驱虫,对犊牛、羔羊的绦虫,应于当年开始放牧后的1个月内即进行 驱虫。(二)确定驱虫对象1根据寄生虫病流行病学资料,同时结合临床症状,抽检一定数量的病畜,以了解群体中寄生虫 病感染率及感染强度,然后做出决定;2.根据动物体质的强弱,有无其他严重疾病以及怀孕与否等情况来定。一般对于有严重疾病或正 处在高热期的患畜,先进行适当的处理,待好转以后再进行驱虫。孕畜在怀孕期间不能驱虫的,应加强 管理,于适当时期补行驱虫。对多宿主寄生虫而言,所有带虫动物均应同时驱虫,如肝片吸虫寄生于牛 羊,在给牛驱虫的同时,应将附近的羊进行驱虫。(三)驱虫动物的管理最主要的是在投药后排虫期间的管理,在排虫期间应设法控制所有动物排出的成虫、幼虫或虫卵的 散布,并加以杀灭。1. 一般在动物驱虫后5天内,应集中管理,将所排出的粪便及时清扫,利用堆积发酵的办法杀死 粪便内的寄生虫。2. 5天后应把驱虫动物驻留过的场地彻底清扫、消毒,以消灭残留的寄生虫。3. 在驱虫期间应加强对动物的看管和必要的护理,供给充足的清洁饮水,注意适当的运动,如发 现较重的副作用或中毒现象应及时抢救。4. 役畜在驱虫期间最好停止使役。五、实验报告1. 动物驱虫试验的操作要领是哪些?2. 根据驱虫效果的判定指标,确定本次试验的驱虫效果。附:参考资料1. 几种动物的估重法。体测估重计算公式:黄牛体重(kg)二胸围2X体斜长(cm)宁10800水牛体重(kg)二胸围2X体斜长(cm)宁12700成年猪体量(kg)二胸围2X体长(cm)= 14085胸围是从肩胛后围绕胸廓一周的长度,体斜长是从肩端到坐骨端的直线长度,两侧同时测量取其平 均值,体长指从猪两耳根连线的中点,沿背脊线到尾根的距离。2. 驱虫药物的选择标准。驱虫药种类很多,应合理选择,正确应用,以便更好地发挥药物的作用。 广谱、高效、安全、投药方便、价格低廉、无残留、不易产生耐药性、药源丰富等条件是衡量抗寄生虫 药物临床价值的标准,也是驱虫药物的选择标准。(1)广谱。是指驱虫范围广。在生产上各种动物往往受到多种寄生虫的感染,仅对某种或某一类 寄生虫有特效的驱虫药已不能满足生产发展的要求,因此要注意选择广谱驱虫药或采取两种以上驱虫药 的复合疗法,以期达到一次投药即能驱除多种寄生虫的目的。如害获灭既能驱除蜱螨等外寄生虫,又能 驱除消化道线虫;硝氯酚与左咪唑的复合疗法可以驱除牛的胃肠道线虫、肺线虫和肝片吸虫;伊维菌素 对线虫和体外寄生虫均有效。(2)高效。良好的驱虫药应该是使用小剂量即能达到满意的驱虫效果。所谓高效的驱虫药即对成 虫、幼虫,甚至虫卵都有很好的驱杀作用,且使用剂量小。一般来说,其虫卵减少率应达95%以上,若 小于70%则属较差;使用剂量应小于10mg/kg,若应用剂量太大,给使用带来不便,推广困难。(3)低毒。抗蠕虫药应该对虫体有强大的驱杀作用,而对宿主无毒性或毒性很小。安全范围大小 的衡量标准是化疗指数半数致死量(LD)/半数有效量(ED),化疗指数越大,表示药物对有机体5050的毒性愈小,愈安全。一般认为化疗指数必须大于3,才有临床应用意义。(4)投药方便。驱虫药应无味或无特殊气味,又能溶于水,这样可通过饮水、混饲或喷雾给药。 可以节约人力、物力,提高工作效率。(5)价格低廉。畜禽属经济动物,在防治寄生虫病时,必然要考虑到经济核算问题,尤其是在牧 区和集约化养殖场,牲畜多,用药量大,应有较低廉的价格。
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