文件名称：注射用酚磺乙胺检验标准操作规程文件编号： ZJ-OS-087-01起 草 人：审 核 人：批 准 人：起草部门：质检部起草日期：审核日期：批准日期：生效日期：颁发部门：办公室分发部门（岗位）：档案室 办公室 质保部 生产部 质检部 采供部 销售部 用药安全部 岗位 复印数量：变更记载和变更原因及目的见附录注射用酚磺乙胺检验标准操作规程1、 适用范围本标准适用于注射用酚磺乙胺的检测。2、 职责质保部经理、原辅料检测人员、理化检测人员、仪器分析人员、生物检测人员、微生物检测人员、仪器分析人员3、 引用标准国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH059920044、 内容4.1 仪器与用具4.1.1 pH计、全封闭无菌检测系统、水浴锅、水分测定仪、高效液相色谱仪4.1.2 十八烷基硅烷键合硅胶柱、比浊管、全封闭集菌培养器、灯检台、移液管、烧瓶、容量瓶4.2 试药与试液4.2.1 磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺、甲醇、费休氏试液4.2.2 灵敏度为0.25EU/ml鲎试剂、细菌内毒素工作标准品4.2.3 酚磺乙胺对照品、氢醌对照品4.3 操作方法4.3.1 性状取本品5瓶，用肉眼观察，结果：为白色或类白色的疏松块状物。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.2 鉴别4.3.2.1 取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺0.1g），置一小试管中，加水2ml溶解后，加三氯化铁试液13滴，即显蓝色；放置后渐退成较浅的蓝紫色。4.3.2.2 取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺0.1g），置一小试管中，加氢氧化钠试液5ml，加热即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。4.3.2.3 取含量测定项下的供试品溶液及对照品溶液各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液的保留时间相一致。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.3 酸度取本品2瓶，分别加水5ml使溶解，依法测定（附录H），pH值应为5.07.0。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。 4.3.4 溶液的澄清度与颜色取本品5瓶，分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液(附录 B)比较，不得更浓；如显色，与黄色1号标准比色液(附录 A第一法)比较，不得更深。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.5 有关物质取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺30mg），精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取上述溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（1）；另取氢醌对照品约30mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得到含氢醌1.2mg/ml的溶液；再精密量取0.1ml于100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到含氢醌1.2g/ml的溶液，作为对照溶液（2）。照含量测定项下色谱条件，精密量取对照溶液（1）20l注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分的峰高为满量程的15%20%，再精密量取供试品溶液及对照溶液（2）各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主成分峰的保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中出现与对照溶液（2）相应的氢醌峰，按外标法以峰面积计算，含氢醌不得过酚磺乙胺标示量的0.02%；如出现其它杂质峰，量取除氢醌峰外的各杂质峰面积之和与对照溶液主峰面积比较，应不得过0.1%，实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.6 干燥失重取本品约1.0g，在105干燥至恒重，减失重量不得过2.0%(附录L)。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.7 细菌内毒素取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺62.5mg），精密称定，用1ml无热原水溶解，得到含酚磺乙胺为62.5 mg/ml的溶液，用无热原水稀释100倍（稀释方法：0.1ml0.9ml0.1ml0.9ml），依法检验(附录E)，结果：每1mg酚磺乙胺中含内毒素的量应小于0.40EU。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.8 无菌取本品20瓶，分别加入20ml灭菌注射用水中使溶解，用薄膜过滤法处理后，依法检验(附录H)，应符合规定。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.9 装量差异取本品5瓶，依法检查(附录XF)，应符合规定。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.10 可见异物取本品5瓶，依法检查(附录IXH)，应符合规定。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.11 不溶性微粒取本品4瓶，按光阻法检查 (附录 C)，应符合规定。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。4.3.12 含量测定 照高效液相色谱法（附录VD），依法测定。4.3.12.1 色谱条件与系统适用性试验 用氨基键合硅胶为填充剂，以0.2%磷酸二氢钾溶液甲醇（900：100）为流动相，检测波长为223nm。理论板数按酚磺乙胺峰计算应不低于2000。4.3.12.2 测定法 取装量差异项下的内容物适量（约相当于酚磺乙胺25mg），精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为供试品溶液；另取酚磺乙胺对照品约25mg，加流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为对照品溶液，分别量取上述溶液各20l，注入液相色谱仪中，记录色谱图，色谱图见反面，按外标法以峰面积计算，实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-*)。5、 相关记录批检验记录审核通知单成品检验报告单外观（性状）检验原始记录鉴别检验原始记录pH（酸碱度）原始记录溶液的澄清度与颜色检验原始记录有关物质（高效液相色谱法）检验原始记录干燥失重检验原始记录细菌内毒素（鲎试剂法）检验原始记录无菌试验（滤膜过滤法）检验原始记录装量差异检验原始记录可见异物检验原始记录不溶性微粒（光阻法）检验原始记录含量（高效液相色谱法）检验原始记录附录：变更记载：版本号 批准日期 执行日期变更原因及目的010203编号：ZJR XXX01 起草人： 审核人： 日期： 江苏金丝利药业有限公司鉴别检验原始记录样品背景：样品名称： 批 号： 规 格： 取样日期： 检验日期： 检验依据：检验记录：（1）取本品内容物（约相当于酚磺乙胺0.1g） g，置一小试管中，加水2ml溶解后，加三氯化铁试液13滴，结果 。 （2）取本品内容物（约相当于酚磺乙胺0.1g） g，置一小试管中，加氢氧化钠试液5ml，加热后，结果 。 （3）精密称定本品内容物（约相当于酚磺乙胺25mg） mg，用流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为供试品溶液；另取酚磺乙胺对照品 mg，加流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为对照品溶液，分别量取上述溶液各20l，注入液相色谱仪中，记录色谱图，色谱图见含量测定原始记录，结果 。结论：检验人： 复核人： 报告日期：编号：ZJR XXX01 起草人： 审核人： 日期： 江苏金丝利药业有限公司有关物质（高效液相色谱法）检验原始记录样品背景：样品名称： 批 号： 规 格： 取样日期： 检验日期： 检验依据：检验记录：填充剂：氨基键合硅胶检测波长：223nm流动相：0.2%的磷酸二氢钾溶液/甲醇900/100 上样体积：20l 采样时间：30min 流速：0.8 ml/min供试品溶液配制：取样品内容物（约相当于酚磺乙胺30mg），精密称定，W样 mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得到含酚磺乙胺0.6mg/ml的溶液。对照溶液（1）：精密量取供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到含酚磺乙胺0.006mg/ml的溶液。对照溶液（2）：精密称取氢醌对照品W对mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得到含氢醌1.2mg/ml的溶液；再精密量取0.1ml于100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到含氢醌1.2g/ml的溶液。分别精密量取供试品溶液、对照溶液（1），对照溶液（2）各20l，注入液相色谱仪中，量取峰面积后，用外标法计算供试品中氢醌和其它杂质的含量。检测结果：氢醌百分含量W对A样（氢醌）50平均装量（g） 100% A对2（氢醌）251000W样标示量（g）其它杂质百分含量A样（杂质）0.006 100% A对1（主峰）0.6结论：检验人： 复核人： 报告日期：编号：ZJR XXX01 起草人： 审核人： 日期： 江苏金丝利药业有限公司含量（高效液相色谱法）检验原始记录样品背景：样品名称： 批 号： 规 格： 取样日期： 检验日期： 检验依据：检验记录：填充剂：氨基键合硅胶 柱编号 流动相：以0.2%磷酸二氢钾溶液-甲醇（900:100）为流动相，配制方法为取磷酸二氢钾