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成肌细胞是骨骼肌的前体细胞,是一种正常情况下位于成熟肌纤维表面的肌源性细胞具有很强的增殖和分化能力。小鼠成肌细胞系C2C12细胞由Yaffe等83克隆建立,体外培养的C2C12细胞能在低血清诱导条件下分化为多核的肌管,并表达myosin和myogenin等成熟骨骼肌的各种标志蛋白。因此,C2C12细胞通常成为体外研究成肌细胞增殖和分化的首选模型。C2C12细胞的生长特性相差倒置显微镜下,刚传代的C2C12细胞呈球形或椭圆形,有折光性,30min后开始贴壁,8h后贴壁完全。贴壁后的C2C12细胞呈梭形,单核,位于细胞中央。起始4.0X104了个细胞接种于直径为35mm的细胞培养皿,3d后达80%左右汇合,4d后几乎占据培养皿所有细胞生长表面,继续培养则相邻细胞变长并相互融合,肌小管形成增多。80%)待细胞在完全生长培养液(DMEM/10%FBS/S/P)生长至80%左右汇合时,换成分化培养液(DMEM/2%HSISJP)后,大量细胞开始融合成肌管,分化培养3d后,肌管大量形成,之后肌管进一步增长增粗。
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