ADVIA2120全自动血细胞分析仪测定网织红细胞的评价摘要:目的对ADVIA2120全自动血细胞分析仪测定网织红细胞的性能进展评价。方法用ADVIA2120全自动血细胞分析仪测定高、中、低值网织红细胞样本，进展重复性、携带污染率及稳定性测试，并与手工计数结果比较。取高值样本在技术指标范围内按比例稀释后测定各浓度，进展线性评价。结果重复性:低值指标高核酸浓度网织红细胞比率V值较大13.82%17.4%，其它各项指标的V均8.19%;线性r=0.9989;稳定性显示，4低温24h内网织红细胞百分率计数V为3.8%;携带污染率为0.22%;与手工法百分率结果比较，相关性好r=0.9962，差异无统计学意义P0.05。结论ADVIA2120全自动血细胞分析仪测定网织红细胞携带污染率低、重复性、稳定性、线性好，能满足临床需要，可替代手工计数，但不能区分疟原虫感染引起的干扰。关键词:网织红细胞;全自动血细胞分析仪;疟原虫EvaluatinfperfranefADVIA2120bld-untersystefrdetetinfretiulytes.Abstrat:bjetiveTevaluatetheperfranefADVIA2120frthetestfretiulytes.ethdsADVIA2120asusedfrdetetinfhigh/nral/lretiulytesaplesandthereprduibility，theratefarryingntainatinandstabilityerebserved.Theresultsereparedithanualethd.ResultsReprduibility:exeptthattheVfhighnulEiaidas13.82%17.4%，theVfthetherindexesaslessthan8.19%;linearty:r=0.9979;stability:perentageVfRetat4in24has3.8%;theratefarryingntainatinas0.22%;parediththeanualethds:r=0.9962，P0.05.nlusinThesratefarryingntainatinbyusingADVIA2120bld-untersysteintestfretiulytesisl，stableandshinganielinearrrelatinsuitablefrlinialuse.Keyrds:Retiulytes;Autatibld-untersyste;Plasdiu网织红细胞Retiulytes，Ret传统的人工测定烦琐而费时，准确性受操作人员的经历、程度、细胞计数量、染色效果及涂片质量等因素影响大，重复性也差。全自动血细胞分析仪测定网织红细胞应用逐渐增多，因临床应用时间不长，其性能尚有待观察。ADVIA2120全自动血细胞分析仪是拜耳公司新推出的五分类机型，装备全自动网织红细胞分析功能，可提供14项相关参数，因部份指标临床意义尚无确论，故本文仅选择6项与细胞数量相关的指标进展评价。现进展重复性、线性、携带污染率、稳定性测试，并与手工百分率分类结果进展比较，报道如下。1资料与方法1.1资料1.1.1标本来源住院患者，网织红细胞按仪器初步测量结果分为高、中、低三类。1.1.2设备美国ADVIA2120全自动血细胞分析仪、日本LYPUSBX-60多功能光学显微镜、上海医疗设备厂HH-21-600电热恒温水育箱、姜堰康健医疗器具KJR-1摇匀器。1.1.3ADVIA2120全自动血细胞分析仪原装配套试剂及全血质控品批号0605204;珠海贝索公司网织红细胞染液和瑞氏染液，按试剂使用说明操作。广州阳普公司EDTA-K2血常规抗凝管批号0602022。1.2方法按相关评价原那么，ADVIA2120全自动血细胞分析仪重复测定样本，评价仪器日内精细度、日间精细度、线性、携带污染率和稳定性，测定前摇匀器正、反向摇动3in。1.2.1日内精细度按美国临床实验室标准化委员会N-LS制定的方案1，选择本院住院患者血样，网织红细胞按仪器初步测量结果分为高、中、低三类，各1份，每份重复测定10次，并计算平均值x和变异系数V。1.2.2日间精细度因临床血标本稳定性差，故以原厂全血质控品每日9:00、12:00、16:30测定三次，取均值，连续测定10d，并计算平均值x和变异系数V。1.2.3线性评价按美国临床实验室标准化委员会NLS制定的线性验证方案EP6-A2，选择一份网织红细胞细胞高值样本，在技术指标范围内做比例稀释，仪器测定各浓度2次，取均值，所得数据进展回归分析。1.2.4携带污染率按国际血液学标准化委员会制定的程序3，将高值样本连续测定3次H1、H2、H3，紧接着连续测定低值样本3次L1、L2、L3，携带污染率结果为L1L3/H3-L1100%。1.2.5稳定性试验因血样皆为低温保存，考虑温度为主要影响因素。取一份血样分为3管，放置于4冰箱。分别于0in、15in、30in、45in、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、24h、48h、72h每个时间点测定3次，取均值。1.2.6相关性评价按NLSH20-A14文件，将30份标本制作3张血片，2名有经历的主管技师随机各选一张，双盲法计数网织红细胞百分率5，取均值后与仪器测定结果进展相关性比较。1.3统计学处理采用SPSS10.0统计软件进展配对t检验和回归分析。2结果2.1日内精细度测试高值工程日内精细度较好，低值工程高核酸浓度网织红细胞比率%日内精细度偏大。见表1。表1ADVIA2120网织红细胞测定日内精细度略2.2日间精细度测试高值工程日间精细度较好，低值工程高核酸浓度网织红细胞比率%日精细度偏大。见表2。表2ADVIA2120网织红细胞测定日间精细度略2.3线性评价初始计数为0.381012/L的样本按比例稀释后理论结果为0.304、0.228、0.152、0.076、0.0381012/L，实际测定结果为0.298、0.231、0.148、0.063、0.0331012/L，得回归曲线y=1.0225x-0.0086，相关系数r为0.9989，P0.05。见图12.4携带污染率高值样本3次测定结果分别为H1=0.641012/L、H2=0.671012/L、H3=0.651012/L，低值样本3次测定结果分别为L1=0.031012/L、L2=0.031012/L、L3=0.021012/L，携带污染率0.22%。稳定性试验:4冷藏后测定，百分率结果均值分别为6.42%0in、6.18%15in、6.27%30in、6.19%45in、6.33%1h、6.22%2h、6.34%3h、6.28%4h、6.21%5h、6.35%6h、6.37%7h、6.25%24h、5.68%48h、5.21%72h，结果显示24h内网织红细胞百分率变化无统计学意义P0.05，48h后网织红细胞百分率降低，变化有统计学意义P0.05，1d内网织红细胞百分率V1.3%，24h内网织红细胞百分率V3.8%。相关性评价:AD-VIA2120全自动血细胞分析仪网织红细胞细胞百分率测定与手工涂片分类法百分率结果的相关性好r=0.9962，图2，配对t检验差异无统计学意义P0.05。图1ADVIA2120全自动血细胞分析仪网织红细胞线性评估略图2网织红细胞ADVIA2120测定与手工法测定相关性略3讨论网织红细胞测定在各种贫血的鉴别诊断、疗效观察、肿瘤患者放、化疗后骨髓造血功能评估等有着重要的临床意义，及时、准确的网织红细胞测定有利于动态理解骨髓红系增生情况。ADVIA2120全自动血细胞分析仪网织红细胞测定原理是先用戊二醛和十二烷基硫酸钠将红细胞球形化并固定，氧氮杂芑750使RNA染蓝色，着色程度与RNA含量成正比，细胞通过FLELL在激光照射下产生散射，应用IE原理，得到网织红细胞的14项测量参数和计算参数，因对网织红细胞血红蛋白浓度分布宽度、血红蛋白含量分布宽度等指标临床意义尚无确论，故仅选择6项与细胞数量相关指标进展评价。从结果看，ADVIA2120全自动血细胞分析仪网织红细胞测定具有良好的精细度，除高核酸浓度网织红细胞比率因计数值较低，故v值在日内和日间偏大外13.82%17.4%，其它工程v值在1.18%8.19%之间，处于理想范围之内。稳定性测试说明424h内网织红细胞百分率结果稳定，结果的差异无统计学意义P0.05，V3.8%，48h后网织红细胞百分率降低。低温虽能减缓红细胞新陈代谢，但网织红细胞向成熟红细胞的转化未完全停顿，时间过长导致RNA降低的比率增高并出现统计学意义P0.05。仪器线性良好r=0.9989，P0.05，图1，携带污染率低0.22%，到达临床应用要求。与手工法的百分率结果比较相关性佳r=0.9962，P0.05，图2，考虑到仪器法检测细胞数量大，可有效防止细胞在血片分布上的统计学误差，特别是低值测量结果，因此仪器法应更为理想。临床应用中遇1例疟疾患者样本，入院仪器查血色素68g/L，RB2.231012/L，网织红细胞计数0.321012/L，网织红细胞百分率14.35%，经外周血片瑞氏染色，感染虫体之RB为10.3%计数1000个RB，抗疟治疗3周后查血色素85g/L，RB3.031012/L，网织红细胞计数0.081012/L，网织红细胞百分率2.64%，外周血片瑞氏染色未查见虫体和受染RB。文献报道受疟原虫感染的RB中RNA含量是增加的6，那受染RB在RNA增高时是否归为网织红及RNA不高时如何区分那么缺乏妥善的处理方法。在手工煌焦油蓝活体染色、ADVIA2120的氧氮杂芑750染色及sysex2100的荧光染色不能分辨的情况下，对疟疾血样做外周血片瑞氏染色，计数受染细胞比例，可大致断定干扰程度。总体而言，ADVIA2120全自动血细胞分析仪网织红细胞测定防止了传统手工法的诸多缺点，如肉眼判读的主观性、细胞的分布误差、检测的低效率等问题，在全血分析时可根据情况随时选择加做网织红分析，无需再取血样，其便利性和高效性是手工法无可比较的，加之重复性、稳定性、准确性及携带污染率各指标均符合临床应用要求，在有条件的医院全自动仪器法测定网织红细胞是很好的选择。参考文献:1EvaluatinftheLinearityfQuantitativeeasureentPredures:ASta-tistialApprah;ApprvedGuideline.NLSduentEP9-A2，2002.2EvaluatinftheLinearityfQuantitativeeasureentPredures:ASta-tistialApprah;ApprvedGuideline.NLSduentEP6-A.Vl.23，2022.3Prtlfrevaluatinfautatedheatlgyanalyzer.ISH.linLabHeatal，1984，6:69.4RefereneleukytedifferentialuntPrprtinalandevaluatinfin-struentethds，NLSduentH20-A，vl12，1992.5叶应妩，王毓三，主编.临床检验操作规程.第2版.南京:东南大学出版社，1997.6曾素根，贾永前，周静等.红细胞内疟原虫对仪器法检测网织红细胞的影响.中华检验医学杂志，2022，9:964.