天然水中油类的紫外分光光度法测定发布时间： 2008-12-04 来源：生物网 文章标签： 生物论坛 研究发现恐龙家族 1850种有 71%未被发现（ 蝎 铁蛋白 ferritin天然水中油类的紫外分光光度法测定一、实验目的加深对环境中油类污染的认识， 掌握油类的分析方法和技术， 学会使用紫外 分光光度计。二、实验原理水中的油类来自较高级生物或浮游生物的分解， 也有来自工业废水和生活污 水的污染。 漂浮于水体表面的油， 影响空气水体界面中氧的交换。 分散于水中 的油，部分吸附于悬浮微粒上，或以乳化状态存在于水体中，部分溶于水中。水 中油可被微生物氧化分解，从而消耗水中溶解氧，使水质恶化。重量法是常用的分析方法，它不受油的品种限制，所测定的油不能区分矿物 油和动、植物油。重量法方法准确，但操作繁杂，灵敏度差，只适于测定 5mg/L 以上的油品。 紫外分光光度法比重量法简单。 石油类含有的具有共轭体系的物质 在紫外光区有特征吸收峰。带有苯环的芳香族化合物主要吸收波长微250260nm,带有共轭双键的化合物主要吸收波长为 215230nm。一般原油的两个吸 收峰波长为225及256nm,其他油品如燃料油、润滑油等的吸收峰也与原油相近。本方法测定波长选为256nm,最低检出浓度为 0.05mg/L，测定上限为10mg/L三、仪器和试剂1 紫外分光光度计（具有 1cm 石英比色皿）。2 1L 分液漏斗。3 25mL 容量瓶。4. 石油醚（6090C）或正己烷：纯化后使用，透光率大于80%。女口不纯，可用下法纯化。纯化：将0.3（0.15mm（ 60100目）粗孔微球硅胶和 0.2440.125mm（70120目）中性层析氧化铝在150160C活化4h,趁温热装入直径2.5cm 长75cm 的玻璃柱中，使硅胶柱高60cm,上面覆盖5cm厚的氧化铝层。将石油醚通过此 柱后收集于试剂瓶中。以水为参比，在 256nm处透光率应大于80%。5. 油标准贮备液：用 20号重柴油、 15号机油或其他认定的标准油品 配制。准确称取标准油品0.1000g溶于石油醚中，移至100mL容量瓶中，并用石 油醚稀释至标线，此溶液每毫升含 1.00mg油，贮于冰箱备用。6. （ 1+1 ）硫酸。7. 氯化钠。8. 无水硫酸钠（事先于马福炉 300C烘1h，冷后装瓶）。四、实验步骤1、标准曲线的绘制 把油标准贮备液用石油醚稀释为每毫升含 0.100mg 油的标准液。向8个10mL容量瓶中依次加入油标准液 0.20, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00, 5.00, 7.00, 10.00mL,用石油醚稀释至标线。其相应的浓度为2.00, 5.00, 10.00 20.0, 30.0, 50.0, 70.0, 100.0mg/L。最后，在波长 256nm处，用1cm石英比色皿，以石油醚为参比液测定标准系列的吸光度，并绘制标 准曲线。2、将水样500mL全部倾入1000mL分液漏斗中，加入5mL（ 1+1 ）硫 酸（若水样取样时已酸化，可不加）及 20g氯化钠，加塞摇匀，用15mL石油醚 洗采样瓶，并把此洗液移入分液漏斗中，充分振摇 2min （注意放气），静置分 层。把下层水样放入原采样瓶中，上层石油醚放入25mL容量瓶中，再加入10mL 石油醚，重复提取水样一次，合并提取液于容量瓶中。加石油醚至标线，摇匀。 若容量瓶里有水珠或浑浊，可加入少量无水硫酸钠脱水。3、 在波长256nm处，用1cm石英比色皿，以脱芳烃的石油醚为参比， 测定其吸光度，并在标准曲线上查出相应的浓度值。五、结果与讨论1. C油（mg/L ）= CW式中：C从标准曲线上查出的相应油浓度（mg/L ）;V被测水样体积（mL）;V2石油醚定容体积（mL）。2. 使用的石油醚应在一个较大的容器中混匀， 使用相同透光率的石油醚， 绘制标准曲线及样品测定，否则会由于空白值不同而产生误差。3. 采集的样品必须有代表性。当只测定水中乳化状态的石油时，要避开漂浮在水面的油。一般在水表面以下 2050cm处取水样。若要连同油膜一起采 样，要注意水的深度、油膜厚度及覆盖面积。4. 采样瓶应为定容的（如500或1000mL）清洁玻璃瓶，用溶剂清洗干净， 勿用肥皂洗。每次采样时，应装水至刻度线。5. 为了保存水样，采集样品之前，可向瓶里加入硫酸【每升水样加5mL（1+1）硫酸】，使水样pH V2,抑制微生物活动，于低温下（v 4C）保存。在常温下， 样品可保存 24h。如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！