-第一章 细胞根本知识1cell theory (细胞学说) 细胞学说是18381839年间由德国的植物学家施莱登和动物学家施旺所提出,直到1858年才较完善。它是关于生物有机体组成的学说，主要容有： 细胞是有机体， 一切动植物都是由单细胞发育而来， 即生物是由细胞和细胞的产物所组成； 所有细胞在构造和组成上根本相似； 新细胞是由已存在的细胞分裂而来； 生物的疾病是因为其细胞机能失常。2prokaryotic cell (原核细胞) 组成原核生物的细胞。这类细胞主要特征是没有明显可见的细胞核, 同时也没有核膜和核仁, 只有拟核，进化地位较低。由原核细胞构成的生物称为原核生物3eukaryotic cell真核细胞构成真核生物的细胞称为真核细胞，具有典型的细胞构造, 有明显的细胞核、核膜、核仁和核基质; 遗传信息量大，并且有特化的膜相构造。真核细胞的种类繁多, 既包括大量的单细胞生物和原生生物(如原生动物和一些藻类细胞), 又包括全部的多细胞生物(一切动植物)的细胞。4cell plasma (细胞质) 是细胞除核以外的原生质, 即细胞中细胞核以外和细胞膜以的原生质局部, 包括透明的粘液状的胞质溶胶及悬浮于其中的细胞器。5. protoplasm (原生质) 生活细胞中所有的生活物质, 包括细胞核和细胞质。6. protoplast (原生质体) 脱去细胞壁的细胞叫原生质体, 是一生物工程学的概念。如植物细胞和细菌(或其它有细胞壁的细胞)通过酶解使细胞壁溶解而得到的具有质膜的原生质球状体。动物细胞就相当于原生质体。7. mycoplasma (支原体) 是最简单的原核细胞，支原体的大小介于细菌与病毒之间,直径为0.10.3 um, 约为细菌的十分之一, 能够通过滤菌器。支原体形态多变,有圆形、丝状或梨形，光镜下难以看清其构造。支原体具有细胞膜，但没有细胞壁。它有一环状双螺旋DNA，没有类似细菌的核区(拟核), 能指导合成700多种蛋白质。支原体细胞中惟一可见的细胞器是核糖体，每个细胞中约有8001500个。支原体可以在培养基上培养，也能在寄主细胞中繁殖。8. archaebacteria (古细菌) 一类特殊细菌，在系统发育上既不属真核生物，也不属原核生物。它们具有原核生物的*些特征(如无细胞核及细胞器)，也有真核生物的特征(如以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感)，还具有它们独有的一些特征(如细胞壁的组成，膜脂质的类型)。因之有人认为古细菌代表由一共同祖先传来的第三界生物(古细菌，原核生物，真核生物)。它们包括酸性嗜热菌，极端嗜盐菌及甲烷微生物。可能代表了活细胞的*些最早期的形式。9. Bacteria, eubacteria (真细菌) 除古细菌以外的所有细菌均称为真细菌。最初用于表示真细菌的名词主要是为了与其他细菌相区别。10. mesosome (中膜体) 中膜体又称间体或质膜体, 是细菌细胞质膜向细胞质陷折皱形成的。每个细胞有一个或数个中膜体，其中含有细胞色素和琥珀酸脱氢酶, 为细胞提供呼吸酶, 具有类似线粒体的作用, 故又称为拟线粒体。11. centroplasm中心质在光镜下观察到的蓝藻细胞中央部位较周围原生质明亮，是遗传物质DNA所在部位，它相当于细菌的核区，成为中心质，也有称中央质。12. nucleoid (拟核) 细菌细胞具有原始的核,没有核膜,更没有核仁,构造简单,为了与真核细胞中典型的细胞核有所区别,称为核区nuclearregion)、拟核(nucleoid)或原始核primitive form nucleus，亦称细菌染色体。13. symplast (共质体) 植物原生质体间通过胞间连丝相连接，使整个植物体的原生质连成为的一个整体。2多核的合胞体。14. syncytium ; syncytia (合胞体) 含有由一层细胞膜包绕的多个核的细胞质团。通常是由于两个以上细胞发生融合或一个细胞分裂不完全所致，后者来自于核发生了分裂，而未发生细胞质分裂。15. gene theory基因学说关于基因和性状之间存在确定的因果关系的学说。主要容： 种质(基因)是连续的遗传物质； 基因是染色体上的遗传单位，有很高稳定性能自我复制和发生变异； 在个体发育中，基因在一定条件下，控制着一定的代过程,表现相应的遗传特性和特征；生物进化,主要是基因及其突变等。这是对孟德尔遗传学说的重大开展，也是这一历史时期的巨大成就。16ultrastructure (submicroscopic structure) 超微构造亚细胞构造又称为亚显微构造。指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚，但在电子显微镜下能观测到的细胞各种微细构造，如各种细胞器。第二章 细胞生物研究方法1.resolution (分辨率) 是指区分开两个质点间的最小距离。2. phase-contrast microscope相差显微镜 将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞 3. differential-interference microscope微分干预显微镜偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究活细胞中较大的细胞器4. video-enhance microscopy录像增差显微镜技术计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的运动。5. fluorescence resonance energy transfer (荧光共振能量转移) 当一个荧光分子又称为供体分子的荧光光谱与另一个荧光分子又称为受体分子 的激发光谱相重叠时， 供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光， 同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。FRET 程度与供、受体分子的空间距离严密相关， 一般为710 nm 时即可发生FRET; 随着距离延长， FRET呈显著减弱。6. fluorescence photobleaching recovery;FPR (荧光漂白恢复) 研究膜蛋白和脂质平移扩散以及溶质通过质膜和在细胞转运的一种技术。包括三个步骤：荧光染料与膜成分交联；激光照射猝灭漂白膜上局部荧光；检测猝灭部位荧光再现速率由于膜成分的流动性。7. electron microscope (电子显微镜) 一类用电子束为光源，显示标本超微构造的显微镜。分为透射电子显微镜和扫描电子显微镜等。8. transmission electron microscope;TEM 透射电子显微镜在一个高真空系统中，由电子枪发射电子束，穿过被研究的样品，经电子透镜聚焦放大，在荧光屏上显示出高度放大的物像，还可作摄片记录的一类最常见的电子显微镜。scanning electron microscope;SEM 扫描电子显微镜 是1965年创造的较现代的细胞生物学研究工具，主要是利用二次电子信号成像来观察样品的外表形态，即用极狭窄的电子束去扫描样品，通过电子束与样品的相互作用产生各种效应，其中主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品外表放大的形貌像，这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的，即使用逐点成像的方法获得放大像。扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。9. ultramicrotomy 超薄切片技术 电子书穿透力很弱，须将标本制成4050nm 的超薄切片。方法与步骤：固定；脱水；包埋；切片；染色。10. negative staining负染色技术用重金属盐对铺展在载网上的样品染色，吸取多余染料，枯燥后，使样品凹陷铺展上一层重金属盐，而凸出的地方没有染料沉积，从而负染效果；分辨率可达1.5nm 左右。与金属投影 染色背景，衬托出样品的精细构造11. freeze etching冰冻蚀刻技术 是在冰冻断裂技术的根底上开展起来的更复杂的复型技术。如果将冰冻断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的冰在真空中升华，而在外表上浮雕出细胞膜的超微构造。当大量的冰升华之后，对浮雕外表进展铂-碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料， 复型经重蒸水屡次清洗后，置于载网上作电镜观察。12. critical-point drying method临界点枯燥制作电子显微镜枯燥标本的一种方法。将标本用低临界温度液体如液态CO2替换水，再升温超过临界温度。如此处理的标本，可减小外表力，保持样品自然状态的形貌。13. electron microscope three-dimentional reconstruction technique (电镜三维重构技术) 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与*-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合，是当前构造生物学，主要研究生物大分子空间构造及其相互关系的主要实验手段。14. scanning tunnel microscope;STM扫描隧道显微镜利用量子隧道效应产生隧道电流的原理制作的显微镜。其分辨率可达原子水平，即观察到原子级的图像。在生物学中，可观察大分子和生物膜的分子构造。15. atomic force microscope ；AFM原子力显微镜 一种可用来研究包括绝缘体在的固体材料外表构造的分析仪器。它通过检测待测样品外表和一个微型力敏感元件之间的极微弱的原子间相互作用力来研究物质的外表构造及性质。将一对微弱力极端敏感的微悬臂一端固定，另一端的微小针尖接近样品，这时它将与其相互作用，作用力将使得微悬臂发生形变或运动状态发生变化。扫描样品时，利用传感器检测这些变化，就可获得作用力分布信息，从而以纳米级分辨率获得外表构造信息。根据扫描隧道显微镜的原理设计的高速拍摄三维图像的显微镜。可观察大分子在体的活动变化。16. laser scanning confocal microscope;LSCM 激光扫描共聚焦显微镜 利用激光点作为荧光的激发光并通过扫描装置对标本进展连续扫描，并通过空间共轭光阑针孔阻挡离焦平面光线而成像的一种显微镜。是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。17. immunoelectron microscopy 免疫电镜 将抗体进展特殊标记后用电子显微镜观察免疫反响的结果。根据标记方法的不同， 分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。18. immunoblotting 免疫印迹又称蛋白质印迹Western blotting，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的*种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术根底上开展起来的一种新的免疫生化技术。19. immunofluorescent technique;immunofluorescence technique 免疫荧光技术将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进展细胞定位。20. radio immuno precipitation assay;RIPA;radioimmunoprecipitation放射免疫沉淀 以放射性标记的抗原或抗体进展的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。21. differential centrifugation 差速离心利用不同物质沉降速率的差异，在不同离心速度下别离和收集不同颗粒的离心技术。常用于别离细胞匀浆中的各种细胞器。22. isodensity centrifugation;isopyic centrifugation等密度离心将要别离的样本放在密度梯度液外表或混悬于梯度液中，通过离心不同密度的颗粒或上