饲料中钙的测定方法饲料中钙含量的测定乙二胺四乙酸二钠络合滴定法1范围本方法规定了用乙二胺四乙酸二钠络合滴定法测定饲料中钙含量。本方法适用于饲料原料和饲料产品。本方法钙的最低检测限为150mg/kg（取试样1g时）。2引用标准GB/T6682-1992分析实验室用水规格和实验方法GB/T601-1988化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备3原理将试样中有机物破杯，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。4试剂实验用水应符合GB/6682中三级用水规格，使用试剂除特殊规定外均为分析纯。4.1盐酸羟胺。4.2三乙醇胺。4.3乙二胺。4.4盐酸水溶液，1+3。4.5氢氧化钾溶液（200g/L），称取20g氢氧化钾溶于100mL水中。4.6淀粉溶液（10g/L），称取1g可溶性淀粉入200mL烧杯中，加5mL水润湿，加95mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用（现用现配）。4.7孔雀石绿水溶液（1g/L）。4.8钙黄绿素-甲基百里香草酚蓝指示剂，0.10g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里香酚猷、5g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。4.9钙标准溶液（0.001g/mL），称取2.497g至105C110C干燥3h的基准物碳酸钙，溶于40mL盐酸水溶液（1+3）中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度。4.10乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液，称取3.8gEDTA入200mL烧杯中，加200mL水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水稀释刻度。4.10.1EDTA标准滴定溶液的标定，准确吸取10.0mL钙标准溶液按试样测定法进行滴定。.10.2EDTA滴定溶液对钙的滴定度按式（1）计算：T=PV/V0（1）式中：TEDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL;P钙标准溶液的质量溶度，g/mL;V所取钙准溶液的体积，mL;V0EDTA标准滴溶液的消耗体积，mL。所得结果应表示0.001g/mL。5仪器设备5.1实验室里样品粉碎机或研钵。5.2分析筛，孔径0.42mm（40目）。5.3分析夭平，感量0.0001g。5.4高温炉，电加热，可控温度在（550土20）C。5.5址柄，瓷质。5.6容量瓶，100mL。5.7滴定管，酸式，25mL或50mL。5.8玻璃漏斗，直径6cm。5.9定量滤纸，中速，7cm9cm。5.10 移液管，10,20mL。5.11 烧杯，200mL。5.12 凯氏烧瓶，250mL或500mL。6试样制备取具有代表性试样至少2kg，用四分法缩分至250g,粉碎过0.42mm孔筛，混匀，装入样品瓶中，密闭，保存备用。7操作步骤7.1试料的分解7.1.1干法称取试料2g5g于塔蜗中，精确至0.0002g,在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550C下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰塔蜗中加入10mL盐酸溶液和浓硝酸数滴，小心煮沸，将此溶液转入100mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸储水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。7.1.2湿法称取试料2g5g于250mL凯氏烧瓶中，精确至0.0002g,加入10mL硝酸，加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入10mL高氯酸，小心煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险）冷却后加蒸储水50mL,且煮沸驱逐二氧化氮，冷却后移入100mL容量瓶中，用蒸储水稀释至刻度，摇匀，为试料分解液。7.2测定准确移取试料分解液5mL25mL（含钙量2mg25mg）。加50mL水，加10mL淀粉溶液、2mL三乙醇胺、1mL乙二胺、1滴孔雀石绿，滴加氢氧化钾溶液至无色，再过量10mL,加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都须摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧火消失呈现紫红色为滴定终点。同时做空白实验。8结果计算8.1测定结果按式（2）计算：X=100TV0V2/V1m式中：X以质量分数表示的钙含量，%;TEDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL;V0试样分解液的总体积，mL;V1一分取试样分解液的体积，mL;V2试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL;m试样的质量，g。8.2结果表示每个试样取每个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，所得结果应表示至小数点后两位。9精密度含钙量10%以上，允许相对偏差2%;含钙量在5%10%时，允许要对偏差3%,含钙量1%5%时，允许相对偏差5%;含钙量1%以下，允许相对偏差10%。10参考文献GB/T6436-2002饲料中钙的测定