论文题目：橄榄醋中黄酮的提取工艺研究学 院：食品科学学院专业年级：2014级食品质量与安全学 号：3145818062学生姓名：邱铭锰指导教师、职称：陈继承 副教授 2018年06月01日1Study on simulated gastrointestinal reaction and antioxidant activity of olive vinegar in vitroCollege：College of Food ScienceSpecialty and Grade：Food Quality and Safety, Grade 2014Number：3145818062Name：Mingmeng QiuAdvisor：Associate Professor. Jicheng ChenSubmitted time:June 1st , 2018目录摘要.1关键词.11 引言.22试验材料与仪器22.1主要材料与试剂22.2主要仪器23实验方法33.1芦丁标准曲线制备33.1.1标准液的制备:33.1.2标准曲线的制作:33.2制备橄榄醋方法初试43.2.1筛选制备橄榄醋的最佳浸泡天数43.2.2筛选制备橄榄醋的最佳物料比43.3提取橄榄醋中黄酮单因素实验设计43.3.1确定最佳提取温度43.3.2确定最佳提取时间43.3.3确定最佳乙醇浓度53.3.4确定最佳料液比53.4正交实验设计54结果分析54.1橄榄醋制备工艺54.1.1筛选制备橄榄醋的最佳浸泡天数实验结果54.1.2筛选制备橄榄醋的最佳物料比实验结果64.2醋泡橄榄中黄酮含量相关单因素实验结果64.2.1提取温度实验结果64.2.2提取时间实验结果74.2.3乙醇浓度实验结果74.2.4料液比实验结果84.3正交实验结果95论文结论10摘 要:青橄榄的营养丰富，内含黄酮等多种抗氧化物质，具有良好的延缓衰老的作用，而醋作为良好的溶剂，能有效溶解橄榄中的营养物质，包括橄榄中的矿物质，黄酮等抗氧化物质，加上食醋本身对于人体有帮助胃消化的作用，有利于橄榄中抗氧化物质的消化吸收，两者相辅相成，本实验通过研究对橄榄醋中黄酮提取的优化，优化橄榄醋中黄酮的提取，通过单因素初步探索了橄榄醋的制备工艺，再通过超声辅助提取橄榄醋中黄酮的含量。设定单因素考察提取时间、提取温度、乙醇浓度、料液比等单因素条件对醋中黄酮的提取率的影响，最后采用正交试验优化提取条件，筛选出最优的橄榄醋中黄酮的提取条件，结果表明：最佳微波提取工艺为: 即提取温度为45，提取时间为25min，乙醇浓度为55%，料液比为1：3, 总黄酮提取率可大于8%。关键词:青橄榄;醋;黄酮;抗氧化;优化提取Abstract： Olive nutrition is rich, it contains flavonoids and other antioxidants, has good anti-aging effect, and vinegar as a good solvent, can effectively dissolve nutrients in olives, including olive in minerals, antioxidants such as flavonoids, add the vinegar itself is helpful for human body stomach digestion, conducive to digestion and absorption, major amounts of antioxidants in olive both supplement each other, this experiment by studying the optimization of olive vinegar extract medium yellow ketone, optimize olive extract medium yellow ketone, vinegar by single factor preliminary explore the preparation technology of olive vinegar, olive vinegar by ultrasonic assisted extraction medium yellow ketone content. Set single factor extraction time, extraction temperature, ethanol concentration, solid-liquid ratio and other single factor conditions influence on vinegar extraction yield of medium yellow ketone, finally USES the orthogonal experiment to optimize the extraction conditions, select the most optimal olive vinegar medium yellow ketone extraction conditions, the results showed that the best microwave extraction process is: the extraction temperature 45 , time of 25 min, ethanol concentration is 55%, and solid-liquid ratio of 1:3, flavonoids extraction yield can be greater than 8%.Key words: Green olives；vinegar；flavonoids；antioxidant；optimize the extraction1 引言橄榄树不仅是著名的亚热带果树，而且其果实橄榄营养价值丰富1，又具有多种活性物质，在唐朝就被列为贡品，是我国卫生部首批公布的药食两用物种之一2，对于人体有延缓衰老、抗氧化3、抗菌4、消炎5、降火、抗 HIV6、防止癌症2、生津止渴，醒酒安神，抗糖尿病2等多种作用，可以生食或泡着喝，故日益受到人们的关注。青橄榄属于橄榄科橄榄属的乔木植物。青橄榄一般长为2-3厘米，形状为椭圆形至纺锤形，果子一般为绿色或者墨绿色，其营养丰富，尤其是维生素和铁、钙等矿物质元素含量丰富，表面呈不规则皱纹或光滑，果肉质地较硬，内有硬核，两端稍尖，果子一般在10-12月间成熟，橄榄一般产于中国的南方，中国福建福州闽侯县有种植，种植有大片橄榄，有“中国橄榄之乡”的称号，其叶子一年四季常绿。永春老醋又名为乌醋或者福建红曲醋，由于其发展历史悠久，不添加食盐和防腐剂，含有氨基酸和多种营养物质和对人体有益的微生物，色香味俱佳，酸中带甘，能长期保存，可以消除疲劳，美容养颜、滋润和清洁皮肤，帮助胃消化，杀伤致病菌，降血压和抑制癌细胞的扩散，是很好的调味品，其凭借着其独特的风味和丰富的营养价值，成为全国四大名醋之一，享誉海内外。原料为糯米、芝麻、红粬等，它的发酵过程是有关的微生物(如红曲霉、醋酸菌、酵母)在一定适宜的条件下(如温度、生物素、湿度、浓度、卫生)，其生长繁殖所产生的催化剂(酶)促进有机物分解、合成生物化学反应的过程7。黄酮类化合物是广泛存在于自然界中的一大类化合物,主要分布于植物中,具有生理药理活性8 具有一定的活血化瘀、降血脂、降血糖和提高免疫功能的作用9、抗癌作用10。抗炎,以及作为植物抗毒素11的作用，黄酮类化合物的传统提取方法有碱性水提取法、醇提取法、其它有机溶剂提取法等12，本文以闽侯青橄榄与永春老醋为原料，以微波提取的方式通过实验研究橄榄醋中黄酮的提取工艺优化，通过设定不同的单因素初步探索了橄榄醋的制备工艺，又通过设定不同单因素考察提取时间、提取温度、乙醇浓度、料液比等条件对醋中黄酮的提取率的影响， 最后采用正交试验优化提取条件，筛选出最优提取条件。2试验材料与仪器2.1主要材料与试剂闽侯青橄榄、永春老醋、芦丁标品标准品(购自南京建成)、NaNO、Al(NO3) 3、NaOH、FeSO4、H2O2、乙醇、三羟甲基氨基甲烷、水杨酸、邻苯三酚，所有的化学品和溶剂均为分析纯。2.2主要仪器名称型号产地电子天平TX223L日本岛津国际贸易有限公司台式离心机TG16上海卢湘仪离心机有限公司粉碎机YC-02A上海旭曼机电有限公司超声波清洗器KQ-500VDE昆山舒美超声仪器厂紫外可见分光光度计A1900S上海谱源仪器有限公司3实验方法3.1芦丁标准曲线制备3.1.1标准液的制备:确称取芦丁1mg，105干燥至恒重，加70%乙醇适量，置水浴中加热溶解放冷，以70%乙醇定容至10ml，摇匀，得到终浓度为0.1mg/mL的芦丁标准液。5% NaNO：称取分析纯NaNO5g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，当天配制。 10% Al(NO 3) 3: 称取分析纯Al(NO 3) 3 10g，用蒸馏水溶解并定容至100mL。1 mol/L NaoH：称取分析纯NaoH 4g，用蒸馏水溶解并定容至100mL。3.1.2标准曲线的制作:取0、1、2、3、4、5mL芦丁标准液于6只具塞试管中，加60%乙醇使成5mL。加5% NaNO溶液0.3mL，摇匀，放置6min，加10% Al(NO 3) 3溶液0.3mL，摇匀，放置6min，加1mol/L NaoH溶液4mL，加60%乙醇0.4mL，摇匀，放置10mim，因芦丁样品的最佳吸收波长在510nm处13，故以第一管为空白于510nm处测定吸光度。以吸光度A为纵轴，芦丁标准液含量mg/mL为横轴做图得芦丁标准曲线，见下图1。图1 芦丁标准曲线 Figure1 Rutin standard curve.吸取1mL提取液置于具塞试管，按上述芦丁标准曲线绘制方法配制溶液，并以试剂空白为参比液调零，测取其吸光度记为，将其代入标准曲线得到提取液浓度C，按下面公式计算宗黄酮含量14： Y(%)=(C*V2)/V1*V0/W*100C:样液浓度（mg/mL）V0：样液定容后的体积（mL）V1：测定吸光度用样液的体积（mL）V2：测定时稀释体积（mL）W：称取样品橄榄叶粉重量（mg）3.2制备橄榄醋方法初试取闽侯青橄榄适量洗净，自然晾干后粉碎并过10目筛网备用。3.2.1筛选制备橄榄醋的最佳浸泡天数取橄榄粉末按照物料比1:3 (m/v)加入永春老醋浸泡不同的天数，制成橄榄醋之后，将浸提物至50mL离心管中于4000r/s离心5分钟取上清液，过滤去除杂质。以50%的乙醇按照1：3（v