课时训练*1. （2011年常州高二检测）科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该 抗性基因的主要作用是（）A.提高受体细胞在自然环境中的耐热性B.有利于检测目的基因是否导入受体细胞C.增加质粒分子的相对分子质量D.便于与外源基因连接解析：选Bo质粒上的抗菌素抗性基因作为标记基因，通过它的特性可以用于判断目的 基因和载体是否一起进入受体细胞，若进入，则受体细胞对抗菌素具有抗性，否则没有。2 .如图所示是限制性核酸内切酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（）AATTCA. CTTAAG切点在 C和T之间B. CTTAAG切点在G和A之间C. GAATTC切点在G和A之间D. GAATTC切点在C和T之间解析：选Co由题意知，该限制性核酸内切酶识别的核甘酸序列是GAATTC专一切点在G和A之间。切出的两个完全相同的黏性末端是AATT和AATT,两个黏性末端的关系是碱基互补配对。3 .关于下图DNA分子片段的说法正确的是 （） 一 III IIIA.限制性内切酶可作用于、处8 .解旋酶作用于处C. DNA1接酶作用于处D.获取目的基因要同时使用解旋酶和限制性内切酶解析：选Bo注意识别图示 DNA吉构各部位的结构实质。注意限制性核酸内切酶的作用 是特定的，如果作用于GA之间的磷酸二酯键， 则在DNA的两条链中均在 GA之间切割，所以 A选项错误。解旋酶作用的部位是每个碱基对之间的氢键。4 .在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A.用mRN朋模板逆转录合成 DNA8 .以4种脱氧核甘酸为原料人工合成C.将供体DNA段转入受体细胞中，再进一步筛选D.由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA解析：选Bo已知目的基因的碱基序列，人工合成方便快捷。不需要再利用mRNA蛋白质的氨基酸序列来推测和合成，更不必再进行筛选。9 .目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目白基因检测和鉴定的是（）检测受体细胞是否有目的基因检测受体细胞是否有致病基因检测目的基因是否转录形成 mRNA检测目的基因是否翻译成蛋白质A.B.C.D .解析：选Co目的基因的检测和鉴定有分子水平上的，如目的基因是否导入受体细胞， 目的基因是否转录形成 mRNA目的基因是否翻译成蛋白质；还有个体水平上相应性状的鉴 定，如抗虫、抗病性状等。10 下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA1接酶、解旋酶作用的正确顺序是 （） A.B .C.D .解析：选Co限制性内切酶将 DNA切割为两个片段，如。DNA聚合酶在DNAM制过程中能连接脱氧核甘酸，延长子链，如。DNW接酶能连接DNA片段，如。解旋酶能解开DNAa链，如。11 在抗软化番茄的培养过程中，是 将含有抗多聚半乳糖醛酸酶基因带入普通 番茄细胞的（）A.植物病毒 B . 土壤农杆菌C.噬菌体D .花粉解析：选B。土壤农杆菌中的质粒可作为目的基因一一抗多聚半乳糖醛酸酶基因的载体， 而土壤农杆菌对番茄具有感染性，故B项符合题意。12 （2010年高考浙江理综卷）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下 列操作错误的是（）A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析：选Ao构建重组DNA分子时，需用限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，再用 DNAi1接酶连接形成重组 DNA子，烟草花叶病毒的遗传物质是RNA故A错误。13 下列关于基因工程的叙述，正确的是 （）A.基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B.噬菌体是获得转基因细菌的重要载体C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA用另一种处理载体 DNAD.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞解析：选Bo噬菌体是一类专门感染细菌的病毒，故其很容易将含有目的基因的重组DNA分子带入细菌细胞中，故 B项是正确的。14 .下列关于基因工程的叙述，错误的是（多选）（）A.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA用另一种处理质粒的 DNA8. DNAi1接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器解析：选ABD）只有质粒切出的末端与目的基因的末端是互补的，二者才能通过DNA生接酶结合在一起，所以要用同一种限制性核酸内切酶切割。载体是工具而不是酶。 质粒为细胞质中的一种小型环状 DNA分子。11 .或豆对多种害虫具有抵抗能力，根本原因是或豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因（CpTI基因）。科学家将其转移到水稻体内后，却发现效果不理想，主要原因是CpTI蛋白质的积累量不足。在体外对CpTI基因进行修饰后，CpTI蛋白质在水稻中的积累量得到了提高。修饰和表达过程如图所示：“内质咖府睁痴 Sri基因信二mL 1修饰后的QTT系因AcpTiffirm,基因，“信号肽”序列及“内质网滞留信号”请根据以上材料，回答下列问题: (1)CpT I基因是该基因工程中的,在过程中，要使用序列之所以能修饰到 CpTI上，是由于基本组成单位是 酶切开，暴露出 ,再用 酶连接。(2)在该基因工程中，供体是 ,受体是(3)过程称为(4)检测修(后的CpTI基因是否表达的最好方法是解析：(1)因科学家是将 CpTI基因转移到水稻体内, O故CpTI基因为目的基因；由于“信号肽”序列和“内质网滞留信号”序列均由A、T、G C四种脱氧核甘酸组成，故可将其修DNA分子重组，故在过程中先饰到CpTI基因上；因过程涉及暴露出黏性末端，又涉及用到限制性核酸内切酶，后用到DNA连接酶。(3)因为修饰后的 CpTI基因在水稻体内先形成A,然后再由A直接控制CpTI蛋白质的合成， 故过程为转录。(4)因叶肉细胞是进行光CpTI首先出现于叶合作用的细胞，而蛋白质是由光合作用的产物糖类转变而成的，故 肉细胞中，故检测修饰后的CpTI基因是否表达成功的最好办法是让多种农业害虫食用水稻 叶片，观察抗虫效果。答案：(1)目的 四种脱氧核甘酸限制性核酸内切黏性末端 DNA1接 (2)或豆细胞水稻细胞(3)转录(4)让多种农业害虫食用水稻叶12 .胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：大招打萌(1)完成过程、必需的酶分别是 (2)在利用A B获彳导C的过程中，必须用切割A和B,使它们产生相同的取自大肠杆菌的物质B,在基因工程中起_,才可形成Co作用，必须具备的条件是少2个)。(4)图中的D是基因工程中的细胞，能作为这种细胞的有解析：(1)过程为由单链 RNAU双链DNA勺过程，为逆转录，需要逆转录酶的催化。 过程是DNA由双链解旋变成单链，这个过程需要解旋酶。(2)A为目的基因，B为载体，只有用同一种限制性核酸内切酶切出相同的黏性末端， 后在DNA连接酶的作用下才能相互结合。(3)从大肠杆菌中提取的 B为质粒，在基因工程中可以起到载体的作用，必须具备的条件是具有标记基因、目的基因插入位点和能够在宿主细胞中复制并稳定保存。(4)常用的受体细胞是大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞。答案：(1)逆转录酶解旋酶(2)同一种限制性核酸内切酶黏性末端 DNA连接酶(3)载体具有标记基因、目的基因插入位点和能够在宿主细胞中复制并稳定保存(4)受体 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞13 .目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的 人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示：pW322(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于(2)pBR322分子中有单个 EcoRI限制酶作用位点，EcoR I只能识别序列一 GAATTC-, 并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRI的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。(3)pBR322分子中另有单个的 BamH限制酶作用位点，现将经BamH处理后的质粒与用另一种限制酶 Bgl n处理得到的目的基因，通过DNA1接酶作用恢复 键，成功地获得了重组质粒。说明(4)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨节青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布放到培养基上，使绒布面沾 上菌落，然后将绒布放到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是 。解析：(1)质粒上的抗性基因可作标记基因，便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因。(2)在目的基因的两侧各有 1个EcoRI的切点，即目的基因两侧有一GAATTC。(3)DNA连接酶能连接磷酸二酯键。经BamH处理后的质粒与用另一种限制酶Bgl n处理得到的目的基因能连接起来，说明这两种酶切割获得的黏性末端相同。(4)图二中的菌落能抗氨芳青霉素，将灭菌绒布放到图二中培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布放到图三含四环素的培养基上培养，仍能生长抗四环素的菌落，空圈为不能抗四环素的菌落(只能抗氨茉青霉素)。图三结果显示，多数大肠杆菌既能抗氨茉青霉素，又能抗四环素，说明导入的是pBR322质粒，而不是重组质粒(重组质粒的四环素抗性基因被切 断，不能表达，因此含重组质粒的大肠杆菌只抗氨茉青霉素)。答案：(1)筛选(鉴别目的基因是否导入受体细胞)G AATTC GAATTC(2) I-CTTAAGCTTAAgJ(3)磷酸二酯 两种限制酶(BamH和 Bgl n )切割得到的黏性末端相同(4)能抗氨节青霉素，但不能抗四环素pBR322质粒