农杆菌介导MSI-99基因转化马铃薯及其植株再生研究马铃薯（Solanum tuberosum）是粮菜兼用型作物，栽培分布广泛，在世界上， 其产量仅次于小麦、玉米、水稻而位居第四。但在生产上，各种病害严重，常常 造成巨大的经济损失。因此，培育广谱抗病新品种是育种学家的首选目标。MSI-99为一广谱抗菌 肽，对多种植物病原细菌、真菌及病毒均有强烈抑制作用。将MSI-99基因导入马铃薯栽培种，可以改良品种的抗病性。试验从筛选马 铃薯高效再生体系入手，并在此基础上，以农杆菌为媒介将抗微生肽基因MSI-99 导入马铃薯栽培种。1.马铃薯高效再生体系的筛选 以Superior、Shepody和Favorita 三种基因型的叶片、茎段和块茎为材料，通过对7种再生体系培养基配方进行比 较，筛选出三种基因型材料再生的最佳培养基配方：适于叶片和茎段再生的培 养基：MS基本培养基+2.25mg / L6-BA+0.18mg / LNAA（愈伤组织诱导培养基），MS 基本培养基+2.25mg / L6-BA+5.0mg / L GA3（芽分化培养基）；适于块茎片再生 的培养基配方为：MS基本培养基+0.9mg / L IAA+1.8mg / L ZT（愈伤组织诱导与 芽分化培养基）。2.农杆菌介导MSI-99基因转化马铃薯 用电转化仪将携有目的基因的双元载体质粒pBIN-MSI99导入农杆菌LBA4404菌株，再用其分 别浸染Superior、Shepody和Favorita三个马铃薯品种的叶片、茎段和块茎片 外植体，诱导再生后，获得抗Kan的再生苗36株，其中有2株不能生根。经PCR检测有13株呈阳性，Southern杂交有7株有杂交信号，表明外源基 因已经整合到再生苗基因组。移入盆栽后，转基因植株比对照植株叶片小，颜色 深，叶数多；转基因小薯外形也有变异，表现为细长和椭圆两种。