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o.1什么是微生物?习惯上它包括哪几大类群?微生物:一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。类群:非细胞型。小、无典型细胞结构,包括病毒亚病毒原核细胞型。无成形细胞核及完整的细胞器,包括三菌三体真核细胞型。有完整的细胞结构,细胞核分化程度高,细胞器完善,包括酵母菌、霉菌、蕈菌等。0.2微生物发展史如何分期?各期的时间、实质、创始人和特点是什么?我国人民在微生物发展史上占有什么地位?有什么值得反思?分期:史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期奠基期 ?1.1试对细菌细胞的一般构造和特殊构造设计一简表解。一般结构细胞壁细胞膜间体核糖体细胞质内含物储藏物核区特殊结构糖被荚膜微荚膜黏液层凝胶团鞭毛、菌毛、性菌毛芽孢1.2试图示G+细菌和G细菌细胞壁的主要构造,并简要说明其异同成分占细胞壁干重的%革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌肽聚糖含量很高(5090)含量很低(10)磷壁酸含量较高(50)无类脂质一般无(2)含量较高(20)蛋白质无含量较高G+细菌和G-细菌都含有肽聚糖和磷壁酸,区别在于含量的不同。1.3试图示肽聚糖单体的模式构造,并指出G+细菌和G-细菌在肽聚糖的成分和结构上的差别。G+细菌肽聚糖单体结构与G-细菌基本相同,差别仅在于:四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而是被一种只存在于原核生物细胞壁上的特殊氨基酸内消旋二氨基庚二酸(m-DAF)所代替;没有特殊的肽桥,故前后两单体间的连接仅通过甲四肽尾的第四个氨基酸(D-Ala)的羧基与乙四肽尾的第三个氨基酸(m-DAP)的氨基直接相连,因而只形成较稀疏、机械强度较差的肽聚糖网套。1.4在G-细菌细胞壁外膜和细胞壁(内膜)上各有那些蛋白?其功能如何?外膜: ?细胞膜:?1.5试列表比较真细菌与古生菌在细胞膜结构上的不同点.古生菌细胞膜真细菌细胞膜亲水头(甘油)与疏水尾(烃链)间醚键连接酯链连接疏水尾的长链烃是异戊二烯的重复单位疏水尾是脂肪酸单分子层膜或单双分子层混合膜(单分子层比双分子层机械强度高)双分子层膜甘油3C分子上连接磷酸酯基、硫酸酯基、多种糖基细胞膜上含有多种独特酯类,如视黄醛,可与蛋白质结合成视紫红质1.6试简述革兰氏染色的机制。通过结晶紫液初染和碘液媒染后,在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇(或丙酮)处理时因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。反之,G-细菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色乙醇后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松的肽聚糖网不能阻止结晶紫与碘复合物的溶出,因此细胞退成无色。这时再经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌则保留最初的紫色(实为紫加红色)了。【涂片固定初染结晶紫媒染碘液脱色95%酒精稀释复染复红】1.7什么是缺壁细胞?试列表比较四类缺壁细胞细菌的形成、特点和实践意义。缺壁细胞:(见前文名词解释6)类型形成特点实际应用L型细菌在实验或宿主体内通过自发突变形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。没有完整而坚韧的细胞壁,细胞成多形态;大多数染成革兰氏阴性;营养要求高,高渗环境,生长较缓慢,一般培养27天可形成中心较厚四周较薄的“油煎蛋”似的小菌落。可能针对细胞壁的抗菌治疗有关原生质体在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁的合成,所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。G+细菌最易形成原生质体,这种原生质体除对相应的噬菌体缺乏敏感性(若在形成原生质体前已感染噬菌体的细胞仍可正常复制)、不能进行正常的鞭毛运动和细胞不能分裂外,仍保留着正常细胞所具有的其他正常功能。不同菌种或菌株的原生质体间易发生细胞融合,可用于杂交育种;另外原生质体比正常细菌更易导入外源遗传物质,故有利于遗传学基本原理的研究。球状体又称原生质球,指还残留了部分细胞壁(尤其是G细菌外膜层)的圆球形原生质体。枝原体在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。细胞膜中含有一般原核生物没有的zhai醇,故即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较强的机械强度1.8试对G-细菌的鞭毛和螺旋体的周质鞭毛在结构、着生方式和运动特点等方面作一比较。结构着生方式运动特点G-细菌的鞭毛螺旋体的周质鞭毛1.9试用表解法对细菌芽孢的构造及各部分成分作一介绍。1.10什么是菌落?试讨论微生物的细胞形态与菌落形态间的相关性及其内在原因。菌落:是指将单一微生物或一小堆同种细胞接种在固体培养基上,在适宜的培养条件下,形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。菌落形态包括菌落的大小、形态、边缘、隆起、光泽、质地、颜色和透明度等。每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下,菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义,细胞形态是菌落形态的基础,菌落形态是细胞形态在群体聚集时的反映。细菌是原核微生物,故形成的菌落也小;细菌个体之间充满水分,所以整个菌落显得湿润,易被接种环挑起;球菌形成隆起的菌落;有鞭毛的细菌常形成边缘不规则的菌落;具有荚膜的菌落表面较透明,边缘光滑整齐;有芽孢的菌落表面干燥皱褶,有些能产生色素的菌落还显出鲜艳的颜色。1.11试以链霉菌为例,描述这一类典型放线菌的菌丝、孢子和菌落的一般特征。放线菌是一类呈菌丝状生长、主要以孢子繁殖和陆生性强的原核生物。链霉菌的细胞呈丝状分支,菌丝直径很细,与细菌相似。在营养生长阶段,菌丝无内隔,内含许多核质体,故一般呈多核的单细胞状态。基内菌丝体(营养菌丝“根”,吸收水、营养和代谢废物)气生菌丝生长致密,覆盖整个菌落表面,菌丝呈放射状。2.1试对酵母菌的繁殖方式作一表解。2.2试图示酿酒酵母的生活史,并对其中各主要过程作一简述。(1) 子囊孢子在合适的条件下发芽产生的单倍体营养细胞(2)单倍体营养细胞不断地进行出芽繁殖(3)两个性别不同的营养细胞彼此接合,在质配后即发生核配,形成二倍体营养细胞(4)二倍体营养细胞不进行核分裂,而是不断进行出芽繁殖(5)在以醋酸盐为唯一或主要碳源,同时又缺乏氮源等特定条件下(6)子囊经自然或人为破壁后,可释放出其中的子囊孢子2.3试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化结构,并简要说明它们的功能。2.4试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特征。菌落特征微生物类别单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主要特征菌落含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观状态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而致密细胞相互关系单个分散或有一定的排列方式单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征小而均匀个别有芽孢大而分化细而均匀粗而分化参考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调,一般呈乳脂或矿浊色,少数红色或黑色十分多样十分多样菌落正反面颜色的差别相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞可见球状,卵圆状或假丝状细胞有时可见细丝状体细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味带有泥腥味往往有霉味2.5试列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并提出制备相应原生质体的酶或试剂。细菌细胞壁主要成分为肽聚糖,具有固定细胞外形和保护细胞不受损伤功能细菌原生质体制备,溶菌酶,自溶酶酵母菌细胞壁主要成分甘露聚糖(外层)蛋白质(中层),葡聚糖(内层)类脂,几丁质酵母菌原生质体的制备:a硫基乙醇,蜗牛消化酶放线菌和霉菌的细胞壁主要成分微纤维,纤维素,几丁质无定形基质成分:葡聚糖,蛋白质,脱乙酰几丁质,甘露聚糖,少量脂类无机盐等3.1试图示并简介病毒的典型构造。病毒粒有时也称病毒颗粒或病毒粒子,专指成熟的结构完整的和有感染性的单个病毒。核酸位于它的中心,称为核心和基因组,蛋白质包围在核心周围,形成了衣壳。衣壳是病毒类的主要支架和抗原成分,有保护核酸等作用,衣壳是由许多在电镜下可辨别的形态学亚单位衣壳粒所构成,核心和衣壳合称核心壳。3.2病毒粒有哪几种对称体系?各种对称体系又有几种特殊外形?试各举一例。3.3病毒的核酸有哪些类型?试举例并列表比较之。其中有哪几种类型目前还未找到代表性病毒?今后前景如何?P71核酸类型病毒代表动物病毒植物病毒微生物病毒DNAssDNA线状细小病毒H-1玉米条纹病毒等核盘菌5Shadv-1病毒环状待发现待发现噬菌体dsDNA线状单纯疱疹病毒和腺病毒待发现噬菌体环状猿猴病毒40(SV40,5243bp)等花椰菜花叶病毒铜绿假单细胞菌的PM2噬菌体等RNAssRNA线状脊髓灰质炎病毒,艾滋病毒豇豆花叶病毒和TMV等RNA噬菌体dsRNA线状弧长谷病毒和昆虫质型多角体病毒等玉米矮缩病毒和植物伤流病毒等各种真菌病毒3.4什么是烈性噬菌体?试简述其裂解性增值周期。定义:在短时间内能连续完成上述5个阶段(即吸附、侵入、增值、成熟、和裂解)而实现其繁殖的噬菌体。周期吸附:尾丝与特异性受体接触后,吸附在受体上,通过刺突、基板固定于细胞表面侵入:尾管所携带的溶菌酶把细胞壁上的肽聚糖水解,将核酸注入宿主细胞内增值:包括核酸的复制和蛋白质的合成成熟:把合成好的“部件”进行自我装配裂解:在脂肪酶和溶菌酶的作用下,促使细胞裂解。3.5什么是效价,测定噬菌体效价的方法有几种?最常用的是什么方法,其优点如何?定义:每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数,即噬菌斑形成单位数或感染中心数。方法:液体稀释法、玻片快速测定法、单层平板法、双层平板法。较常用的是双层平板法。优点:加了底层培养基后,可弥补培养皿底部不平的缺陷,可使所有的噬菌斑都位于同一平面上,因而大小一致,边缘清晰且无重叠现象,又因上层培养基中琼脂较稀,故可形成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。3.6何为一步生长曲线?它分几期,各期有何特点?定义:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。分期潜伏期:侵入到第一个噬菌体释放。分为隐蔽期和胞内积累期。裂解期:细胞裂解,噬菌体急剧增加。平稳期:溶液中噬菌体效价达到最高点。3.7无答案4.1什么是自养微生物?它有几种类型?试举例说明。定义:凡以无机碳源作为唯一或主要碳源的微生物。类型:分为光能自养微生物和化能自养微生物两种。 光能:蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类 化能:硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌4.2什么是水活度?它对微生物的生命活动有何影响?对人类的生产和生活实践有何关系?定义:是一个比渗透压更有生理意义的物理化学指标,它表示在天然或人为的环境中,微生物可实际利用的自由水或
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