第一节 血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第 页 共 页 1 检测方法和原理三碘甲状腺原氨酸（3,5,3-L-triiodothyronine，T）是直接由甲状腺合成和分泌（占大约20%）的，以及外围T转化为T（占大约80%）一种激素。T测定采用直接化学发光技术的竞争免疫测定法，检测原理为：患者血样中的T与一种T类似物竞争数量有限的、存在于标记试剂中带吖啶（acridinium）酯标志的鼠单克隆抗T抗体，上述T类似物在固相试剂中与顺磁离子共价结合。病人血样中的T含量与系统所检测的光亮指标（RLUs）强度呈现一种反比关系。2 标本采集及与干扰因素2.1 采血方法不抗凝静脉血23ml2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。不得使用在室温中保存8h以上的血样。若分析试验不能在8h之内完成，应使用无菌盖盖严标本并将其置于28的环境保存。若血样不能在48h之内进行分析，应将其置于20的环境中冷冻保存，可稳定1个月。标本只能冷冻一次，并且在解冻后应允充分混匀。2.3注意事项推荐选用血清。人血清中的异嗜抗体可与免疫球蛋白试剂发生反应，从而干扰实验室中的免疫测定结果。经常与动物或动物血清产品接触的患者易于受到上述因素影响，因此其检测结果可能会出现异常值，在进行诊断时应获取更多信息。胆色素342mol/L（20mg/dl）、血红蛋白2.5g/L(250mg/dl)、三酰甘油26mmol/L(1000mg/dl)有明显干扰。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。3 试剂和设备3.1试剂SIEMENS原装配套试剂。3.1.1试剂组成：T3Lite试剂和T固相试剂、T辅助试剂。T Lite试剂：吖啶酯标记的单克隆鼠抗人T抗体（300ng/管），含叠氮钠（0.1%）、ANS、巴比妥钠缓冲液。T 固相试剂：与磁性颗粒共价结合的T类似物（200g/管），含叠氮钠（0.1%）ANS、巴比妥钠缓冲液。3.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包，肉眼检查试剂包底部以确保所有颗粒分散均匀并处于悬浮状态。然后将混合物载入系统直接使用。若使用新批号试剂，需在主界面选择Calibration，选择Master Curve Definition。在Calibration-Master Curve窗口，选择Scan Data， 第一节 血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第 页 共 页 用扫描器扫描主曲线，扫描后点击Save（注意，用扫描器扫描时，不要停或回扫，一直扫完条码为止）。3.1.3 试剂储存：28冷藏保存，并保持竖直向上。3.1.4 注意事项：叠氮钠与铜、铅形成易爆的金属叠氮钠化合物，处理废液时应用大量水冲洗稀释以防叠氮钠的产生。上述试剂不能口服，万一沾至皮肤应立即用清水及肥皂水冲洗。所有试剂应按照潜在传染性的物质处理。3.2控制品SIEMENS原装配套质控品Ligand Plus 1，2，3.3.3校准品SIEMENS原装配套校准品A3.4仪器SIEMENS ADVIA CENTAUR全自动化学发光免疫分析仪。4 操作程序4.1检测流程签收标本离心上机检测审核报告签发报告标本保存。4.2标本签收严格按标本接收程序签收标本。4.3标本处理标本在离心机上以25003000r/min，离心610min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏于28的冰箱里。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：适用于无条形码标本或标本复查，在Worklist窗口，点击Schedule点击Schedule by Rack，输入样品架子号，后加AE点击Ente，输入ID号，选择项目组合或测试项目点击Save保存。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接上机检测。4.4.3运行：将已装载样品管的架子置于样品录入区，启动录入区。4.5检验后标本保存标本检测后密封盖好，保存在标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7d。5 校准程序5.1校准品准备和存储将校准品A从冰箱中取出，加5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装，20冰冻保存至少20d，复融后28可稳定24h。5.2校准条件 第一节 血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第 页 共 页 在室内质控失控，使用新批号试剂、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况时校准周期为28d。5.3校准程序使用新批号校准液时，需在主界面，点击Calibratior，选择Calibrator Definition。在Calibration-Calibrator Definition窗口， 选择Scan Data，用扫描器扫描校准曲线，扫描后，核对数据正确后，保存数据。将复融后的高、低水平校准品A置于样品架上，并确认低定标液之前放置。在Worklist窗口，点击Schedule点击Calibration，选择校准项目、校准品批号及试剂批号点击Save保存。将已装载校准品的架子置于样品录入区，启动录入区运行T定标程序。6 质量控制程序 6.1质控品准备和储存将质控品从冰箱中取出，加5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装，20冰冻可保存至少20d。复融后28可稳定24h。6.2控制品水平和分析批长度每24h至少进行1批，每批至少2个浓度水平。6.3质控操作程序将复融后的质控品装于样品管中，放置于样品架上，在Worklist窗口，点击Schedule点击Control点击Schedule by Rack，选择项目及质控ID号，输入架子号点击Save保存。启动录入区开始运行T质控程序。7性能参数 本方法线性范围为0.1512.3nmol/L，不准确度允许范围？X12.5,不精密度CV8.33.对于超过测定线性范围的标本，用配套稀释液对标本进行稀释后再检测，结果乘以稀释倍数。8生物参考区间 1.492.60nmol/L。9临床意义T与T浓度增高主要见于甲状腺功能亢进时，和FT、FT一起可用在甲亢及甲减的诊断、病情评估、疗效监测上。但在甲亢初期与复发早期T一般上升很快，约4倍于正常； T上升缓慢，仅为正常的2.5倍，故T是早期Graves病疗效观察及停药后复发的敏感指标。T与T升高还可见于活动性肝炎、妊娠时。T、T减低可见于甲状腺功能低下，甲减时T或FT降低早于T或FT。血T或FT降低仅见于疾病后期或病重者。 第一节 血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第 页 共 页10参考文献1SIEMENS三碘甲状腺原氨酸测定试剂说明书.2叶应妩，王毓三，申子瑜，全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：521-523.3张秀明，李建斋，魏明竟，等.现代临床生化检验学.北京：人民军医出版社，2001：486-494. 编写：何 娟 审核：王伟佳 批准：张秀明