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细菌固定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company Onel取出样品,滴加1 mL %戊二醛固定30 min,然后依次用mol/L 无菌PBS溶液、无菌水对样品反复冲洗23次,最后用2 mL无水 甲醇进行脱水,通风放置直到无水甲醇挥发完毕,即得到固定细菌 后的样品。以上整个过程须在生物安全柜(超净工作台)上操作。对处理后的样品,通过SEM (扫描电子显微镜)观察样品表面 的细菌生长情况(SEM的操作参数:加速电压为kV,放大倍数在 1,0004,000x 之间)。注意:市售的戊二醛为浓度25%的水溶液,需放冰箱4C左右 遮光保存。为了保持pH值,最好用PBS溶液稀释。戊二醛一定毒 性,操作时需做好保护措施,沾到皮肤后要马上用大量水冲洗。如果需要更好的固定效果,可以用“梯度乙醇脱水法”代替无 水甲醇,即依次用 25%、 50%、 75%、 100%的乙醇对样品依次脱 水。420.0vmS480CM493 5kV 蜩mm $EU)附图一:SEM观察到的金黄色葡萄球菌(),放大倍数2,000倍。附图一:SEM观察到的大肠杆菌(),放大倍数2,200倍。
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