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细菌鉴定工作的注意问题 (一)、选用合适的鉴定系统 细菌鉴定系统并非分类模式,尽管它们表面看来有些相似,对一群病原体的鉴定系统设计,基于一种或多种该细菌都具备,而其他群细菌皆不具备的特征谱.用于该群鉴定的特性,通常不是用来分类,如分类用DNN杂交研究,而鉴定则基于与基因信息密切相关的表现型特征.常规鉴定试验应该选择方法简单,反应判断明确,价廉等如TI琼脂MIU琼脂。 血清学反应在分类上价值有限,但在鉴定中常常有极大作用,由于方法学上操作简单、快速,而且特异性高,它给细菌鉴定提供快速诊断方法。对许多菌属、种的鉴定,常用整试验图谱得出,肠杆菌科菌种是个例子,为减少需要大量培养基,已设计种简便、快速多试验系统,并有商品供应,用于各种微生物鉴定,特别是医学重要微生物鉴定。每个制造商提供的图、表、编码、计算机数据和鉴定概率等,皆以配合各自出产的多试验系统运用。因此盲目接受一种鉴定模式,而不去考设计者所要求的特定条件,如接种量、育温度、时间、培养基的分,培养基的表面化与容量的比率及确定阴性、阳性结果的标准,就会导致错误。虽然商品性多试验统,因严格的培养基和试剂的质量控制,给各实验室提高标准化系带来好处,但至今还没有一种系统对各种病原菌鉴定均达到很高的符合率.因此,当选用鉴定具有种特性的检菌时,应与已知的典型或标准菌株作对照比较,以保证在自已实验条件下,试验结果的可靠性 (二)正确判断阳性与阴性的反应界限 现已发现,一些试验是基于质粒或噬菌体介导的有较高可变的特性,因而用于鉴定是不可靠的。理想中某试验应当给予明显的阳性或阴性可重复试验结果,而没有模糊反应。某些细菌的革兰染色是可变的,只形成少量芽胞的细菌,仅通过染色和对热耐受试验确定也很困难。糖类分解试验很难把产少量酸从不产酸中区分开,用于鉴定系统试验,精确、具体的阳性和阴性结果反应界限很重要。 (三)纯化培养物的必要性 人们在使用表现型特征进行鉴定病原菌之前,纯培养物几乎是必需折。从选择性平板佻单个菌落不能保证纯度。活的但不生长的污染菌,常可在于挑选的菌落之中或附近,并随选择菌一起行次代培养。因此,选择性培养基更适用于最后分离。纯培养细菌在固体培养基上,菌落总是彼此相像,显示分纯的迹象。另一种纯度的标准是形态学,纯培养细菌在染色涂片上,通常表达形态学高度相似性。虽然如此,但也有例外,如-r变异荚膜变异、色素无色素变异,可在某一基质、温度或其他生长条件下出现,也因培养物菌龄、所用培养基以包括球形体、包、芽胞形式和多形态性等发生改变. (四)细菌鉴定的步骤 鉴定是一个未知株按其生物学特征,经过与有已知的菌种进行比较后划归到一已知菌种的分析过程。 、明确鉴定菌种已获得纯培养。 、确定革兰染色形态,然后按科、属、种走步骤鉴定下去。 、利用已具备条件,尽可能地缩小鉴定范围。 、把知识、经验运用于每一鉴定步骤。 、应用最小数量的试验方法作出鉴定。 、将分离菌株与相关的典型或参考菌作比较,以保证实际应用鉴定系统,在你的个别实验条件下是有效的。 细菌鉴定错误的常见三个因素是形态、革兰染色反应和动力。在多数情况下,鉴定分离到属级水平不会发生困难,而明确至种级和亚种,需要特殊参考实验室的帮助。 第 2 页 共 2 页免责声明:图文来源于网络搜集,版权归原作者所以若侵犯了您的合法权益,请作者与本上传人联系,我们将及时更正删除。
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