河南豫北规模化猪场弓形体病血清学调查摘要在豫北六个规模化猪场随机采集404头种猪、仔猪、育肥猪血清，用正向间接血凝试验（IHA）检测弓形虫抗体，六个场阳性率100%，种猪群阳性率92.59%，仔猪群阳性率36.51%，肥猪阳性率61.11%。关键词规模化猪场弓形体血清学调查弓形体病是一种重要的人畜共患传染性寄生虫病，近年来虽然有关于该病诊疗的文献，却少见其流行情况的报道，由于针对弓形虫的抵抗力建立后可增强猪体对多种无关微生物的抵抗力1，表明了巨噬细胞的非特异性免疫功能，也说明了该病与免疫系统的关系，另外感染该病猪只，主要病变为肺小叶间质水肿，可表现严重的呼吸道症状23，又与呼吸道病紧密相关，加上目前在弓形虫的防制中难以获得无污染环境又具较好免疫原性和免疫保护力的抗原4，一直未能有效果确实的疫苗问世，其控制主要还是依靠药物，所以了解该病的流行情况有很大的现实意义。为此，我们在今年年初随机采集了六个规模化猪场的404份血清，做了此次血清学调查。材料和方法：（1）受（等）检血清：河南豫北地区六个规模化猪场随机采集的不同年龄猪只的404份血清（所有猪只均未免疫过弓形虫苗）。（2）检测试剂：弓形体IHA抗原、标准阳性、阴性血清、稀释液等均由中国农业科学院兰州兽医研究所综防技术研究组提供。(3) 检测器材： V型96孔1101200医用血凝板、微量移液器（50微升、25微升或可调取液器）、以及配用的取液咀(自备)。（4）弓形虫体检测：采用弓形虫正向间接血凝试验（IHA），试验步骤和判定标准如下： 1）. 加稀释液： 在血凝板上1-8排的1-4孔各加稀释液75微升。2）. 稀释等检血清 取1号等检血清25微升加入第一排的第一孔混匀，从该孔取出25微升移入第二孔混匀 直到第四孔，混匀后取出25微升弃去，此时第一排14孔待检血清的稀释度(稀释倍数)依次为1：4、1：16、1：64、1：256，取2号等检血清加入第二排 第七排加阴性血清，第八排加阳性血清 均按上法稀释，每取一份血清更换一个塑料吸咀。3). 加血凝抗原(用前每瓶加5毫升稀释液混匀离心，弃去上清，再加5毫升稀释液混匀，40C保存24小时以后使用)。 等检血清各孔，阴性对照、阳性对照各孔，分别加入抗原25微升。4). 振荡混匀 将血凝板置于微量振荡器上，振荡混匀，恒温360C静置2小时后判定结果。5). 判定标准 将血清板放在白纸上，先观察阴性血清和阳性血清对照，阴性血清应无凝集或仅出现“+”凝集，阳性血清第四孔(即1：256稀释孔)出现“+”或“+”凝集为合格。 在对照孔合格的前提下，观察待检血清各孔，以呈现“+”凝集的最高稀释倍数为该份血清的抗体效价，例如，1号等检血清1孔呈现“+”凝集，2号孔呈现“+”凝集，3号孔呈现“+”凝集或无凝集，血球全部沉入孔底呈边缘整齐的小圆点，那么可判定该份血清的抗体效价达到1：16。 猪群其血清中IHA弓形虫抗体效价达到1：16(或1：16以上)为免疫合格。 调查结果：在调查出发现六个场均为阳性场（阳性率100%），其中种猪群（包括种公猪、种母猪）阳性率92.59%，仔猪群阳性率36.51%，育肥猪阳性率61.11%。具体结果见下表：表一六个规模化猪场弓形虫抗体阳性率猪群阳性阳性率（%）阴性阴性率（%）总计（头）种公猪4593.7536.2548种母猪10592.1197.89114合计15092.59127.41162仔猪群4636.518063.49126育肥猪群2261.111438.8936总计21853.9618646.04404上表中，种公猪与种母猪阳性率仅相差1.64%，表明种猪群确有较高的阳性率，另外在检查结果中发现，仔猪群血清抗体阳性率，随着周龄增加，呈规律性变化，即猪只出生后却经历了一个阳性率不断上升的过程，详细情况见表二：表二六个规模化猪场仔猪弓形虫抗体阳性率猪群周龄阳性阳性率（%）阴性阴性率（%）总计3918.753981.2548400510055116.67583.336600710077520.831979.172481014.935785.07679433.33866.6712101147.831252.172311642.86857.141418186012403026466.67233.336表中三、四、五、六周龄、抗体阳性率变化不规则，可能是由于采样少与场间差异造成的。讨论与小结从此次调查可以看出，弓形虫感染在规模化猪场相当普遍（几乎为100%），并且由于各场未使用疫苗，所以阳性猪均为自然感染。在种猪群中阳性率很高（超过90%），提示了垂直传播的现实意义，另外育肥猪群的阳性率也超过60%，让我们看到了整个猪群感染的普遍性。仔猪群的感染从表二中可以明显看出其规律性，即仔猪从七周龄开始，抗体阳性率逐渐升高，而这也与保育猪群临床上的表现大体一致，由于弓形虫自感染到产生抗体大约需14天1，所以如果用药控制该病要考虑提前投给，种猪群产前产后的用药也不容忽视。参考文献：1蒋金书编。弓形虫病。见蒋金书编著动物原虫病学。北京：中国农业大家出版社。2000，258-272。2甘孟候，等。猪弓形虫病。见甘孟候等编著猪病诊治彩色图说。北京：中国农业出版社。1997，64-65。3 潘锦平编。猪弓形体病。见潘锦平主编生猪检疫和肉品卫生检验。上海：上海科学技术出版社。2001，74-75。4 杜重波，等。抗弓形虫独特型抗体的研究抗弓形虫独特型抗体免疫效果的观察，中国兽医科技。1993年第9期（第23卷）：8-9。1