超声法提取大青叶中总黄酮的工艺及其抗氧化活性研究海 南 大 学毕 业 论 文 题 目：超声法提取大青叶中总黄酮的 工艺及其抗氧化活性研究 学 号： 20080401B077 姓 名： 郑晓雪 年 级： 08级 学 院： 材料与化工学院 专 业： 化学工程与工艺 指导教师： 徐静 完成日期： 2012年 6 月 20 日 摘要大青（Clerodendrum cyrtophyllum Turcz.）为马鞭草科（Verbenaceae） 大青属（Clerodendrum）植物,是我国传统中药。根、叶药用, 清热解毒、凉血利尿,具有抑杀病原微生物、提高机体免疫力等作用，中医临床上用于流感、腮腺炎、肝炎和肿瘤、扁桃体炎、腮腺炎、急性喉炎、牙周炎、细菌性痢疾、虫、蛇咬伤、肿毒、感冒发热等，具有抗病毒、抗菌、降压等作用。经文献研究发现，大青叶的药理作用与其中已报道黄酮类化合物的药理作用相似，初步预测其药理作用与总黄酮量及其抗氧化活性有关。本实验采用超声波有机溶剂法提取总黄酮，并用分光光度法测定，研究了乙醇浓度、超声时间、超声温度、料液比单因素对大青叶总黄酮提取率、总酚提取率、DPPH自由基的清除率、ABTS+自由基的清除率的影响并通过图像分析确定最佳提取条件是为乙醇浓度为40%，超声波作用时间为80min,超声温度为60，料液比为1:30。按此条件提取的总黄酮得率为5.20%、总酚得率为5.72%、清除DPPH自由基的清除率为85.93%、清除ABTS+自由基的清除率为86.61%。与此同时，本文对总黄酮提取率与其抗氧化活性之间的关系进行了探讨，研究表明，总黄酮类成分的含量与其抗氧化活性成正相关性，具有较好的一致性。本论文以大青叶为研究对象，通过对其总黄酮含量、总酚含量提取工艺条件优化及抗氧化活性的测定，分析其在民族医学上应用的科学合理性和作为中药材在民间推广的可能性，提取工艺重复性好，为进一步合理开发利用大青为医药资源提供理论依据。关键词：大青叶；有机溶剂超声波提取；总黄酮；抗氧化活性；清除自由基能力 Abstract Clerodendrum cyrtophyllum Turcz (Clerodendrum, Verbenaceae) is a traditional Chinese medicine. Root, leaves are often used to treat various diseases, such as clearing away heat and toxic material, cooling blood and diuresis, with killing pathogenic microorganism, improve the bodys immunity, clinical medicine for influenza, mumps, hepatitis and tumor, tonsillitis, mumps, acute laryngitis, periodontitis, bacterial dysentery, worms, snake bites, swollen drugs, cold fever, antiviral, antibacterial, with hypotensive effect. The study Clerodendrum cyrtophyllum Turcz is medicinal composition and antioxidant activity. Several studies have already been conducted and it was reported that the pharmacological effects of the roots and leaves of Clerodendrum cyrtophyllum Turcz which are similar with flavonoids that have already reported in it.Based on the above statements, ultrasonic assisted extracte was used to extract total flavonoids and Al(NO3)-NaNO2 colorimetric method was used measure its content. Among the various factors contributed to the extraction efficiency, four factors were investigated, the ethanol concentration, extractionl time, extraction temperature, solid to Liquid Ratio.By comparing the Total flavone，total phenolic content, DPPH, ABTS+radical effect scauagy through image analysis the optimal extraction conditions were detemind ethanol concentration of 40%, the effect of ultrasonic time was 80min, ultrasonic temperature of 60 , solid to liquid ratio is 1:30. Under the optimised condition total flavonoids yield is 5.20%, phenolic rate is 5.72%, the DPPH free radical scavenging scavenging rate is 85.93%, recovery the removal of the ABTS+ free radical scavenging rate is 86.61%Meanwhile, this paper also demostraded the relationship between flavonoids content and the antioxidant activity were in the good correspondence.In this thesis, we report to first time the results of a study aimed to define flavonoids content, extraction process optimization and antioxidant activity of Clerodendrum cyrtophyllum Turcz,ConclusionThis process is the best and reveal some pharmaceutical peculiarities for further in-depth studies. Keywords: Clerodendrum cyrtophyllum Turcz; organic solvent ultrasonic extraction ; total flavonoids yield ;Free radical scavenging capacity；the extraction conditions for the ethanol concentration目 录前 言11.文献综述31.1大青的概述31.1.1大青的本草学记载31.1.2大青的化学成分51.1.3大青的药理活性91.2黄酮类化合物的概述121.2.1黄酮类化合物的性质121.2.2黄酮类化合物的生物活性141.2.3黄酮类化合物的提取方法191.2.4黄酮类化合物国内外研究状况232.大青叶中总黄酮的提取及含量测定242.2 试剂及药品242.3实验步骤242.3.1准备工作及波长的确定242.3.2标准品确定252.3.4标准品的测量及绘制标准曲线252.3.5供试样品的制备262.3.6样品的测试272.4大青总黄酮提取工艺条件优化过程272.4.1单因素最佳值的确定273.总酚含量的测定333.1 实验仪器333.2试剂及药品333.3 FolinCiocalteu比色法测定总酚酸含量333.3.1 FolinCiocalteu试剂的配制333.3.2对照品溶液制备333.3.3标准曲线的制备343.3.4样品的测定343.3.5测定单因素多酚含量354.清除DPPH自由基能力的测定404.1.实验仪器、药品及试剂414.1.1 实验仪器414.1.2实验试剂及药品414.2清除DPPH能力的测定414.2.1 DPPH配制414.2.2标准曲线的绘制414.2.3样液的测定434.3测定单因素抗氧化活性的影响。435.清除ABTS+自由基能力的测定485.1实验仪器、药品及试剂485.1.1 实验仪器485.1.2实验试剂及药品485.2清除ABTS+测定495.2.1 ABTS+自由基的配制495.2.2标准曲线的绘制495.3样液的测定515.4测定单因素对清除ABTS+自由基能力的影响516.单因素实验总结56致谢59参考文献601 前 言 黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。 近年来， 针对黄酮类化合物的药理活性的研究有很多。由于黄酮类化合物分布广泛，所以它们具有多种药理活性。经研究表明，黄酮具有很好的心血管系统活性，不少治疗冠心病的中成药里均含有黄酮类化合物。黄酮除了具有心血管活性之外，还具有抗菌及抗病毒活性、抗菌及抗病毒活性、抗炎。此外，大量研究表明黄酮类化合物还具有降压、降血脂、抗衰老、提高机体免疫力、泻下、镇咳、祛痰、解痉及抗变态等药理活性。用超声波有机溶剂法提取黄酮类物质，是近几年来新发展的方法，具有效率高、时间短、操作简便、节能等优点。超声提取技术的基本原理主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取。因此，超声波不仅大大缩短了提取时间，而且提高了有效成分的提出率以及原料的利用率。而且超声提取技术能避免高温高压对有效成分的破坏。 自由基与人的病理（心脏病、糖尿病、肿瘤、动脉粥样硬化、类