生化考研重点知识总结第一章 单糖多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：6唾液淀粉酶激活剂：Cl-几个典型非还原糖：蔗糖、糖原、淀粉形成N-糖肽键的单糖或衍生物是： 第二章 油脂几个非饱和脂肪酸双键数：油酸：1 亚油酸：2 亚麻酸：3人不能自身合成的必须脂肪酸： 亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白：CM：乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯 VLDL：极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘 油酯 LDL：低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇 HDL：高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇 第三章 氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写两特殊：Pro、Gly芳香：酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe）八种必需氨基酸：甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr侧链为羟基氨基酸：苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr）酸性氨基酸：天（Asp）谷（Glu）对应两酰胺：Asn、Gln碱性氨基酸：赖（Lys）精（Arg）组（His）其它：丙氨酸（Ala）PIPI的计算：PI=（PK1+PK2）/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2PH的计算：PH=PK1+Lg（R/R+）=PK2+Lg（R-/R）PH =7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PIPI 时有R-蛋白二级结构螺旋：Sn=3.613，存在Pro时不形成螺旋，右手螺旋折叠：同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距0.35nm转角：转角处为Gly超二级结构：无规卷曲、结构域三级结构：作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力）蛋白结构分析N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法C端分析法：羧肽酶法、无水肼解法 羧肽酶A：不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解打开二硫键：还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）专一切断：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）；显色反应Follin酚：蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸）Millon：红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2）坂口反应：红色，胍基（Arg），组分（萘酚，NaClO）黄色反应：黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3）双缩脲反应：紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4）乙醛酸反应：紫色，吲哚基（Trp）几种重要氨基酸提供活性甲基的：S-腺苷Met形成N-糖肽键的：Asp胶原蛋白中含量高的氨基酸：Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys蛋白分离纯化技术：透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：机理分子运动速度决定因素：大小、电荷量、形状蛋白离子交换层析与洗脱：凝胶电泳三效应：电荷、分子筛、浓度效应蛋白含量测定测N：凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光测M：沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS-PAGE凯氏定氮：HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2其它分离二硫基的肽段可用：SDS-PAGE几个主要氨基酸的PI值：几种重要蛋白：镰刀贫血病：GluVal，第6位与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：Cys（半胱氨酸）第四章 酶学酶活化中心组成：结合部位、催化部位计算：活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点：Km、Vmax几个抑制作用：竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO）酶促反应初速度与E、T有关以“三点结合”模型作用的酶：甘油激酶酶的专一性专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：以O2为直接氢受体的氧化酶：VC氧化酶、细胞色素氧化酶别构酶两独立功能部位：活性中心、变构中心动力学曲线：S型，其它为双曲线具有效应：协同效应、变构效应典型代表血红蛋白：协同效应、波尔效应、变构效应酶分离纯化要求：纯化倍数高、回收率高纯化倍数=比活力/纯化前总比活力 回收率=活力单位数/纯化前活力单位数方法：同蛋白质竞争性抑制剂：增S可减弱抑制作用患尿黑酸症的病人是由于：缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遗传缺陷）第五章 核酸反向互补配对：ACG-CGT（U）N-苷键：（C1-C5），嘌呤（N9-C1），嘧啶（N1-C1）SnRNA：核仁不均一RNA，功能（促进转录、）核酸分离技术 凝胶电泳：三效应、分子运动速度决定因素 见蛋白质离子交换层析：阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：UGCA 阴离子交换层析，核苷酸脱下顺序：CAUG 亲和层析：可用亲和层析法分离的核酸：mRNA（PolyA尾）DNA测序三法：加减法（Sanger、1975），化学断裂法，双脱氧终止法（Sanger、1977、原理）不能形成两性离子的核苷酸是UMP：原因cNMP最重要的cNMP：cAMP、cGMPcAMP：第二信使cAMP分子内有：环化的磷酸二酯键cAMP与cGMP：生物作用并不是完全相反第六章 分子生物学与基因工程基因组学启动子组成3部分：识别部位（-35、CG/CAAT），结合部位（-10、TATA），转录起始点高度重复序列：卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA原核生物基因重叠类型：基因家族按特点分三类：简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族 基因家族按组成分三类：DNA复制DNA复制方式：线性（眼型），环状【（大肠杆菌）、滚环（病毒质粒）、D型（线粒体、叶绿体）】DNA复制需引物：转录不需引物原核DNA聚合酶功能：损伤修复、校正、合成DNA基因工程酶RNase:RNaseA(嘧啶35)、RNaseT1（G的35）、RNaseT2（A的35）DNA连接酶所需能量：原核ATP、真核NAD+转移水解DNA-RNA中的RNA的酶：RNaseH、逆转录酶（有RNaseH活性）牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物：5磷酸切开，产生3单磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物：3-OH切开，产生5单磷酸核苷核酸合成酶：DDDP（依赖DNA的DNA聚合酶）、RDDP（依赖RNA的DNA聚合酶）、DDRP（依赖DNA的RNA聚合酶）RNAPol2：RNAPolB，合成hnRNA，分布在核质中RNA用强碱水解产生：2 -核苷酸、3-核苷酸混合物限制内切酶切割特点：4-8bp、6bp主要，成黏性、平齐末端，成回文序列，甲基化难切tRNA结构含稀有碱基最多：D（二氢尿嘧啶）、（假尿嘧啶）、I（次黄嘌呤）四环四臂五区：D臂、TC臂、氨基酸臂（受体臂）、反密码子臂二级：三叶草三级：倒L基因表达DNA重组过程中DNA连接四方式：粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加DNA接头连接法转位：三类转位因子【（插入序列IS）、转座子（Tn）、可转座噬菌体】，转位后遗传效应（突变、产生新基因、染色体畸变）转录：转录5端常见起始核苷酸是G、A，原核终止子在终止位点前有PolyU翻译：参与肽链延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基转移酶催化组分（23SrRNA），蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解转录抑制剂：利福平、利迪链霉素、放线素D、-鹅膏蕈碱翻译抑制剂：抗生素（氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素）机理 干扰素（使起始因子eIF2磷酸化失活），毒素（抑制真核肽链延长）基因工程基因工程载体：必备条件（自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位点少、M大可携带大片基因） 常用载体（质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来）DNA文库：含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列密码子起始密码子：原核（AUG、GUG、UUG，对应fMet）真核（AUG，对应Met）起始tRNA：tRNAMet、tRNAfMet终止密码子：UAA、UAG、UGA无义密码子：UAA、UAG、UGA线粒体中三种特殊密码子：UGA-色氨酸原核RF1识别的密码子：UAA、UAX RF2识别的密码子：UAA、UGA密码子性质：不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性摆动性：A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I-A、U、C其它SnRNA功能：RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性多拷贝基因有：组蛋白基因、3种印迹法对应检测对象：S-DNA、N-RNA、W-ProTm的影响三因素：C三G、盐浓度（Na+）、DNA均一性（均一窄）Tm=（C+G）%0.41+69.3第七章 维生素与激素几种重要酶的辅酶脱羧酶：酮酸脱羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脱羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）磷酸吡哆醛：氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶以FAD为辅酶的酶：二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体磷酸甘油脱氢酶羧化酶的辅酶：生物素（VB7）VB12：钴胺素（参与甲基转移）氧化还原酶的辅酶：NAD+以NADP为辅酶的酶：苹果酸酶、6-p-G脱氢酶以FAK为辅酶的酶：脂酰辅酶A脱氢酶几种特定功能的维生素凝血维生素：VK，脂溶抗血维生素：VC，水溶含A的维生素：NAD+、NADP、FAD、CoASHVD：体内活性最高的VD是：1,25-二羟基胆钙化醇1,25-（OH）2D3两种VD原：VD3（7-脱氢胆固醇），VD2（麦角固醇）VD3的形成：胆固醇7-脱氢胆固醇VD3胰岛素等激素的受体是：含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的蛋白质类激素受体位于：细胞质膜上类固醇激素受体位于：细胞内第八章 生物氧化肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是：磷酸肌酸（IP3）高能化合物有：磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、生物合成中主要的还原剂；NADPH，来源于HMS（磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路）生物氧化过程中，ATP生成方式：底物水平磷酸化、氧化磷酸化线粒体的嵴：外表面与基质接触，含有氧化磷酸化组分ATP合成酶F0F1-ATPase是：催化ATP合成的酶形式，一种膜结合复合物，单独存在时没ATP酶活性F0：含H+通道ATP合成机理