课题专题一基因工程1.1.2基因工程的基本程序导学案考点解读简述基因工程原理及基本操作程序。学习重点基因工程基本操作程序的四个步骤学习难点（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因课时2课时课型新授课【知识梳理】-、目的基因的获取:1目的基因：;也可以是：2. 获取目的基因的方法从基因文库中获取目的基因 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导人受体菌的群体中 ，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库：含有一种生物的 基因，获取方法： 种类-匚cDNA 文库：含有一种生物的 基因，获取方法： 目的基因的获取根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 _产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。【+】利用PCR技术扩增目的基因。 PCR：是一项在 合成技术。 条件：已知目的基因的 序列。 过程：目的基因 DNA受热形成 ，与结合，然后在 的 作用下进行延伸形成DNA。 方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数）人工合成法：基因较小，已知，可以人工合成。二、基因表达载体的构建1 .表达载体的组成： +等。2 启动子：位于基因的，它是结合的部位，驱动基因转录产生 mRNA。3. 终止子：位于基因的 ，终止。4. 表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中 ，并且给下一代；使目的基因_和发挥作用。5. 标记基因： 受体细胞是否含有目的基因。6. 不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。三、将目的基因导入受体细胞（一） 转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和的过程。（二）方法1. 将目的基因导入植一（1）农杆菌转化法 农杆菌特点：易感染 植物和植物，对植物没有感染力；当植物体受损时，伤口处会分泌 ;吸引 。Ti质粒的_可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 转化：目的基因插人 进入农杆菌t导入植物细胞t目的基因整合到植物细胞染色体上t目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2) 基因枪法基因枪法：是 植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。(3) 花粉管通道法花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。(我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)2. 将目的基因导入动物细胞(1) 方法：注射技术。(2) 操作程序：目的基因表达载体 T取卵(受精卵)T显微注射T注射了目的基因的受精卵移植到 性动物的 内发育T新性状动物。3将目的基因导人微生物细胞(1) 原核生物特点：等。(2) 转化：处理细胞T 细胞t表达载体与感受态细胞混合t细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1 分子水平的检测与鉴定： 检测转基因生物染色体的DNA 是否插入。方法： 检测目的基因是否转录。方法： 检测目的基因是否翻译成 。方法： 2 个体水平检测与鉴定：例：搞虫与抗病方法是：。【经典例题】例1下列有关基因工程技术的正确叙述是A 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达例2应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探测疾病的目的。基因探针是指A 用于检测疾病的医疗器械B 用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成3球蛋白的DNAD.合成苯丙羟化酶 DNA片段【基础试题训练】1、构建基因组DNA文库时，首先雷分离细胞的A、染色体 DNA B、线粒体 DNA C、总 mRNA D、tRNA2在基因工程中，把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个)放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是()A.540 个 B.8100 个 C.17280 个 D.7560 个2在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（A. 结构简单，操作方便C. 繁殖速度快B. 遗传物质含量少D.性状稳定，变异少3因工程的操作步骤：使目的基因与运载体相结合，将目的基因导入受体细胞，检测目的基 因的表达是否符合特定性状要求，提取目的基因，正确的操作顺序是（）A .B.C.D .4. 工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中， 不进行碱基互补配对的步骤是 （）A .人工合成基因B .目的基因与运载体结合C .将目的基因导入受体细胞D .目的基因的检测和表达5. 就分于结构而论，质粒是A、环状双链 DNA分子B、环状单链 DNA分于C、环状单链 RNA分子D、线状双链 DNA分子6. 聚合酶链反应可表示为A、 PEC B、 PERC、 PDRD 、 PCR7. 在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNA文库法D、聚合酶链反应8. 有关基因工程的叙述正确的是（）A限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C. 质粒都可作运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料9. 不属于目的基因与运载体结合过程的是（）A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B.用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增D .将切下的目的基因插入到质粒切口处10. 科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是A .采用反转录的方法得到的目的基因B .基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D .用不同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子11. 基因工程常用的受体细胞有大肠杆菌 枯草杆菌 支原体 动植物细胞A .B .C.D .12. 用 DNA 探针检测饮用水中病毒的具体方法是A .与被检测病毒的 DNA碱基序列进行比较 B .与被检测病毒的 DNA碱基序列进行组合C.与被检测病毒的 DNA碱基序列进行杂交 D . A、B、C三种方法均可13. 1976年，美国的H.Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌，并获得表达，此文中的“表达”是指该基因在大肠杆菌()A .能进行DNA复制B.能传递给细菌后代C.能合成生长抑制素释放因子D.能合成人的生长素14在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于()A 目的基因的提取和导入B 目的基因的导入和检测C.目的基因与运载体结合和导入D. 目的基因的提取和与运载体结合15、(05广东)以下有关基因工程的叙述，正确的是A.基因工程是细胞水平上的生物工程B 基因工程的产物对人类全部是有益的C.基因工程产生的变异属于人工诱变D 基因工程育种的优点之一是目的性强16、在药品生产中，有些药品如干扰素，白细胞介素，凝血因子等，以前主要是从生物体的组织、细胞或血液中提取的，由于受原料来源限制，价价十分昂贵，而且产量低，临床供应明显不足。自70年代遗传工程发展起来以后，人们逐步地在人体内发现了相应的目的基因，使之与质粒形成重组DNA，并以重组DNA引入大肠杆菌，最后利用这些工程菌，可以高效率地生产出上述各种高质量低 成本的药品，请分析回答：(1) 在基因工程中，质粒是一种最常用的 ，它广泛地存在于细菌细胞中，是一种很小的环状分子。(2) 在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是 和 。(3) 将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括 和两个阶段。(4)在将质粒导入细菌时，一般要用处理细菌，以增大 。