陕西省地方标准编制说明-小麦品种抗白粉病鉴定技术规范一、工作简况：包括任务来源、协作单位、主要工作过程、起草组组成成员及其所做的主要工作等；“小麦品种抗白粉病鉴定技术规范”的研究来源于西北农林科技大学承担的国家公益性（农业）行业科研专项（禾谷类白粉病和赤霉病控制技术解决方案与示范，nyhyzx07-048）和陕西省13115项目（小麦高效育种技术及新品种选育，2011KTZB02-01-01）。协作单位包括陕西省种子管理站和杨凌现代农业产业标准化研究推广中心。该技术规范的研究主要包括了小麦白粉病病原物的来源、分离和鉴定、田间鉴定圃的设置、室内苗期鉴定方法、田间成株期鉴定方法以及抗性评价等主要工作。主要起草人中，王保通教授全面负责该课题的设计和实施，李强主要负责小麦白粉病病原物的分离、鉴定以及保存方法研究，姚撑民主要负责小麦抗白粉病室内苗期鉴定方法研究，康振生主要负责小麦抗白粉病田间鉴定圃的设置和田间成株期鉴定方法研究，周永明主要负责抗性评价研究。二、标准编制原则和确定标准主要内容：包括技术指标、参数、公式、性能要求、试验方法、检验规则等的依据（包括试验、统计数据）；地方标准修订项目还应当列出和原标准主要差异情况；1陕西省地方标准编制原则 本标准的编制依据中华人民共和国标准法和地方标准管理办法的规定进行编制。2确定地方标准主要内容 本课题组从国家“六五”计划开始就一直承担者陕西省新育成小麦品种、高代品系及育种材料的抗白粉病、赤霉病和条锈病鉴定工作。鉴定结果为陕西省小麦抗病育种和小麦新品种的审定提供参考。本标准是起草组结合本课题组几十年的小麦白粉病温室苗期和田间成株期抗性鉴定的经验，同时结合国内同类研究进展而制定的。（1）适用范围本规范规定了小麦品种白粉病抗性鉴定技术和抗病性评价标准。本规范适用于小麦生产品种、新育成品种、区试品种、农家品种及抗源材料的白粉病抗性鉴定和抗性评价。本规范同时适用于陕西省小麦品种区域试验、生产试验和自然诱发鉴定中的小麦白粉病的病情调查和抗性评价。（2）规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY/T 613-2002 小麦白粉病测报调查规范 NY/T 967-2006 农作物品种审定规范 小麦 NY/T 1443-2007 小麦抗病虫性评价技术规范PSJG1101-2009 农作物品种抗病性鉴定指南 (3) 术语与定义下列术语和定义适用于本标准。 小麦白粉病 Wheat powdery mildew由小麦白粉菌Blumeria graminis f.sp.tritici引起的小麦真菌病害。 反应型(侵染型) Infection type根据寄主植物过敏性坏死反应有无和反应程度来划分的病斑类型。(4) 病原物 病原物来源在陕西省小麦产区不同生态区采集病株，经分离、纯化、毒性鉴定后，按毒性菌株毒性谱建立菌种库。病原物分离与鉴定从发病植株叶片的典型病斑上进行分离纯化，经形态学鉴定确认为Blumeria graminis f.sp. tritici，单孢或单孢子堆分离，经一套已知基因载体品种致病性测定后，进一步在感病品种陕225或京双16上扩繁，保存备用。(植物病理学报，2012,42(3):290-293；麦类作物学报, 2009,29(4):706-711) （5）小麦抗白粉病室内苗期鉴定方法 苗期盆栽法抗性鉴定 在温室中进行，温室温度控制在171之间，自然光照。根据鉴定小麦品种（系）的数量将待测的品种（系）和感病对照（可用陕225或京双16）播种于直径10cm小花盆（少量材料）或50穴的育苗穴盘中（大量材料），每品种（系）播种1盆（穴），58粒种子。播种后加盖透明塑料罩放在温室中培养。待小麦第一片叶完全展开后，用抖接法或扫抹法充分接种白粉菌分生孢子，接种的菌株可根据鉴定的需要和要求选择，可以是纯化的含不同毒性基因型的菌株，也可以是混合菌株。接种后加盖透明塑料罩放在温室培养，7d10d待感病对照陕225或京双16充分发病后，按0、0；、1、2、3、4六级标准记载第一片叶的反应型。（麦类作物学报,2010,30(5):948-953; 麦类作物学报, 2009,29(4):706-711） 苗期离体叶段法抗性鉴定 当温室培养的待测品种（系）和感病对照第一叶完全展开时，在超净台上选取麦苗第一叶，剪3cm长度叶段, 每品种（系）剪3个叶片，整齐排列在直径10 cm培养皿中的水琼脂培养基上（培养基含苯骈咪唑60 g/ml）。然后用提前繁殖的选定菌株的孢子粉在接种筒内对上述离体供试品种（系）的叶段进行接种，接种后盖上培养皿盖，置于171的光照培养箱中培养（16 h光照，8 h黑暗）7d10d后，按0、0；、1、2、3、4六级标准记载品种（系）的反应型。(植物病理学报，2012,42(3):290-293)（6）小麦抗白粉病成株期鉴定方法 鉴定圃的设置田间成株期抗性鉴定圃设置在小麦白粉菌人工诱发鉴定圃或病害常发区域自然诱发鉴定圃。品种种植采用开畦条播、等行距配置方式(图1)。畦埂宽50 cm，畦宽250 cm，畦长视地形、地势而定；距畦埂125 cm处顺畦种1行诱发行，品种可选用陕225或京双16或当地感病品种，在诱发行两侧20 cm横向种植鉴定品种，行长100 cm，行距33 cm，每行播种1个品种（约5 g6 g种子），每隔20行种植一行当地感病品种做对照，重复13次。顺序排列、编号，鉴定圃四周设100 cm宽的保护区。 (麦类作物学报, 2009,29(4):706-711) 接种和调查方法田间成株期抗性鉴定一般在小麦拔节后期接种。接种前，根据鉴定需要选择小麦白粉菌菌株，在温室内（温度控制在171 ）感病品种陕225或京双16幼苗上繁殖。当感病品种充分发病后，采用扫抹法把病菌孢子接于病圃的诱发行上，每隔500 cm接100 cm诱发行。为确保发病充分需在2d3d后于不同接种点再接种一次。接种前(5d7d)、后田间需浇灌(或喷灌)保湿。分别于小麦扬花期和灌浆期各调查一次，按0、1、2、3、4、5、6、7、8、9标准调查(植物保护学报，2008, 35(5):438-442; 麦类作物学报, 2009,29(4):706-711)（7）抗性评价 抗性类别划分标准按反应型划分抗性分级标准最高反应型级别抗性类别缩写类别0型I免疫0;型HR高抗1型R抗2型MR中抗3型S感4型HS高感 按严重度划分抗性类别(麦类作物学报, 2009,29(4):706-711)最高严重度级别抗性类别缩写类别0级I免疫1-2级HR高抗3-4级R抗5-6级HR中抗7-8级S感9级HS高感 抗性评价 在有3年鉴定的结果中，如有2年的抗性类别是一致的，则此抗性类别作为最终鉴定结论。 达到免疫-抗或感-高感类别的鉴定品种，当两年抗性类别不一致时，以记载的被确认的最高病情级别所对应的抗性类别为准。 同一鉴定品种的抗性级别一年在5以上，另一年在5以下的, 则需要做第三次抗性鉴定，重新划分抗性类别。三、试验验证：包括试验（或验证）准确度、可靠性、稳定性的分析和说明，实验结果综述等；本课题组对小麦品种抗白粉病鉴定进行了几十年的试验，以下各种鉴定方法仅举一例说明。1. 小麦品种苗期抗白粉病鉴定（1）苗期盆栽法对陕西省小麦白粉菌的分离鉴定2008年在小麦白粉病发病盛期，分别从陕西省关中地区和陕南地区的23个市、县（青羊驿、汉台区、汉阴、安康、洋县、南郑县、旬阳、瀛湖、大荔、韦庄、合阳、临潼、渭南、兴平、武功、眉县、蔡家坡、岐山、凤翔、扶风、乾县、礼泉、宝鸡陈仓区、青化乡杏园村、青化乡青化村等地区）采集126株小麦白粉菌标样。利用32个已知抗病基因品种进行苗期毒力频率测定。结果表明毒性基因V1，V2，V3a，V3b，V3c，V3d，V3，V5，V6，V8，V17，V2+Ta，V4+8，V1+2+19，V“Era”的毒力频率较高，均在60%以上，说明这些毒性基因在陕西省普遍存在，其对应抗性基因Pm1，Pm2，Pm3a，Pm3b，Pm3c，Pm3d，Pm3f，Pm5，Pm6，Pm8，Pm17，Pm2+Ta，Pm4+8，Pm1+2+19，Pm “Era”抗性效能较差，在生产上已经没有实用价值。V19，V4b，V21，V2+6，V2+6+？，V4+2+？，V5+6的毒力频率在40.16%-57.26%之间，其对应的抗性基因Pm19，Pm4b，Pm21，Pm2+6，Pm2+6+？，Pm4+2+？，Pm5+6单独利用价值较小，但可以与其它抗性基因结合应用。毒性基因V4a，V7，V5(Mli)出现频率在34.29%-38.84%之间，其对应的抗病基因Pm4a，Pm7，Pm5(Mli)尚有一定利用价值。V13，V2+mld，V4b+mli，V“XBD”毒性频率在25.42%-31.17%之间，其对应的抗性基因Pm13，Pm2+mld，Pm4b+mli，Pm“XBD”对小麦白粉病的抗性良好。（2）苗期离体叶段法对小麦品种抗白粉病的鉴定在室内采用离体叶段法对71份小麦品种（系）按本技术规范进行了苗期抗白粉病鉴定，结果发病比较充分（表1），鉴定结果可以对这些材料的苗期抗白粉性作出客观评价。表1 小麦品种（系）苗期抗白粉病鉴定品种编号品种名称品种来源反应型菌株1菌株2103-9-2西北农林科技大学20；2S03-8西北农林科技大学113伟隆158陕西省种子管理站104XM68陕西省种子管理站0；0；5科晨225陕西省种子管理站316X831陕西省种子管理站237红地168陕西省种子管理站10；8KM787陕西省种子管理站1199924陕西省种子管理站3110农大1108陕西省种子管理站0；111西农203西北农林科技大学1412DF6陕西省种子管理站3414668陕西省种子管理站3315西农805西北农林科技大学2217zh153西北农林科技大学30；19小偃58西北农林科技大学4320亿阳106西北农林科技大学3221周育19西北农林科技大学40；22世纪168西北农林科技大学3424伟隆369陕西省种子管理站3125绿丰双大1号陕西省种子管理站3426荣麦2号西北农林科技大学34279905西北农林科技大学30；32西农9872西北农林科技大学30；33陕麦107西北农林科技大学3334小偃54西北农林科技大学3436小偃216西北农林科技大学3437小偃22西北农林科技大学2442皖麦19西北农林科技大学3444绵1227-411西北农林科技大学0045川3023西北农林科技大学